γ辐照及模拟微重力效应对PC12等细胞损伤的研究

发布时间：2017-09-17 23:26

  本文关键词：γ辐照及模拟微重力效应对PC12等细胞损伤的研究

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【摘要】： 为了分析空间环境对哺乳动物细胞的损伤效应,本研究以永生化淋巴细胞、大鼠终末分化PC12细胞及外周血淋巴细胞为实验材料,通过γ60Co-射线辐照模拟空间辐射效应,利用回转器模拟空间持续存在的微重力效应,对永生化淋巴细胞及大鼠终末分化PC12细胞的微核率、微核细胞率、大鼠终末分化PC12细胞的有丝分裂指数及HPRT基因突变频率、外周血淋巴细胞的染色体脆性位点表达率进行了分析。经γ60Co-射线辐照及模拟微重力效应处理后,有丝分裂指数、微核率及微核细胞率均随着γ60Co-射线辐照剂量的增加而升高,显示较好的剂量效应关系,且大鼠终末分化PC12细胞的γ60Co-射线辐照复合模拟微重力效应组的微核率及微核细胞率、有丝分裂指数、HPRT基因突变频率均低于γ60 Co-射线辐照组,而永生化淋巴细胞的γ60Co-射线辐照模拟微重力效应组的微核率及微核细胞率高于γ60Co-射线辐照组。模拟微重力效应72小时后的人外周血淋巴细胞染色体脆性位点表达率明显高于地面对照组,显示较好的关系。结果表明γ60Co-射线辐照及模拟微重力效应均能造成哺乳动物细胞的损伤,使哺乳动物细胞增殖阻滞,染色体不稳定性增加。同时提示不同细胞系对模拟微重力效应的敏感程度不同,其机制还有待进一步研究。
【关键词】：γ~(60)Co-射线辐照 模拟微重力效应 哺乳动物细胞 微核细胞率 HPRT基因突变频率
【学位授予单位】：哈尔滨工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R85
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第1章 绪论9-19
• 1.1 空间环境对哺乳动物细胞的影响9-11
• 1.1.1 空间辐射对哺乳动物细胞的影响9-10
• 1.1.2 空间微重力对哺乳动物细胞的影响10-11
• 1.2 微核检测技术及应用11-13
• 1.2.1 微核检测技术12-13
• 1.2.2 微核检测技术的应用13
• 1.3 HPRT基因突变检测及研究进展13-16
• 1.3.1 HPRT基因突变检测方法14-15
• 1.3.2 HPRT基因突变研究进展15-16
• 1.4 染色体脆性位点检测及应用16-17
• 1.4.1 染色体脆性位点的分类16
• 1.4.2 染色体脆性位点与疾病相关性研究16-17
• 1.5 课题研究的目的及意义17-18
• 1.5.1 研究的目的17-18
• 1.5.2 研究的意义18
• 1.6 课题研究的内容18-19
• 第2章 实验材料和方法19-28
• 2.1 实验材料19-22
• 2.1.1 细胞系19
• 2.1.2 主要试剂19
• 2.1.3 常用缓冲液及其他溶液19-20
• 2.1.4 哺乳动物细胞培养20-22
• 2.1.5 主要仪器设备22
• 2.1.6 主要软件22
• 2.2 实验方法22-27
• 2.2.1 实验材料的处理22-23
• 2.2.2 细胞计数及细胞生长曲线的绘制23-24
• 2.2.3 有丝分裂指数检测24
• 2.2.4 微核检测24-26
• 2.2.5 HPRT基因突变频率检测26
• 2.2.6 染色体脆性位点表达率检测26-27
• 2.3 本章小结27-28
• 第3章 辐照及模拟微重力效应对细胞增殖的影响28-33
• 3.1 PC12 细胞的生长曲线28-29
• 3.2 PC12 细胞有丝分裂指数的检测29-31
• 3.3 讨论31-32
• 3.4 本章小结32-33
• 第4章辐照及模拟微重力效应对PC12等细胞的损伤效应33-48
• 4.1 辐照及模拟微重力效应对永生化淋巴细胞微核的影响33-36
• 4.1.1 辐照及模拟微重力效应下微核的形态观察33-34
• 4.1.2 累加辐照及模拟微重力效应下的微核率及微核细胞率34-36
• 4.2 辐照及模拟微重力效应对PC12 细胞微核的影响36-43
• 4.2.1 辐照及模拟微重力效应下微核的形态学观察36-37
• 4.2.2 累加辐照及模拟微重力效应下的微核率及微核细胞率37-42
• 4.2.3 单次辐照及模拟微重力效应下的微核率与微核细胞率42-43
• 4.3 辐照及模拟微重力效应对PC12 细胞HPRT基因突变频率的影响43-45
• 4.3.1 辐照及模拟微重力效应下的多核与双核形态学观察43
• 4.3.2 辐照及模拟微重力效应下的HPRT基因突变频率43-45
• 4.4 讨论45-46
• 4.5 本章小结46-48
• 第5章模拟微重力效应对染色体脆性位点表达率的影响48-53
• 5.1 实验条件的优化48-50
• 5.1.1 外周血淋巴细胞的培养及染色体标本的制备48-49
• 5.1.2 秋水仙素使用浓度及作用时间的优化49
• 5.1.3 低渗时间的优化49-50
• 5.2 模拟微重力效应后染色体脆性位点的表达50-51
• 5.3 讨论51-52
• 5.4 本章小结52-53
• 结论53-54
• 参考文献54-58
• 攻读学位期间发表的学术论文58-60
• 致谢60

【参考文献】

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本文编号：872015