肺癌特异性结合多肽ZP-1在大鼠体内的药动学研究

发布时间：2017-05-20 11:13

  本文关键词：肺癌特异性结合多肽ZP-1在大鼠体内的药动学研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：肺癌特异性结合多肽ZP-1(DDP-Arg-Gly-Gln)是一种顺铂与小分子三肽耦连而成的化合物,它对肺癌细胞具有靶向性抑制。其可诱导肿瘤细胞的凋亡,该过程与caspase-3的激活有关。近年来药效学研究证明:ZP-1具有肝肾毒性小、组织特异性强、抑瘤率高及延长荷瘤小鼠生存期等特点[1-3]。目前,该候选物尚处于临床前研究阶段,且国内(外)均未见有关ZP-1药代动力学研究的报道[4-6]。本文的目的在于对其临床前药物代谢动力学进行研究,为其下一步临床药代动力学研究提供参考依据。一、SD大鼠血浆中ZP-1分析方法的建立使用高效液相色谱技术(HPLC)进行对ZP-1在SD大鼠血浆中浓度的检测方法学研究。通过对流动相的筛选,最终选取0.1%的三氟乙酸水溶液和0.1%的三氟乙酸乙腈溶液(97:3)作为分析血浆样品的流动相,并采用等度洗脱方式;ZP-1在大鼠血浆中较不稳定,故采用50%的三氟乙酸水溶液进行血浆蛋白的沉淀,既可阻止血浆中多肽类酶对ZP-1的代谢,又可提高其在血浆中的回收率(80%)。同时对所建立的ZP-1分析方法进行了确证,结果显示:该方法的特异性、定量限、标准曲线、精密度、准确度及回收率均符合生物样品分析方法的要求,可用于SD大鼠血浆中ZP-1的药动学研究。二、ZP-1在SD大鼠体内的药代动力学研究采用所建立的HPLC测定方法及大鼠股静脉给药方式,高(38.3 mg/kg)、中(25.5 mg/kg)、低(17 mg/kg)三个剂量给药进行药动学研究。结果显示,ZP-1在大鼠体内的半衰期较短,代谢较快,表观分布容积较小,剂量与AUC成正比,ZP-1在大鼠体内的药代动力学行为符合一室模型。高、中、低三个剂量的半衰期(t1/2)分别为17.94±2.23 min、15.92±2.41min、15.05±1.69 min;药时曲线下面积(AUC0-t)分别为1440.99±48.78 mg/L·min、821.34±73.54 mg/L·min、568.13±56.26 mg/L·min;清除率(CL)分别为0.025±0.006 L/min/kg、0.021±0.004L/min/kg、0.027±0.004 L/min/kg;表观分布容积(V)分别为0.55±0.062 L/kg、0.61±0.075 L/kg、0.70±0.12 L/kg;平均滞留时间(MRT0-t)分别为13.22±3.41min、14.46±2.11 min、16.56±2.31 min。三、ZP-1在大鼠组织匀浆中的稳定性研究肺癌特异性结合多肽ZP-1(DDP-Arg-Gly-Gln)含有顺铂和精氨酸,顺铂容易被水解,精氨酸容易被氧化。同时生物基质中广泛存在着各种水解蛋白酶容易使多肽类药物快速降解,因而导致药物的半衰期较短。为此,本章对大鼠不同组织匀浆中ZP-1代谢稳定性进行了研究。在第一章结果中显示,ZP-1在生理盐水中是稳定的。通过ZP-1在大鼠肝匀浆、肾匀浆、肺匀浆及小肠匀浆的体外恒温孵育实验中发现,ZP-1的降解速率为肺脏肾脏肝脏小肠,半衰期分别为6.5,12.1,16.3,19.7 min。实验结果表明,ZP-1在大鼠肺脏、肾脏、肝脏及小肠组织中均有代谢(降解)且半衰均较短。四、基于大鼠原位肠-肝血管灌流模型对ZP-1处置的研究本章采用大鼠原位肠-肝血管灌流模型对ZP-1的吸收和代谢进行了研究。在单向原位肠-肝血管灌流实验中,向大鼠上肠系膜动脉持续输入ZP-1,不同时间点在门静脉和肝静脉处收集血浆灌流样品,结果显示,ZP-1的肠、肝提取率都非常高,他们的提取率分别为肠提取率(48±6.1)%和肝提取率(78±7.4)%,表明该化合物在肝细胞比肠细胞代谢快。在循环肠血管灌流实验中,大鼠十二指肠注射给药,不同时间点于储液池中采样,结果显示,ZP-1在肠道中被大量代谢,ZP-1的吸收量仅为0.81%,存在严重的肠道代谢。总之,该化合物吸收差,有明显的首过效应(首过效应包括肠代谢及肝代谢),不适合采用口服给药方式。
【关键词】：肺癌 ZP-1 药代动力学 大鼠 HPLC 原位肠-肝血管灌流模型
