黄芩素对胃癌MGC-803细胞的抑癌作用及机制研究

发布时间：2020-03-25 11:36

【摘要】：目的:探讨黄芩素(baicalein,BAI)对胃癌MGC-803细胞的抑癌作用及机制。方法:MGC-803细胞用不同浓度BAI处理后,采用MTT法检测细胞增殖;平板克隆形成实验检测细胞的集落形成能力;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验检测细胞的迁移能力;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;Hoechst33342染色观察细胞凋亡小体的形成;PI单染流式细胞术检测细胞周期;免疫荧光染色法检测自噬体标记蛋白LC3的表达;Western blot实验检测p12-LOX和p-Ezrin蛋白、EMT标志物蛋白、凋亡相关蛋白及LC3的表达。结果:1.MTT实验结果显示:5、10、15、25、50μmol/L的BAI分别处理MGC-803细胞12h、24h、48h,与对照组相比均可明显抑制细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性(P0.05或P0.01);2.平板克隆形成实验结果显示:15、25μmol/L的BAI可抑制MGC-803细胞的集落形成能力(P0.05或P0.01);3.划痕愈合实验结果显示:5、15、25μmol//L的BAI处理细胞24h、48h,与对照组相比可使细胞的横向迁移能力明显降低,并呈剂量依赖性(P0.05或P0.01);4.Transwell小室迁移实验结果显示:25μmol/L的BAI处理细胞48h,与对照组相比可使细胞的纵向迁移能力明显降低(P0.01);5.流式细胞术检测凋亡结果显示:与对照组比较,25μmol/L的BAI处理组的MGC-803细胞的晚期凋亡比率明显升高(P0.01);6.Hoechst 33342染色结果也显示:5、15、25μmol/L的BAI作用后MGC-803细胞出现了亮蓝色凋亡小体,并随BAI浓度的增高凋亡小体数量有增加的趋势;7.流式细胞术检测细胞周期结果显示:15、25μmol/L的BAI可诱导MGC-803细胞周期阻滞在G0/G1期(P0.01);8.免疫荧光染色结果显示:25μmol/L的BAI处理MGC-803细胞与对照组相比可显著增加自噬体标记蛋白LC3的表达量;9.Western blot实验结果显示:BAI可显著下调MGC-803细胞中 P12-LOX、p-Ezrin、Vimentin、Snail、Bcl-2蛋白表达水平(P0.05或P0.01),上调 E-cadherin、cleaved-caspase-3、LC3-II 蛋白表达水平(P0.05或P0.01)。结论:1.BAI抑制胃癌MGC-803细胞的增殖、克隆形成、迁移,诱导细胞凋亡和自噬,具有抗肿瘤作用。2.BAI的抗肿瘤作用与其调控p12-LOX、Ezrin、凋亡相关蛋白、LC3及EMT相关蛋白的表达密切相关。
【图文】：

院病理学与病理生理学专业硕士学位论文逦材料混匀细胞悬液，，用加样枪吸取２０Ｗ悬液缓慢加入到盖玻片与中；逡逑镜下观察计数板上细胞平均分布情况，并计数，计４大格里的压线的细胞只计上侧和左侧；逡逑计数结果进行计算并稀释成需要的细胞浓度的悬液。逡逑

逦实验结果逡逑的长期影响，其结果显示（图２）：与对照组相比５ｐｍｏｌ／Ｌ的ＢＡＩ对细胞的集落逡逑形成影响不明显，１５和２５ｊｉｍｏｌ／Ｌ的ＢＡＩ可显著抑制ＭＧＣ－８０３细胞的集落形成逡逑能力（尸＜０．０５或尸＜０．０１）。逡逑ＢＡＩ邋（ｎｍｏｌ／Ｌ）逡逑Ｃｏｎｔｒｏｌ逦５逦１５逦２５逡逑

本文编号：2599850