敌百虫代谢产物分析与检测的方法研究
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【摘要】:目的:通过分析敌百虫在SD大鼠体内的代谢产物,探讨其在大鼠体内可能的代谢途径。方法:1.动物模型建立:36只SD大鼠分为对照组(n=9)及低(n=9)、中(n=9)、高(n=9)三个染毒组,敌百虫以2mg/kg、10mg/kg、50mg/kg染毒剂量经口染毒,蒸馏水饲喂为对照组,连续灌胃30天,于实验结束当天留取给药后24h尿液、EDTA抗凝全血、心、肝、脾、肺、肾及脑组织。2.利用GC/MS技术鉴定敌百虫在大鼠尿液、血液及组织中的代谢产物。3.建立GC-ECD对尿液及组织中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的定量分析方法:尿液经乙腈液液萃取,组织经匀浆后超声波萃取,以1,3-二氯-2-丙醇和2-氯乙酰胺作为双内标,采用HP-INNOWAX(30 m×0.32 mm×0.25μm)色谱柱,ECD检测器,检测器温度为280℃。进样口温度为200℃,不分流进样,进样量为1μL。程序升温为初始温度120℃保持2 min,以10℃/min升至150℃保持1 min,再以10℃/min升至200℃保持1 min,最后以5℃/min升至240℃保持2 min。4.利用GC-FPD分析尿液、血液及组织中的DMP。5.将尿液、血液及组织中敌百虫代谢产物的数据使用SPSS21.0统计软件进行数据分析,初步探讨其可能代谢途径。结果:1.利用GC/MS在肝脏中检出三氯乙醇,尿液和肾脏中检出三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺,其中2,2-二氯乙酰胺是首次发现的代谢产物。2.建立GC-ECD分析尿液及组织中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的定量方法,三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺分别在2.84 ng/ml~210.52 ng/ml、42.51 ng/ml~411 ng/ml质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均在0.99以上,最低检测限分别为0.82 ng/ml、13.23ng/ml,回收率在75.09%~109.55%之间。3.尿液、血液及组织中的代谢产物含量随着敌百虫的暴露剂量的增加而增加,差异具有统计学意义(p0.05),且均与敌百虫的暴露水平显著相关(p0.01),尿液、血液中的代谢产物含量与各个组织中的DMP含量均显著相关(p0.05)。4.敌百虫在体内的代谢途径,一为敌百虫P-C链断裂生成DMP和三氯乙醇,二为敌百虫代谢为敌敌畏,再水解为磷酸二甲酯和二氯乙醛,二氯乙醛进一步代谢为2,2-二氯乙酰胺。结论:1.通过GC/MS鉴定出敌百虫的代谢产物三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺。2.GC-ECD对尿液、组织中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的定量分析方法所涉及的样品前处理手段简单、快速、可操作性强,且能较好的提取分离出待测物质,测定数据可靠,可用于尿液、组织中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的含量分析。3.三氯乙醇和2,2-二氯乙酰胺可以作为接触标志物反应敌百虫的暴露情况。4.根据GC/MS、GC-ECD、GC-FPD的测定结果对敌百虫在大鼠体内的代谢途径做了初步推断。
【关键词】:敌百虫 代谢产物 三氯乙醇 2 2-二氯乙酰胺 气相色谱法
【学位授予单位】:贵阳医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R965;R927
【目录】:
- 中文摘要4-6
- 英文摘要6-10
- 缩略词表10-11
- 引言11-14
- 一、敌百虫暴露动物模型的建立14-16
- 二、GC/MS鉴定尿液、血液及组织中敌百虫代谢产物16-22
- 三、建立GC-ECD对尿液中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的定量分析方法22-31
- 四、建立GC-ECD对组织样品中三氯乙醇、2,2-二氯乙酰胺的定量分析方法31-40
- 无、GC-FPD测定尿液、血液及组织样品中的DMP40-47
- 六、敌百虫代谢产物的分析及体内代谢的探讨47-53
- 结论53-54
- 参考文献54-59
- 综述59-69
- 参考文献66-69
- 作者简历69-70
- 致谢70-71
- 学位论文数据集71
【参考文献】
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,本文编号:300388
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