以肿瘤细胞Rac1蛋白为靶点的在黄酸衍生物的设计与合成策略研究

发布时间：2017-05-03 02:19

  本文关键词：以肿瘤细胞Rac1蛋白为靶点的在黄酸衍生物的设计与合成策略研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[目的]选择放射增敏节点蛋白Rac1为研究对象,通过分子对接技术,研究蒽醌化合物与Rac1蛋白的相互作用模式。并以分子对接结果为依据,指导合成大黄酸衍生物,通过体外活性实验验证其靶向性,探索靶向Rac1蛋白化合物的设计与合成的新策略。[方法](1)采用计算机分子对接软件AutoDock4.2等软件,研究蒽醌化合物与Rac1蛋白的结合模式。(2)以大黄酸为先导化合物,利用有机合成反应,合成大黄酸含氮的脂肪胺和哌嗪类衍生物,利用波谱技术进行结构解析。(3)通过MTT实验、WB实验来检测大黄酸衍生物对鼻咽癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、骨肉瘤细胞的生长抑制作用和对Racl蛋白的影响。[结果](1)大黄酚、大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄素等五种常见蒽醌化合物与Rac1蛋白两个不同活性腔都能有效对接,大黄酸与Racl蛋白结合自由能最低。(2)大黄酸哌嗪衍生物和大黄酸含N的脂肪胺衍生物与Rac1蛋白亲和力均高于大黄酸。(3)成功合成出脂肪胺大黄酸衍生物RN-2和哌嗪类大黄酸衍生物RP-3、RP-4,并经波谱证实。(4)MTT实验表明,大黄酸衍生物RX-1和RN-2对各种肿瘤细胞的抑制率较强,IC50值均低于大黄酸；HepG2 2.15细胞对大黄酸及各衍生物的敏感性最高。(5)WB实验表明,四种大黄酸衍生物作用6种细胞后,除了卵巢癌SKOV3细胞外,其余5种细胞与空白组细胞相比, Rac1蛋白均高表达；对于鼻咽癌CNE-1和CNE-2细胞,RP-4化合物相对其他化合物对细胞的Rac1蛋白表现出较强的激活能力(P0.001)。RN-2化合物与空白细胞比较,对于肝癌HepG2 2.15和肺癌A549细胞具有较强的Rac1蛋白激活能力(P0.01)。(6)分子对接及WB实验证实,激活Rac1蛋白的大黄酸衍生物,均与Rac1蛋白活性腔中氨基酸Ala59形成氢键。[结论]Rac1蛋白可能是大黄酸衍生物抗肿瘤作用的结合靶点,大黄酸8位羟基上连接含N脂肪胺和哌嗪结构片段,有利于提高与RAC1蛋白的结合能力,具有潜在的激活RAC1蛋白的活性。Rac1蛋白活性腔中氨基酸Asn39、Ala59有望成为筛选Rac1蛋白激活剂的重要指标。
【关键词】：大黄酸 抗肿瘤 分子对接 Racl 蛋白靶点
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R914
【目录】：

• 个人简历3-6
• 主要英汉缩略语名词对照6-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-17
• 参考文献15-17
• 第一章 以肿瘤细胞Rac1为靶点的蒽醌衍生物的分子对接研究17-35
• 1 分子对接技术简介17-18
• 2 五种蒽醌化合物与Rac1蛋白的分子对接研究18-24
• 3 五种蒽醌化合物与Rac1蛋白不同活性腔的分子对接24-25
• 4 大黄酸衍生物的结构设计25-29
• 5 讨论29-32
• 参考文献32-35
• 第二章 大黄酸衍生物的合成35-46
• 1 仪器设备与材料试剂35-36
• 2 大黄酸衍生物的合成36-44
• 3 讨论44-45
• 参考文献45-46
• 第三章 大黄酸衍生物对肿瘤细胞Rac1蛋白表达的影响46-63
• 1 仪器和试剂46-48
• 2 实验方法48-51
• 3 实验结果51-59
• 4 讨论59-61
• 参考文献61-63
• 全文总结63-64
• 附录64-66
• 文献综述66-77
• 参考文献74-77
• 致谢77-78
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录78
• 攻读硕士学位期间参与的项目78

【参考文献】

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本文编号：342156