基于网络药理学与转录组学探索桃红四物汤治疗缺血性中风主要物质基础及作用机制

发布时间：2020-04-15 11:26

【摘要】：目的:通过对桃红四物汤水提物体内外成分定性分析,进一步明确桃红四物汤发挥作用的主要物质基础;联合网络药理学与转录组学技术,深入探究桃红四物汤治疗缺血性中风的作用机制。方法:本实验应用UPLC-Q-TOF-MS~E技术结合UNIFI数据分析平台对桃红四物汤水提物中的主要化学成分进行了定性分析;建立大鼠脑缺血模型,灌胃给药桃红四物汤,应用UPLC-Q-TOF-MS~E技术结合桃红四物汤体外化学成分分析结果,鉴定大鼠口服桃红四物汤后入血、入脑原型成分及其代谢产物;以体内原型成分为基础,通过网络药理学预测桃红四物汤作用靶点,筛选出与缺血性中风疾病相关的靶点进行GO分析、KEGG通路注释,构建体内成分-靶点-通路可视化网络;应用转录组学测序方法,筛选出桃红四物汤治疗缺血性中风的差异基因,最后与网络药理学预测结果相结合,选定桃红四物汤可能发挥作用的关键靶点与通路进行动物实验验证。结果:在桃红四物汤水提物中共鉴别出90个化学成分,主要包括黄酮类、有机酸类、糖苷类和苯酞类等化合物;在脑缺血模型大鼠体内共鉴别出39个原型成分和61个代谢产物,原型成分中有18个化合物可以进入脑脊液;网络药理学共预测出桃红四物汤体内成分作用靶点437个,与缺血性中风疾病相关靶点有189个,KEGG注释的通路有105条;转录组学通过高通量RNA测序技术分析了假手术、脑缺血模型和桃红四物汤给药大鼠大脑左半球的mRNA表达谱,共鉴定出1007个桃红四物汤作用靶点基因,富集的通路有16条(Homo sapiens);网络药理学与转录组学交集的基因有11个,分别为:Plau、Fabp4、Mmp9、Mmp12、Cfd、Lcn2、Trem1、Lgals3、Hmox1、Selp和Slc6a4,交集的通路有7条,分别为:Focal adhesion、Complement and coagulation cascades、Staphylococcus aureus infection、Malaria、Transcriptional misregulation in cancer、Progesterone-mediated oocyte maturation、PI3K-Akt signaling pathway。动物实验验证表明,桃红四物汤可以逆转脑缺血后11个靶基因的异常表达、抑制补体和凝血级联通路的活化,进而实现对缺血性中风疾病的保护作用。结论:本实验建立的UPLC-Q-TOF-MS~E技术结合UNIFI数据库分析方法可以快速、较全面地识别桃红四物汤的体内外化学成分,以网络药理学与转录组学相结合的研究模式,确定了桃红四物汤治疗缺血性中风主要物质基础为Mudanpioside E、paeoniflorin、Lactiflorin、Benzoylpaeoniflorin、β-Benzoyloxypaeoniflorin等,作用机制可能与调控Complement and coagulation cascades、Cell cycle、Neuroactive ligand receptor Interaction等信号通路有关,初步阐明了桃红四物汤治疗缺血性中风的主要物质基础与作用机制。
【图文】：

表 1 混合对照品负离子模式总离子流图分析结果Table1 Analysis of THSWD by UPLC-Q-TOF-MSEin negative ion mode.No. RT(min) Name Molecular weight Molecular formula1 1.72 Gallic acid 170.0215 C7H6O52 2.06 Rehmannioside D 686.2293 C27H42O203 2.69 Protocatechuic acid 154.0267 C6H3COOH4 3.80 P-Hydroxybenzoic acid 138.0316 C7H6O35 4.05 Hydroxysafflor yellow A 612.1698 C27H32O166 5.08 Caffeic acid 180.0422 C9H8O47 6.42 Chlorogenic acid 354.0968 C16H18O9

图 3 负离子模式下六味单味药 BPI 图谱（A：桃仁，B：红花，C：白芍，D：川芎，E：当归，F：熟地黄）Fig3 Base peak chromatograms of the six individual herbs in negative mode.（A：Carthamus tinctorius L.，，B：Prunus persica(L.)Batsch，C：Paeoniae Radix Alba，
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 唐国柱;;针灸治疗缺血性中风临床研究进展[J];中国医疗器械信息;2019年15期

2 曹国琼;胡正平;马奋刚;张永萍;;治疗缺血性中风常用中药研究进展[J];辽宁中医杂志;2019年12期

3 蓝肖剑;;在绝经后妇女,血脂及脂蛋白对缺血性中风的影响[J];心血管病防治知识(科普版);2012年08期

4 宋广鹏;;中西医结合治疗缺血性中风后遗症临床观察[J];实用中医药杂志;2018年10期

5 马玉兰;马青海;马骁;;补阳还五汤合三七粉治疗缺血性中风恢复期气虚血瘀证的疗效观察[J];中药药理与临床;2016年05期

6 金煜;;补阳还五汤加减治疗缺血性中风后遗症临床疗效观察[J];世界中西医结合杂志;2017年01期

7 李来信;;针刺联合化痰通络汤治疗缺血性中风偏瘫疗效观察[J];实用中医药杂志;2017年08期

8 陈慧亭;崔应麟;朱燕;周盼盼;;从“虚、瘀”浅议缺血性中风恢复期的治疗[J];中国民族民间医药;2017年17期

9 崔华华;;中药治疗缺血性中风疗效观察[J];实用中医药杂志;2017年11期

10 李燕;;中西医结合治疗缺血性中风疗效观察[J];中国民族民间医药;2017年20期

相关会议论文 前10条

1 蒋冰;邓凯文;;中医治疗缺血性中风的临床研究进展[A];新时代 新思维 新跨越 新发展——2019中国针灸学会年会暨40周年回顾论文集[C];2019年

2 李树清;;活血化瘀与缺血性中风实验研究的三个关键因素[A];第十一届活血化瘀研究进展高层论坛论文集[C];2016年

3 杜元灏;翟娜;;缺血性中风治疗焦点的思考[A];'97中医药博士论坛：中医药现代研究与未来发展[C];1997年

4 郭福新;徐瑛;孟炎;孙思明;;从毒论治缺血性中风对黄腻舌苔与颈动肪斑块变化相关分析[A];第六次全国中西医结合养生学与康复医学学术研讨会论文集[C];2009年

