晕船易感大鼠脑干组织消减cDNA文库的构建

发布时间：2018-05-12 09:29

  本文选题：晕船 + 抑制消减杂交　； 参考：《中国公共卫生》2004年01期

【摘要】：目的　筛选晕船易感大鼠脑干组织的晕船易感性相关基因 ,为建立晕船易感人群预测方法提供基础数据。方法　以晕船易感大鼠为实验组 ,以非易感大鼠为驱动组 ,抽提脑干组织mRNA ,利用抑制消减杂交技术 (SSH) ,通过 2次抑制性PCR反应得到二者之间差异表达的cDNA。将PCR产物与 pGEM -T载体连接 ,构建消减cDNA文库 ,将连接产物用电击法转化大肠杆菌进行文库扩增。对所得克隆进行PCR扩增鉴定。结果　构建具有高消减效率的消减cDNA文库 ,差异表达的cDNA得到富集 ,文库中包含 470个白色克隆 (高表达 2 60个、低表达 2 10个 ) ,其中442个有插入片段 ,片段大小主要
[Abstract]:Objective to screen the genes related to seasickness in brain stem tissue of seasickness susceptible rats, and to provide basic data for the prediction of seasickness susceptibility. Methods using seasickness susceptible rats as experimental group and non-susceptible rats as driving group, brainstem tissue mRNA was extracted, and the differentially expressed cDNAs were obtained by suppression subtractive hybridization (PCR) reaction. The subtractive cDNA library was constructed by ligating the PCR product with the pGEM -T vector, and the ligated product was transformed into E. coli by electric shock for amplification. The clones were amplified by PCR. Results the subtractive cDNA library with high subtractive efficiency was constructed, and the differentially expressed cDNA was enriched. The library contained 470 white clones (260 high expression and 210 low expression), of which 442 had inserted fragments. Segment size
【作者单位】： 第二军医大学军队卫生学教研室 第二军医大学军队卫生学教研室 第二军医大学军队卫生学教研室 第二军医大学军队卫生学教研室
【分类号】：R83

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本文编号：1878067