海蜇活性肽的制备及降血压效果的研究

发布时间：2017-03-20 19:11

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【摘要】：本文对新鲜海蜇的头部和腕部进行了一般成分和氨基酸成分的分析，海蜇的蛋白占其干重的50％，其氨基酸成分种类齐全，必须氨基酸含量丰富。分别用酸性蛋白酶、中型蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶胰、蛋白酶以及复合酶对海蜇的蛋白部分进行了酶解，并根据酶解后对ACE抑制活性的强弱，选择出碱性蛋白酶为制备ACE抑制肽的最佳水解酶。通过正交试验，确定出碱性蛋白酶酶解的最适反应条件为酶用量为2％，反应温度为50℃，pH值为9，底物浓度为4％，反应后的水解度为41.8％，酸溶性肽为31.3mg／ml。并对测定海蜇水解液脱苦、调味、杀菌后ACE的抑制活性没有改变。 对海蛰水解液进行超滤膜分离，选用截流分子量为2500和250的膜进行分离出三个部分，结果表明，分子量在250—2500之间的组分对ACE的抑制活性最强并动物试验中效果明显，再用SephedexG—15凝胶过滤对其进一步分离，分离出对ACE抑制活性较强的组分Ⅲ、组分Ⅳ，进行抗消化实验和氨基酸组成分析，组分Ⅲ、组分Ⅳ被消化酶处理后，活性下降不大，保持较高的ACE抑制活性。组分Ⅲ主要包括Pro、Tyr、Leu、Gly、Lys、Glu6种氨基酸；组分Ⅳ主要包括Tyr、Val、Met、Glu、Gly5种氨基酸。 动物实验主要研究了海蜇中降压肽对肾动脉狭窄和L—NNA药物两种高血压模型的血压和心率的影响。肾动脉狭窄型组灌胃和L-NNA药物组的最小有效分别为0.6g／Kg和0.8g／Kg。肾动脉狭窄型动物灌胃最小有效剂量的海蜇降压肽其血压下降为22／16mmHg(收缩压／舒张压)，持续时间为4小时，同样条件，L—NNA药物组血压下降15／8mmHg(收缩压／舒张压)，，持续时间为6小时。并且在海蜇降压肽降压过程中，对心率也有一定的平稳作用。由LD50毒理试验，海蜇降压肽LD50均大于10g／kg．bw。根据急性毒性分级，海蛰降压肽属于实际无毒物质。
【关键词】：海蜇 血管紧张素酶抑制肽 制备 降血压
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R96;TQ464.7
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 0 绪论8-23
• 1.生物活性肽研究进展8-12
• 1.1 生物活性肽的概况8
• 1.2 生物活性肽的特点与分类8-9
• 1.3 生物活性肽的功能的研究9-11
• 1.4 生物活性肽的制备11-12
• 2.抗高血压药物及食物中ACE抑制剂的研究进展12-19
• 2.1.高血压的现状12
• 2.2 抗高血压药物的研究进展12-14
• 2.3 食物中ACE抑制肽14-19
• 3.立题的依据及研究目的意义19-23
• 3.1 海洋活性肽研究的前景19-20
• 3.2 海蜇养殖加工现20-21
• 3.3 立题的目的和意义21-23
• 第一章 海蜇的化学成分分析23-27
• 1.实验材料与方法23-24
• 2结果与讨论24-27
• 第二章 海蜇降血压肽的制备27-40
• 1.ACE酶的提取和活性确定27-31
• 2.酶解条件的确定及参数的建立31-40
• 2.1 不同酶系生产降压肽活性的比较31-33
• 2.2 复合酶系对产物ACE抑制活性的影响33-37
• 2.3 酶解条件的优化37-38
• 2.4 水解参数的建立38-40
• 第三章 海蜇降血肽的初步分离纯化40-47
• 1.材料与方法40-42
• 2结果与讨论42-45
• 3.小结45-47
• 第四章 海蜇降血压肽动物降压效果的研究47-56
• 1材料与方法47-49
• 2结果49-54
• 3小结54-56
• 结论56-58
• 建议58-59
• 参考文献59-64
• 致谢64

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本文编号：258319