【摘要】：慢性湿疹(chronic eczema)具有反复性,难治性的发病特点,其发病机制复杂。西药副作用大,疗效局限,中医辨证论治有优势;研究湿疹的发病机理,探索中医药治疗湿疹,具有重要的理论意义和应用价值。1.二硝基氯苯诱导C57小鼠慢性湿疹模型复制①目的:确定二硝基氯苯(2,4-Dinitrochlorobenzene,DNCB)诱导C57小鼠慢性湿疹模型的最佳造模浓度。②方法:于d1、d2,将7%DNCB丙酮溶液50ul涂于小鼠腹部皮肤致敏。于d6,以0.26%～0.96%(k=0.316)9个梯度浓度的DNCB丙酮溶液lOOul,均匀涂抹于小鼠背部皮肤激发,每隔3d一次,共4次。对照组涂抹100ul丙酮溶液。观察皮肤大体变化,形态计量表皮体积比,回归DNCB造模的半数有效浓度(ED50)。⑧结果:DNCB对小鼠表皮体积比的作用呈剂量依赖性,其ED50为37.25,拟合的量效方程为 Y=0.04+0.82/[1+10(28.15-17.92x)],置信区间为 33.04～41.99,R=0.95。④结论:成功复制了 DNCB诱导的小鼠慢性湿疹模型DNCB;最佳造模浓度为0.37%。2.鲜肤膏及其拆方防治慢性湿疹的量效关系①目的:探究鲜肤膏防治慢性湿疹小鼠模型的量效关系。②方法:于d1、d2,将7%DNCB丙酮溶液50ul涂于小鼠腹部皮肤致敏。于d6,以0.37%的DNCB丙酮溶液100ul,均匀涂抹于小鼠背部皮肤激发,每隔3d一次,共4次。于激发日起,鲜肤膏组、地乌膏组、鲜肤膏去地乌组分别给予梯度剂量鲜肤膏(生药量11.71～11662.50 mg.kg-1·d-1,k=0.316),地乌膏(生药量 0.53～530.12 mg.kg-1·d-1,k=0.316),鲜肤膏去地乌膏(11.18～11132.40 mg·kg-1·d-1,k=0.316)均匀涂抹于小鼠背部皮肤予以治疗。模型组涂抹基质(60mg/只)。HE染色观察病理特点,ELISA检测血清IL-4、IL-13含量;Prism5.0非线型可变斜率回归计算半数有效剂量(ED50),比较鲜肤膏组、地乌组、鲜肤膏去地乌组的药效,观察地乌的配伍增效作用。③结果:鲜肤膏组、地乌组、鲜肤膏去地乌组药效具有剂量依赖特征,量效曲线呈“S”型。鲜肤膏组疗效最优,显著降低表皮体积比(ED50为377.90 mg.kg-1·d-1),降低血清IL-4(ED50为 198.70 mg·kg-1·d-1)、IL-13(ED50为117.60 mg·kg-1·d-1)含量。与鲜肤膏组比较,地乌组与鲜肤膏去地乌组的量效曲线分别右移。④结论:鲜肤膏及其拆方均能有效治疗慢性湿疹;鲜肤膏的疗效最优;地乌有配伍增效作用。其最佳治疗剂量为377.90 mg.kg-1·d-1。3.鲜肤膏防治慢性湿疹的免疫药效及机制初探①目的:探讨鲜肤膏防治慢性湿疹的药效观察及机制初探。②方法:于d1、d2,将7%DNCB丙酮溶液50μl涂于小鼠腹部皮肤致敏。于d6,以0.2%DNCB丙酮溶液100μl,均匀涂抹于小鼠背部皮肤发敏,每隔3d一次,共8次。分别给予他克莫司,除湿止痒软膏,鲜肤膏高剂量(5180.OOmg·kg-1·d-1)、中剂量(1640.00 mg·kg-1·d-1)、低剂量(519.OOmg.kg-1·d-1),地乌皂苷(2.50 mg·kg-1·d-1),蛇床子素(5.20 mg·kg-1·d-1),吴茱萸碱(4.00mg·kg-1·d-1)均匀涂抹大鼠背部皮损予以治疗。模型组涂抹基质。观察其皮损大体变化,HE染色观察病理特征,形态计量表皮体积比,ELISA检测血清IL-4、IL-13含量,免疫组化检测IL-4R,p-JAK1,p-Stat6,角蛋白K6原位蛋白表达量。③结果:药效观察:(1)大体观察:与对照组相比,模型组大鼠皮损红斑,水肿;与模型组相比,给药组均可不同程度上改善大鼠湿疹皮损的红斑,水肿等临床表现。(2)病理观察:与对照组相比,模型组病理表现为湿疹皮损处表皮增厚,棘细胞层肥厚,角质层可见明显的角化不全及过度角化;与模型组相比,各给药组明显改善了大鼠湿疹皮损的病理改变。