葡萄糖水平对CEES染毒16HBE细胞能量代谢的影响及其机制

发布时间：2017-07-30 14:05

  本文关键词：葡萄糖水平对CEES染毒16HBE细胞能量代谢的影响及其机制

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【摘要】：目的比较在高糖和低糖培养条件下,经半硫芥(CEES)染毒后支气管上皮细胞(16HBE)能量代谢的变化。方法采用高糖(4.5 mg/ml)和低糖(1.1 mg/ml)两种不同培养基培养16HBE细胞。MTS法比较细胞增殖和CEES染毒后6 h细胞活性差异;用不同剂量CEES染毒两组细胞,24 h后HPLC检测胞内ATP、ADP、AMP含量,并计算ATP/ADP比值、腺苷酸池(总腺嘌呤核苷酸,total adenine nucleotides,TAN)及能荷值(能量负荷值,energy charge,EC),Western印迹检测线粒体能量代谢功能酶COX-10和ISCU变化;流式细胞仪检测0.5 mmol/L CEES染毒后5、8、12、24 h时相点线粒体膜电位(MMP)变化。结果低糖培养的16HBE细胞的增殖明显增加,能量代谢指标ADP、TAN、COX-10和ISCU显著高于高糖组。高于0.5 mmol/L染毒剂量的CEES能显著降低高糖、低糖培养的16HBE细胞的活性,且在1.0 mmol/L下两组间差异有显著意义。高糖组在0.5、1.0 mmol/L染毒24 h后,ATP、ADP、TAN显著增高,而ATP/ADP比值及EC显著降低。低糖组在1.0 mmol/L染毒24 h后,ADP、AMP、TAN显著低于染毒前,而ATP/ADP比值及EC显著高于染毒前。在0.5 mmol/L CEES染毒下,高糖组线粒体膜电位在8~12h显著增加,其后至24 h时恢复至正常水平。低糖组MMP在5 h有一过性显著降低,8 h后与染毒前已无显著差异。高糖培养时,16HBE细胞的氧化磷酸化相关蛋白COX-10和ISCU蛋白水平显著低于低糖培养的细胞;0.5~1.0 mmol/L CEES染毒24 h后,两者的水平显著升高,与低糖组已无显著差异。1.0 mmol/L CEES染毒24 h后,低糖组COX-10和ISCU水平显著降低。结论糖浓度差异会影响16HBE细胞的能量代谢、增殖和CEES损伤后能量应激反应。高糖可能通过增加细胞的应激反应能力抵抗CEES的细胞毒性作用。
【作者单位】： 第三军医大学军事预防医学院毒理学研究所;
【关键词】： 葡萄糖 半硫芥 能量代谢 线粒体
【基金】：全军医学科技“十二五”重大项目(AWS11C004) 军队科技重大专项资助项目(2011ZXJ09102C)
【分类号】：R827.1
【正文快照】： 芥子气是一种军用毒剂,可造成皮肤黏膜糜烂,对生物分子(DNA、蛋白)和细胞活动(能量代谢)等造成损伤。芥子气可通过吸入和液滴污染等途径进入机体产生毒性作用,肺是其靶器官之一。肺部染毒可引起急性损伤,表现如气道炎症、黏膜上皮变性坏死、气管支气管狭窄等。远期效应包括慢

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本文编号：594545