小柴胡汤含药血清联合顺铂对Hep-G2肝癌细胞凋亡的影响
发布时间:2020-05-11 12:39
【摘要】:目的:通过观察凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达情况,探讨小柴胡汤联合顺铂对Hep-G2细胞凋亡的影响,为临床使用小柴胡汤联合顺铂化疗提供实验室依据。材料与方法:提供血清的动物为SPF大鼠15只,根据《伤寒论》中小柴胡汤的配伍,煎取药液,予其中5只每只7.18g/Kg·d生药量灌胃5天,其余10只等量等频生理盐水灌胃,末次灌胃后1h腹主动脉取血,制备含药血清。将对数生长期的Hep-G2细胞随机分为三组,分别为空白血清组、空白血清+顺铂组、小柴胡汤血清+顺铂组,空白血清组加入空白血清,空白血清+顺铂组加入空白血清与终浓度为2.4mg/L的顺铂,小柴胡汤血清+顺铂组加入小柴胡汤含药血清及终浓度为2.4mg/L的顺铂。48h后收集样本,流式细胞仪PI染色法测定细胞凋亡率,相同样本重复三次试验;Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达,相同样本重复三次。采用SPSS 21.0软件进行统计分析,三组细胞凋亡率运用Kruskal-Wallis H检验并比较中位数,Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达运用Image J进行灰度分析,用多组间单因素方差分析进行统计检验,比较平均值,α=0.05。结果:1小柴胡汤含药血清顺铂组中位凋亡率为11.8%,空白血清顺铂组中位凋亡率为1.2%,空白血清组中位凋亡率为0.6%(p0.05)。2小柴胡汤含药血清加顺铂处理的Hep-G2细胞Bcl-2蛋白表达低于空白血清加顺铂组,空白血清组表达量最高(p0.05)。3小柴胡汤含药血清加顺铂处理的Hep-G2细胞Bax蛋白表达高于空白血清加顺铂组,空白血清组表达量最低(p0.05)。4小柴胡汤含药血清加顺铂处理的Hep-G2细胞Caspase-3蛋白表达高于空白血清加顺铂组,空白血清组表达量最低(p0.05)。5空白血清组、空白血清加顺铂组、小柴胡汤含药血清加顺铂组Bcl-2/Bax依次降低。结论:1顺铂可以促进Hep-G2肝癌细胞的凋亡,顺铂诱导下的Hep-G2细胞凋亡途径与Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白参与的线粒体凋亡途径有关。2小柴胡汤可以增强顺铂对Hep-G2肝癌细胞促凋亡效果,其机制与和顺铂协同进一步减少抑凋亡蛋白Bcl-2表达,增加促凋亡蛋白Bax、Caspase-3蛋白的表达有关。3本研究结论可作为临床使用小柴胡汤联合顺铂化疗,以达到增加化疗效果,减少顺铂剂量,减少化疗毒性及副作用的实验室依据。
【图文】:
小柴胡汤对顺铂促肝癌 Hep-G2 细胞凋亡的影响实验结果测 Hep-G2 细胞凋亡细胞分布如图 1,空白血清组三次重复试验 Hep-G2 凋亡率分别为 白血清+顺铂组三次重复试验 Hep-G2 凋亡率分别为 3.6%、1.8%、清组+顺铂组三次重复试验 Hep-G2 凋亡率分别为 7.9%、12.3%、1ruskal-Wallis 检验三组存在差异(p=0.036<0.05),比较中位数与血清加顺铂组凋亡率高于空白血清加顺铂组高于空白血清组(如 Hep-G2 细胞的凋亡,且小柴胡汤含药血清+顺铂使 Hep-G2 细胞的
【学位授予单位】:辽宁中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R285.5
【图文】:
小柴胡汤对顺铂促肝癌 Hep-G2 细胞凋亡的影响实验结果测 Hep-G2 细胞凋亡细胞分布如图 1,空白血清组三次重复试验 Hep-G2 凋亡率分别为 白血清+顺铂组三次重复试验 Hep-G2 凋亡率分别为 3.6%、1.8%、清组+顺铂组三次重复试验 Hep-G2 凋亡率分别为 7.9%、12.3%、1ruskal-Wallis 检验三组存在差异(p=0.036<0.05),比较中位数与血清加顺铂组凋亡率高于空白血清加顺铂组高于空白血清组(如 Hep-G2 细胞的凋亡,且小柴胡汤含药血清+顺铂使 Hep-G2 细胞的
【学位授予单位】:辽宁中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R285.5
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本文编号:2658468
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