葛根素在Ⅱ型糖尿病大鼠体内的药物动力学研究

发布时间：2020-05-22 04:05

【摘要】：目的:葛根素(Puerarin)是从中药葛藤根中提取的一种黄酮类药物,具有广泛的药理作用,包括降血糖、改善胰岛素抵抗等抗糖尿病作用。然而,目前鲜有关于葛根素在Ⅱ型糖尿病病理状态下的药物动力学相关研究。因此,本实验旨在研究葛根素在Ⅱ型糖尿病大鼠、高脂饮食组与健康大鼠之间药物动力学以及其主要Ⅱ相代谢酶葡萄糖醛酸转移酶(UDP-Glucuronosyltransferases,UGT)1a1与1a7表达的差异。研究方法:本研究中首先将大鼠分为糖尿病(Diabetes mellitus,DM)组、高脂饮食(High-fat diet,HFD)组和对照(Control,CON)组。Ⅱ型糖尿病大鼠由高脂饮食和链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)两种因素联合诱导所成。HFD组由HFD单一因素诱导所成。模型建立成功后,对三组老鼠进行500 mg/kg的口服以及20mg/kg的静脉注射给予葛根素。随后按照时间表取血并利用高效液相串联紫外检测器进行血液浓度检测,并利用DAS药动学数据拟合软件进行药动参数拟合。葛根素主要Ⅱ相代谢酶UGT1a1与UGT1a7在三组大鼠中的表达差异由实时定量PCR(Quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western Blot分别进行测定。结果:实验成功建立了Ⅱ型糖尿病大鼠模型并建立了HPLC检测葛根素的方法学。药动学结果显示,无论是静脉注射还是口服给药,DM组中平均血药浓度均显著低于CON组;而HFD组和CON组之间的血药浓度之间没有差异。药动学参数,曲线下面积(AUC),平均体内滞留时间(MRT)和清除率(CL_z)在CON和DM组之间在静脉注射给药中具有显著性差异(p0.05或p0.01)。而对于口服给药,CON组的曲线下面积AUC、峰浓度(C_(max))和半衰期(t_(1/2z))均显著高于DM组,而清除率(CL_z)和吸收分数(CL_z/F)均显著低于DM组。QRT-PCR结果表明,DM组大鼠肝和肠中的Ugt1a1的mRNA分别是CON组的大约3.38倍和2.81倍,是HFD组的1.34倍和1.29倍。Ugt1a7也反映出了类似的趋势,DM组肝和肠的Ugt1a7的mRNA相对表达水平大约是CON组的1.90倍和1.75倍,是HFD组的2.04倍和2.52倍。这些结果表明Ⅱ型糖尿病的病理状态能够显著上调大鼠体内Ugt1a1和Ugt1a7的mRNA表达水平(p0.05)。Western Blot结果显示,DM组肝和肠中的Ugt1a1蛋白质表达水平分别是CON大鼠的2.02倍和5.43倍,是HFD大鼠2.05倍和3.45倍。相似的趋势同样反映在了Ugt1a7上,DM组大鼠肝和肠中Ugt1a7蛋白质表达水平分别近似是CON大鼠的3.96倍和2.07倍,是HFD大鼠的3.49倍和2.09倍。这些结果的趋势与mRNA的结果相同,这表明在糖尿病病理条件下大鼠肝肠中Ugt1a1和Ugt1a7的表达显著增强(p0.05)。结论:在Ⅱ型糖尿病的病理条件下,葛根素的体内代谢水平发生变化,代谢速率加强。葛根素在Ⅱ型糖尿病病理状态下药物浓度降低,会对其药理作用产生影响。这种变化可能与其Ⅱ相代谢酶Ugt1a1与Ugt1a7的mRNA表达水平的增高与蛋白质表达的增强有关。
【图文】：

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中国医科大学硕士学位论文素在 II 型糖尿病大鼠体内的药物动力学前言素（Puerarin），8-β-D-葡萄吡喃糖-4’，，7-二羟基异黄酮（分子式：416.38），是野生豆科爬行类植物葛藤根（PuerarinLobata）的[1]，也是中药葛根（RadixPuerariae）中起到治疗作用的主要活如图 1 所示。

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28图 2. 2. 1 葛根素 HPLC 检测色谱图（A）空白大鼠血浆；（B）大鼠血浆样品；（C）空白血浆加入葛根素和内标；血浆标准曲线会每日矫正以满足葛根素的 0.1 - 100 μmol/L 的检测范围，这些浓度点可以回归为直线方程：Y = 0.0862 X + 0.0736（R2= 0.9992）。方法学的最低定量限（LLOQ）为 0.1 μmol/L。（图 2. 2. 2）
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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