唐古特大黄醇提部位化学成分分离鉴定与抑菌作用研究

发布时间：2020-04-29 18:11

【摘要】：大黄为蓼科大黄属多年生草本植物,主要分布在亚洲温带及亚热带的高寒山区,在我国主要分布于青海、甘肃、四川、云南等西北和西南部地区。大黄味苦性寒,具有泻下攻积,清热泻火、凉血解毒、逐淤通经、利湿退黄等功效。现代药理学研究表明,大黄还具有抗菌、抗炎、保肝利胆、抗肿瘤、抗氧化等广泛的功效。本实验通过6种不同溶剂提取的唐古特大黄提取物对10种胆囊炎致病菌的抑菌试验,发现乙醇提取物体外抑菌实验的抑菌作用最好。通过柱层析、薄层色谱和重结晶等分离纯化方法,从唐古特大黄醇提部分中分离得到了9个化合物单体,并对单体化合物进行了体外抑菌实验,筛选出具有良好抑菌活性的化合物。本实验通过柱层析、薄层色谱等分离技术对唐古特大黄的醇提部位进行分离纯化,得到9种单体化合物,分别为1:Catechin(儿茶素)、2:Emodin(大黄素)、3:Chrysophanol(大黄酚)、4:Aloeemodin(芦荟大黄素)、5:Physcion(大黄素甲醚)、6:4-(4'-Hydroxyphenyl)-2-butanone-4'-O-(2-O-galloyl-6-O-cinnamoyl)glucoside(4-(4'-羟基苯基)-2-丁酮4'-O-(2-O-没食子酰基-6-O-肉桂酰基)葡糖苷)、7:4-(4'-Hydroxyphenyl)-2-butanone 4'-O-(6-O-cinnamoyl)glucoside(4-(4'-羟基苯基)-2-丁酮4'-O-(6-O-肉桂酰基)葡萄糖苷)、8:Chrysophanol-1-O-glucoside(大黄酚-1-O-葡萄糖苷)、9:Chrysophanol-8-O-glucoside(大黄酚-8-O-葡萄糖苷)。本实验通过对分离得到的8种唐古特大黄的单体化合物进行体外抑菌实验,选取10种常见的胆囊炎致病菌,结果发现:化合物2和4对以上10种菌抑菌作用极显著(P0.01)。化合物1对除产气肠杆菌之外的9种胆囊炎致病菌具有抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌抑菌作用显著(P0.05),对其余8种致病菌抑菌作用极显著(P0.01)。化合物3对肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种具有显著抑菌作用(P0.05),对变形杆菌、屎肠球菌、产酸克雷伯氏菌抑菌作用极显著(P0.01)。化合物5对变形杆菌、粪链球菌、大肠杆菌、产气肠杆菌、屎肠球菌、产酸克雷伯氏菌、肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种抑菌作用极显著(P0.01),对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌阴沟亚种抑菌作用不明显。化合物6对金黄色葡萄球菌抑菌作用显著(P0.05),对变形杆菌、粪链球菌、大肠杆菌、阴沟肠杆菌阴沟亚种、屎肠球菌抑菌作用显著(P0.01)。化合物8对变形杆菌、产气肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种和屎肠球菌抑菌作用极显著(P0.01)。化合物9对变形杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌阴沟亚种、屎肠球菌、产酸克雷伯氏菌抑菌作用极显著(P0.01)对肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种抑菌作用显著(P0.05)。在8种化合物中,大黄素对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、产气肠杆菌、产酸克雷伯氏菌和肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种抑菌作用最好。芦荟大黄素对粪链球菌、阴沟肠杆菌阴沟亚种和屎肠球菌抑菌作用最好。大黄素甲醚对大肠杆菌的抑菌作用最好。化合物6(4-(4'-羟基苯基)-2-丁酮4'-O-(2-O-没食子酰基-6-O-肉桂酰基)葡糖苷)对变形球菌抑菌作用最好。
【图文】：

干法,湿法,硅胶,挥干

图 3.1 大黄提取分离流程图Figure 3.1 Flowchart for extraction and separation of Rheum tanguticum Maxim.ex Balf3.2.3 分离样品处理：本实验主要采用湿法上柱，干法上样。称取编号为 60C 的部分 30g，用甲醇溶解，然后加入同重硅胶搅拌均匀，挥干，，研细。上柱：将 3000 g 硅胶 110℃活化、放冷，石油醚浸泡过夜，湿法上柱，干法上样。洗脱：用石油醚∶乙酸乙酯（1:0～0:1）和乙酸乙酯∶甲醇（1:0～0:1）梯度洗脱切段，每 100 mL 收集一次，收集液进行点板，合并相同部分，浓缩。细分：将所得的各个部分，分别用溶剂溶解，加入等质量的硅胶，挥干，研细，湿法上柱，干法上样，用在硅胶板上展开最好的溶剂进行洗脱，每 10 mL 收集一次，点板合并，浓缩，得到单体。详见图：

分离流程,干法,湿法,乙酸乙酯

图 3.1 大黄提取分离流程图Figure 3.1 Flowchart for extraction and separation of Rheum tangutic2.3 分离样品处理：本实验主要采用湿法上柱，干法上样。称取编号用甲醇溶解，然后加入同重硅胶搅拌均匀，挥干，研细。上柱：将 3000 g 硅胶 110℃活化、放冷，石油醚浸泡过夜。洗脱：用石油醚∶乙酸乙酯（1:0～0:1）和乙酸乙酯∶甲醇切段，每 100 mL 收集一次，收集液进行点板，合并相同部细分：将所得的各个部分，分别用溶剂溶解，加入等质量湿法上柱，干法上样，用在硅胶板上展开最好的溶剂进行次，点板合并，浓缩，得到单体。详见图：
【学位授予单位】：青海师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284

【参考文献】