五种生物恐怖细菌基因悬浮芯片多重检测方法的建立

发布时间：2018-10-21 11:40

【摘要】：目的建立5种生物恐怖细菌的快速、高通量的基因悬浮芯片检测方法,即炭疽芽胞杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、土拉弗朗西斯菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的多重检测。方法针对炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、土拉弗朗西菌、类鼻疽伯克霍尔德菌的特异性基因序列设计6对引物和相应的特异性探针,经多重PCR扩增并用生物素标记相应的基因片段,标记的PCR产物与包被在不同编码微球上的相应探针杂交,用悬浮芯片扫描仪检测。结果多重PCR悬浮芯片检测体系能够正确的检测和鉴定5种生物恐怖细菌,特异性好,灵敏度高,可用于恐怖样本的高通量筛查。结论建立了多重PCR基因悬浮芯片快速检测几种生物恐怖细菌的方法。
[Abstract]:Objective to establish a rapid and high-throughput microarray assay for the detection of five bioterrorism bacteria, I. e. Bacillus anthracis, Yersinia pestis, Brucella brucelis, TullaFrancis and Burkhold-like bacillus mallei, for multiple detection of Bacillus anthracis, Yersinia pestis, Brucella spp. Methods six pairs of primers and corresponding specific probes were designed for the specific gene sequences of Bacillus anthracis, Yersinia pestis, Brucella, Bacillus brucellae and Bacillus mallei. The corresponding gene fragments were labeled with biotin by multiple PCR amplification. The labeled PCR products were hybridized with the corresponding probes coated on different coding microspheres, and detected by suspension chip scanner. Results the multiplex PCR suspension microarray system can correctly detect and identify five bioterrorism bacteria with good specificity and high sensitivity. It can be used for high-throughput screening of terrorist samples. Conclusion A multiplex PCR gene suspension microarray was established for rapid detection of several bioterrorism bacteria.
【作者单位】： 四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室;中国检验检疫科学研究院;
【基金】：十一五国家科技支撑计划项目(2006BAK10B07)资助
【分类号】：R82;R450

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本文编号：2284982