氯沙坦对百草枯急性染毒大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

发布时间：2017-04-14 01:12

  本文关键词：氯沙坦对百草枯急性染毒大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：探讨氯沙坦(Losartan)对百草枯(paraquat, PQ)急性染毒大鼠肺损伤和肺纤维化的干预作用及其机制。方法：32只成年雄性SD大鼠(180-220g)随机分为对照组、百草枯组(PQ组)以及氯沙坦干预组(氯沙坦7d组和14d组)。对照组每天灌胃生理盐水至第15天；PQ组为PQ 40 mg/kg 1次性灌胃染毒,此后第二天连续每天等容积灌胃生理盐水至第15天；氯沙坦干预7d和14d组为PQ 40 mg/kg 1次性灌胃染毒,此后第二天每天1次灌胃氯沙坦10 mg/kg连续7d和14d。各组大鼠分别于染毒后第16d颈椎脱位法处死并取肺组织。(1)常规制备肺组织病理切片,HE染色,光学显微镜观察肺组织损伤程度。(2)常规制备肺组织病理切片,Masson染色,光学显微镜观察肺纤维化程度。 (3)碱水解法测定肺组织中羟脯氨酸的含量。(4)采用western blot技术检测肺组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达水平。(5)制备肺组织匀浆,用分光光度法测定肺组织匀浆中总超氧化物歧化酶(T-SOD)过氧化氢酶(CAT)活力以及总抗氧化能力(T-AOC)和脂质过氧化物(LPO)含量。(6)采用实时荧光定量PCR法检测肺组织中核因子-κB (nuclear factor-κB, NF-κB)、转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1, TGF-β1)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9, Mmp9)和基质金属蛋白酶抑制因子1 (tissue inhibitor of metalloproteinase-1, TIMP-1) mRNA表达水平。结果： (1)HE染色结果显示,PQ急性染毒后大鼠肺组织炎性改变明显,肺间隔弥漫性显著增宽,肺泡腔和肺间质内可见大量炎性细胞浸润,经氯沙坦干预后有一定程度的逆转。 (2)Masson染色结果表明,PQ染毒后肺组织出现明显的纤维化,肺泡间隔及肺间质内可见大量胶原蛋白沉积,经氯沙坦干预后纤维化程度明显减轻。(3)与对照组比较,PQ组羟脯氨酸含量明显升高(P0.05)。与PQ组比较,氯沙坦干预7d组羟脯氨酸含量降低,氯沙坦干预14d组羟脯氨酸含量明显降低(P0.05),并逐渐恢复至正常水平。(4)western blot检测结果显示,与对照组比较,PQ组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白含量均明显升高(P0.05)与PQ组比较,氯沙坦干预7d组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白含量均有所降低,但仅Ⅰ型胶原蛋白含量变化有统计学意义(P0.05),氯沙坦干预14d组Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白含量均明显降低(P0.05),且氯沙坦干预7d和14d组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白含量均基本恢复至正常水平。(5)与对照组比较,PQ染毒组大鼠肺组织匀浆中T-SOD和CAT活力均明显降低,T-AOC下降,LPO含量明显升高(P0.05)。与PQ组比较,氯沙坦干预7d和14d组T-SOD和CAT活力及T-AOC均升高,而LPO含量明显降低(P0.05)。其中氯沙坦干预7d和14d组T-AOC和LPO含量,以及氯沙坦干预14d组SOD和CAT活力基本恢复正常。(6)实时荧光定量PCR结果显示,与对照组比较,r,Q组NF-κB、TGF-β1、Mmp9和TIMP-1的mRNA表达水平明显上调(P0.05)。与PQ组比较,氯沙坦干预7d和14d组NF-κB、TGF-β1、Mmp9和TIMP-1的mRNA表达水平均显著下调(P0.05),并逐渐恢复至正常水平。结论：PQ急性染毒后大鼠肺组织出现了明显的急性损伤和纤维化,经氯沙坦干预后均有一定程度的好转。其机制可能是氯沙坦提高了肺组织的抗氧化能力,并抑制NF-κB和TGF-β1等致纤维化因子基因的表达而发挥对肺组织的保护作用。
【关键词】：氯沙坦 百草枯 急性肺损伤 肺纤维化 羟脯氨酸 胶原蛋白 NF-κB TGF-β1 Mmp9 TIMP-1
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R965
【目录】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-8
• 前言8-14
• 材料与方法14-26
• 结果26-32
• 讨论32-38
• 全文总结38-39
• 参考文献39-45
• 在学期间研究成果45-46
• 致谢46-47
• 附录47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 赵军;刘振权;罗爱国;艾浩;宋建军;赵金龙;朱海燕;;黄芪多糖对大鼠慢性阻塞性肺疾病羟脯氨酸和基质金属蛋白酶-9的影响[J];北京中医药大学学报;2009年11期

2 陈慧;石汉文;田英平;;百草枯中毒致肺损伤的研究进展[J];临床荟萃;2006年02期

3 沈兴;陈书琴;陈琳琳;刘勤;罗平;;氯沙坦干预心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡机制的研究[J];西部医学;2012年03期

  本文关键词：氯沙坦对百草枯急性染毒大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：304879