流体剪切应力对模拟失重条件下MG-63成骨样细胞Cbfα1表达的影响
本文选题:模拟失重 切入点:流体剪切应力 出处:《航天医学与医学工程》2007年01期 论文类型:期刊论文
【摘要】:目的观察模拟失重条件下培养的人骨肉瘤MG-63成骨样细胞受流体剪切应力(FSS)作用后核心结合因子α1(Cbfα1)表达的改变,初步探讨失重情况下骨质减少的可能机制。方法MG-63成骨样细胞传代于25ml培养瓶中,培养24h后细胞被随机分为模拟失重组和1G组(每组又下设立FSS作用组和无FSS作用组)。48h后,将细胞置于流室系统中进行刺激实验。FSS强度设为0.5Pa,作用时间分别为15、30和60min。其后提取细胞总RNA,进行反转录PCR,检测细胞内Cbfα1 mRNA的表达,并计算与内参照GAPDH mRNA的比值。同时提取细胞总蛋白,Western Blotting检测Cbfα1蛋白的表达。结果和无FSS作用组相比,FSS作用组的Cbfα1的表达在30min和60min均显著增强,且在一定的时间范围内(15~60min)Cbfα1的表达水平随着作用时间的延长而增加。和1G组相比,模拟失重组的Cbfα1表达水平降低,在30min、60min时有显著的统计学意义。结论FSS可以促进MG-63成骨样细胞内Cbfα1的表达,模拟失重可显著抑制FSS对MG-63成骨样细胞内Cbfα1表达的诱导作用。
[Abstract]:Objective to observe the effect of fluid shear stress (FSS) on the expression of core binding factor 伪 1C bf 伪 1 in cultured human osteosarcoma MG-63 osteoblast-like cells cultured under simulated weightlessness. Methods MG-63 osteoblast-like cells were subcultured in 25ml culture flask. After 24 hours of culture, the cells were randomly divided into two groups: 1 G group and 1 G group (each group was treated with FSS and no FSS group) for 48 h. After the cells were placed in the flow chamber system, the stimulation test. FSS intensity was set to 0.5 Pa. the time of action was 1530 and 60 mins respectively. Then the total RNAs were extracted and the expression of Cbf 伪 1 mRNA in the cells was detected by reverse transcription PCRs. The ratio of GAPDH mRNA to internal reference was calculated. The expression of Cbf 伪 1 protein was detected by Western Blotting. The results showed that the expression of Cbf 伪 1 in FSS-treated group was significantly higher than that in control group at 30min and 60min, and the expression of Cbf 伪 1 in FSS-treated group was significantly higher than that in FSS-treated group at 30min and 60min. In a certain time range, the expression of CBF 伪 1 increased with the prolongation of action time. Compared with 1G group, the expression level of Cbf 伪 1 in simulated lost recombination group was lower than that in control group. Conclusion FSS can promote the expression of Cbf 伪 1 in MG-63 osteoblast-like cells, and simulated weightlessness can significantly inhibit the effect of FSS on Cbf 伪 1 expression in MG-63 osteoblasts.
【作者单位】: 第四军医大学航空航天医学国家教育部重点实验室 第四军医大学航空航天医学国家教育部重点实验室 第四军医大学航空航天医学国家教育部重点实验室 第四军医大学航空航天医学国家教育部重点实验室
【基金】:国家自然科学基金资助项目(30300398)
【分类号】:R852.22
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