【学位授予单位】：广东药学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R965
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-19
• 第一章 肺癌特异性结合多肽ZP-1 在大鼠血浆中HPLC分析方法的建立19-32
• 1 实验材料19-20
• 1.1 药品及试剂19-20
• 1.2 仪器及设备20
• 1.3 实验动物20
• 2 ZP-1 实验方法20-21
• 2.1 溶液配制20-21
• 2.2 血浆样品的预处理21
• 2.3 色谱条件21
• 3 数据分析21
• 4 ZP-1 血浆样品的分析方法学的建立21-29
• 4.1 特异性21-23
• 4.2 标准曲线的绘制23-24
• 4.3 精密度和准确度24-25
• 4.4 提取回收率25-26
• 4.5 稳定性26-29
• 5 分析与讨论29-32
• 第二章 肺癌特异性结合多肽ZP-1 在大鼠体内的药动学研究32-38
• 1 实验材料32
• 1.1 药品和试剂32
• 1.2 仪器及设备32
• 1.3 实验动物32
• 2 实验方法32-33
• 2.1 实验目的32
• 2.2 给药剂量的选择32-33
• 2.3 给药方案33
• 2.4 样品的采集及处理33
• 3 数据分析33
• 4 结果33-36
• 4.1 ZP-1 给药后在大鼠体内血药浓度的经时过程33-35
• 4.2 ZP-1 在大鼠血浆中的平均血药浓度-时间图35-36
• 4.3 静脉注射ZP-1 在大鼠体内的药动学参数36
• 5 分析与讨论36-38
• 第三章 肺癌特异性结合多肽ZP-1 在大鼠组织匀浆中的稳定性研究38-49
• 1 实验材料38-39
• 1.1 药品及试剂38
• 1.2 仪器及设备38-39
• 1.3 实验动物39
• 2 实验方法39-40
• 2.1 溶液配制39
• 2.2 组织样品分析方法的建立39
• 2.3 组织匀浆的制备39-40
• 2.4 ZP-1 的降解实验40
• 3 统计学分析40
• 4 结果40-48
• 4.1 分析方法建立40-46
• 4.2 ZP-1 降解实验46-48
• 5 分析与讨论48-49
• 第四章 基于大鼠原位肠-肝血管灌流模型对ZP-1 处置的研究49-58
• 1 实验材料49-50
• 1.1 药品和试剂49-50
• 1.2 仪器及设备50
• 1.3 实验动物50
• 2 实验方法50-51
• 2.1 K-R缓冲液的配制50
• 2.2 样品处理及分析方法50
• 2.3 灌流模型的建立50-51
• 3 数据处理51-52
• 4 结果52-56
• 4.1 ZP-1 通过IPIL模型的动力学过程52-54
• 4.2 循环肠血管灌流模型中ZP-1 的处置过程54-56
• 5 分析与讨论56-58
• 全文总结58-59
• 创新性59-60
• 参考文献60-69
• 攻读学位期间发表的主要论文69
• 参与课题69-70
• 略缩词中英文对照70-71
• 致谢71

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 杨本坤;王素军;曾洁;钟运鸣;臧林泉;;大鼠在体单向肠灌流模型研究肉桂酸肠道吸收特性[J];广东药学院学报;2013年01期

2 王素军;潘雪刁;臧林泉;王桂香;石磊;谢海棠;;基于特异性结合多肽ZS-1的肺癌新肿瘤标志物的筛选[J];中国临床药理学与治疗学;2010年12期

3 王素军;莫李立;杨本坤;臧林泉;潘雪刁;王桂香;谭毓治;谢海棠;;大鼠原位肠肝血管灌流模型的优化及完善[J];中国临床药理学与治疗学;2012年04期

4 穆昱;陈艳;王熙才;;整合素与肺癌[J];肿瘤防治研究;2011年03期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 周捷;以噬菌体展示肽库筛选肺癌清特异性多肽及肿瘤标志物[D];广东药学院;2010年

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本文编号：381452