火药烟雾刺激损伤气道上皮及葛根素防护作用的机制研究

发布时间：2017-11-30 07:06

本文关键词：火药烟雾刺激损伤气道上皮及葛根素防护作用的机制研究

【摘要】：目的：1.构建火药烟雾诱导气道上皮细胞损伤实验体系。2.通过火药烟雾诱导气道上皮细胞（BEAS-2B）上调炎性细胞因子基因表达、合成并释放炎性细胞因子蛋白质以及不同剂量葛根素的干预研究，，探讨火药烟雾损伤气道上皮及葛根素防护作用的发生机制。方法：1.在前期实验基础上构建火药烟雾诱导气道上皮细胞损伤实验体系；2. MTT法检测黑火药烟雾作用一定时间后气道上皮细胞存活率；3.根据细胞存活率将实验随机分为五组：①正常对照组（支气管上皮细胞常规培养），②烟雾刺激组（黑火药烟雾刺激10min），③烟雾刺激+葛根素防护组（分别用浓度为25，50，100μg/ml的葛根素于细胞培养12h后对其进行干预）；4.应用ELISA方法定量上述各组细胞培养上清液中炎性细胞因子浓度；5.应用实时荧光定量（Real-time）PCR方法检测上述各组细胞培养2、6、8、12h后支气管上皮细胞中炎性细胞因子基因表达水平。结果：1.黑火药烟雾可导致气道上皮细胞存活率下降（P0.05），加入葛根素后细胞存活率明显提高，且呈剂量依赖性（P0.01）；2.黑火药烟雾作用后，气道上皮细胞培养上清液中炎性细胞因子IL-8（P0.05）、IL-6（P0.01）浓度显著高于正常对照组，葛根素可有效抑制黑火药烟雾诱导气道上皮细胞分泌炎性细胞因子（IL-8、IL-6，P均0.01）并呈浓度依赖性；3.黑火药烟雾作用气道上皮细胞中IL-8和IL-6基因表达显著增加（P均0.01），而培养体系中加入不同浓度葛根素干预，可有效抑制气道上皮细胞中IL-8和IL-6基因的表达（P均0.01）。结论：1.火药烟雾可通过诱导气道上皮细胞中炎性细胞因子基因表达、蛋白质合成和释放而导致其损伤的发生。2.葛根素可通过抑制火药烟雾作用气道上皮细胞中炎性细胞因子基因表达、蛋白质合成和释放而防护火药烟雾所致气道上皮细胞的损伤。
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R285.5;R82

【参考文献】

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