(3)表皮体积比:与对照组相比,模型组大鼠皮损的表皮体积比显著增加;与模型组相比,给药组均能有效降低表皮体积比,其中他克莫司疗效最优;与阳性药组相比,鲜肤膏高剂量组较他克莫司组无差异。(4)血清IL-4.:与对照组相比,模型组血清IL-4显著升高;与模型组相比,给药组均能有效降低血清IL-4,且疗效无差异。(5)血清IL-13:与对照组相比,模型组血清IL-13显著升高;与模型组相比,各给药组降低血清IL-13,其中他克莫司组疗效最优;与阳性药组比较,鲜肤膏中、低剂量组,地乌皂苷组、蛇床子素组较他克莫司组无差异。(6)K6:与对照组相比,模型组角蛋白K6显著升高;与模型组相比,给药组的角蛋白K6的原位蛋白表达量显著降低,其疗效无差异。机制初探:(1)IL-4R:与对照组相比,模型组角质形成细胞的IL-4R的原位蛋白量升高;与模型组相比,给药组能不同程度降低IL-4R的阳性表达;与阳性药组相比,蛇床子素组较他克莫司组无差异。(2)p-JAK1:与对照组相比,模型组角质形成细胞的p-JAK1的原位蛋白表达量明显升高;与模型组相比,给药组的p-JAK1的阳性蛋白表达量显著降低;与阳性药相比,鲜肤膏高、中、低剂量组,地乌皂苷组较他克莫司组、除湿止痒软膏组无差异。(3)p-STAT6:与对照组相比,模型组角质形成细胞p-STAT6的原位蛋白表达量显著升高;与模型组相比,各给药组p-STAT6的阳性表达量降低,各组无明显差异。④结论:鲜肤膏可干预IL-4R-JAK1-STAT6信号通路转导,抑制角质形成细胞的异常增殖与活化,防治慢性湿疹。
【图文】：
弦滑或细逡逑厚粗糙，干燥舌红少苔逦滋阴疏逡逑数逦一贯裂，瘙痒颇甚或苔光剥逦肝逡逑复不愈，肥厚逡逑舌质淡，苔脉沉细或疏风清逡逑瘙痒，有抓痕逦消风薄白邋沉缓邋肺逡逑燥、脱屑、肥厚、逡逑宽、色素沉着、逦滋养肾六味舌红苔少脉细数样变、或皮色紫逦阴逦汤逡逑厚，粗糙，色鲜舌质淡，苔逦温补肾逡逑脉弱逦真武，呈苔藓样变水滑逦阳逡逑
逑均匀涂抹于小鼠背部剃毛区皮肤激发，每隔３ｄ—次，共４次。对照组给予丙酮溶液ｌＯＯｕｌ。逡逑ｄ２０，邋１０％水合氯醛麻醉后，腹主动脉取血，灌注固定，取背部皮肤备检（；图１）。逡逑在腹部选取逦背部剃毛２＊２叫涂抹９个梯度浓度ＫＯ逡逑２＊＾面积逦？0逦｜逦１邋处死逡逑？３逦０逦１逦２逦６逦１０逦１４逦１８逦２０逡逑图１实验时间进度逡逑１．３指标观察逡逑（１）
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【参考文献】
相关期刊论文 前10条
1 苗明三;田硕;白明;;湿疹动物模型制备规范(草案)[J];中国实验方剂学杂志;2017年24期
2 王廷刚;;消风散治疗荨麻疹、口周疮、药疹[J];实用中医内科杂志;2017年06期
3 公保吉;;地乌风湿安胶囊用于类风湿性关节炎Ⅲ期临床研究[J];内蒙古中医药;2017年11期
4 陈金妍;杨飞;谭从娥;;肾阳虚证免疫研究进展[J];陕西中医;2016年06期
5 赵倩;徐蕾;柏冰雪;;S100A8和S100A9在皮肤病的研究进展[J];国际皮肤性病学杂志;2015年05期
6 何佳丽;高如宏;徐静;;除湿胃苓汤加减治疗皮肤病体会[J];江西中医药;2015年08期
7 赵巍;刘俊峰;吴卿;莫秀梅;陈达灿;;半抗原诱导C57BL/6小鼠特应性皮炎模型的建立[J];广东医学;2015年15期
8 彭慧;田志刚;;固有淋巴细胞研究进展[J];中国免疫学杂志;2015年02期
9 刘晓峰;吴岩;;Filaggrin基因及聚角蛋白微丝蛋白的研究现状[J];中国细胞生物学学报;2015年01期
10 葛一漫;张朝明;胡一梅;王毅;吴心语;谢国丽;张灵玲;;马齿苋提取物对急性湿疹大鼠皮肤TNF-α与IL-4表达的影响[J];中国免疫学杂志;2014年12期
相关硕士学位论文 前2条
1 杨悦;基于骨免疫学探索地乌总皂苷对类风湿关节炎关节骨破坏的影响作用[D];中国中医科学院;2014年
2 柳文红;藏药十八味欧曲膏对大鼠湿疹模型血清中IL-4、IFN-γ表达的影响[D];甘肃中医学院;2014年
，
本文编号：
2669457
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/2669457.html