5 陈学忠;尹方;苏凯;马界;;缺血性中风防治的切入点[A];中国中西医结合学会养生学与康复医学专业委员会委员会议暨第七次学术研讨会论文集[C];2011年

6 曹晓岚;周霞;庄慧魁;王兴臣;王继彪;孙常青;;灯盏生脉胶囊治疗缺血性中风恢复期临床观察[A];山东省第三次中西医结合神经内科学术研讨会论文汇编[C];2011年

7 梁文慧;;偏瘫复原胶囊治疗缺血性中风60例[A];山东省第三次中西医结合神经内科学术研讨会论文汇编[C];2011年

8 胡晓洁;宗寿健;王兴臣;;从“化浊”入手浅述缺血性中风的二级预防[A];山东省2013年神经内科学学术会议暨中国神经免疫大会2013论文汇编[C];2013年

9 胡晓洁;王兴臣;;调脂和血颗粒治疗缺血性中风的的临床研究[A];山东省2013年神经内科学学术会议暨中国神经免疫大会2013论文汇编[C];2013年

10 许康;张苏明;;缺血性中风的证型研究[A];第五次全国中西医结合神经科学术会议论文集[C];2004年

相关重要报纸文章 前10条

1 主任药师 陆基宗;多事之夏，缺血性中风趁“药”来袭[N];21世纪药店;2015年

2 徐玉梅;心血管病人不可忽视早餐[N];人民政协报;2001年

3 郭会军 武继涛 金 杰;郑绍周教授治疗缺血性中风经验[N];中国中医药报;2004年

4 王小衡;出血性 缺血性中风后果预测[N];卫生与生活报;2008年

5 杭兰芳;A型血易患缺血性中风[N];大众卫生报;2004年

6 蔡定芳;中西医结合治疗缺血性中风研究进展[N];中国中医药报;2000年

7 蔡定芳;中西医结合分期治疗缺血性中风[N];中国中医药报;2003年

8 陈光辉;缺血性中风的三级预防[N];江苏经济报;2000年

9 闫志安;临床缺血性中风辨证分型亟待规范[N];中国医药报;2007年

10 ;贺氏 针灸三通法治缺血性中风[N];中国中医药报;2009年

相关博士学位论文 前10条

1 段贤春;基于网络药理学与转录组学探索桃红四物汤治疗缺血性中风主要物质基础及作用机制[D];安徽中医药大学;2019年

2 吴光亮;Toll样受体信号通路关键基因与缺血性中风及其中医证候易感性的关联性研究[D];广州中医药大学;2017年

3 徐亚林;益气活血通络法联合亚低温对大鼠缺血性中风气虚血瘀证的保护作用[D];湖北中医学院;2004年

4 郑一;脑络舒通治疗缺血性中风的作用机制研究[D];北京中医药大学;2004年

5 刘振权;脑心通胶囊治疗缺血性中风作用机制的实验研究[D];北京中医药大学;2005年

6 刘立安;针刺配合语言训练治疗早期缺血性中风失语症的临床与机理研究[D];天津中医学院;2005年

7 刘树权;开窍通腑法治疗缺血性中风的作用机制研究[D];辽宁中医药大学;2006年

8 汪江碧;孕酮联合康复训练对小鼠缺血性中风的影响及机制研究[D];兰州大学;2013年

9 王平平;缺血性中风不同时点神经功能缺损程度、证候特征与预后相关性的研究[D];北京中医药大学;2011年

10 王升强;针刺治疗缺血性中风恢复期疗效综合评价研究[D];广州中医药大学;2011年

相关硕士学位论文 前10条

1 冯鹏硕;缺血性中风血瘀质患者与缺血性中风危险因素的相关性研究[D];长春中医药大学;2019年

2 赵洋;耳穴埋豆联合中药治疗缺血性中风后失眠（肝郁化火证）的临床疗效观察[D];长春中医药大学;2019年

3 张才如;张崇泉教授辨治缺血性中风恢复期诊疗方案的临床验证[D];湖南中医药大学;2019年

4 吴凡;基于中医证候演变的缺血性中风复发风险研究[D];华北理工大学;2019年

5 黄仟;缺血性中风不同分期痰证诊断标准的临床观察[D];北京中医药大学;2019年

6 李小刚;系统药理学方法解析龙血竭在缺血性中风预后中的分子机制[D];西北大学;2019年

7 黄洁;补阳还五汤联合艾灸治疗缺血性中风先兆气虚血瘀证的临床研究[D];广西中医药大学;2018年

8 任浩恬;任氏脑脉苏治疗缺血性中风气虚血瘀证的临床疗效观察[D];湖南中医药大学;2018年

9 张婕;缺血性中风恢复期证素关联分析及健脾补土方对体外神经元低氧损伤后凋亡的影响[D];湖南中医药大学;2018年

10 白雪;头穴电针结合体针治疗缺血性中风恢复期偏瘫的临床观察[D];河北医科大学;2018年

本文编号：2628499