大蒜素联合5-FU诱导黏液表皮样癌细胞系MEC-1凋亡及相关机制的研究

发布时间：2020-05-25 11:20

【摘要】：目的:研究大蒜素联合5-FU诱导黏液表皮样癌MEC-1细胞的凋亡相关机制作用及对Bax、Bcl-2参与凋亡途径蛋白表达的影响,为后续实验及临床药物应用提供相应依据。方法:对照组为含有0.1%DMSO的PBS组,实验组为大蒜素组、5-FU组、大蒜素联合5-FU组。取对数生长期细胞进行实验。(1)用CCK8法检测不同浓度(0、25、50、75、100mg/L)大蒜素、5-FU及大蒜素联合5-FU作用于MEC-1细胞一定时间(24、48、72h)后细胞增殖抑制率。(2)用流式细胞仪检测不同浓度(0、25、50、75mg/L)大蒜素、5-FU及大蒜素联合5-FU作用于MEC-1细胞一定时间(12、24h)后细胞凋亡率。(3)使用Western blot检测IC50浓度的大蒜素、IC50浓度5-FU单独及联合作用于MEC-1细胞24h后,测定Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:(1)在相同时间下,随药物浓度的增加,各实验组对MEC-1细胞活性抑制率增加,大蒜素组、5-FU组分别与联合用药组的抑制率差异有统计学意义(P_(组间)0.01)。(2)大蒜素组、5-FU组、联合用药组对MEC-1增殖抑制率增长趋势随着时间或浓度增加而增大,联合用药组与单独用药组的抑制率差异有统计学意义(P_(组间)0.01)。(3)三个药物实验组与对照组相比均能诱导MEC-1细胞凋亡。且三个实验组诱导MEC-1细胞凋亡作用强度随着浓度和时间增大而增强。联合用药组分别与大蒜素组、5-FU组比较对MEC-1细胞诱导凋亡率差异具有统计学意义(P组间0.05),75mg/L联合用药组诱导MEC-1细胞凋亡作用最强。(4)大蒜素与5-FU单独及联合使用均可以下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白表达量,且联合用药组Bax/Bcl-2比值最大(P0.05)。结论:(1)大蒜素和5-FU单独及联合使用均对MEC-1细胞具有增殖抑制作用和诱导凋亡作用,作用强度随时间或浓度增大而增强,且大蒜素增强了5-FU对MEC-1细胞的凋亡作用。(2)大蒜素和5-FU单独及联合使用诱导MEC-1凋亡机制可能与细胞线粒体途径的凋亡相关。
【图文】：

图 1 药物干预 24 小时后 MEC-1 细胞的生长抑制率表 2 药物干预 48 小时后 MEC-1 细胞生长抑制率（ ±S,n=5,%）药物浓度（mg/L）细胞生长抑制率大蒜素组 5-FU 组 联合药物组25 17.267±1.107 18.156±1.612 29.074±2.002▲ 50 34.068±1.063#30.094±5.321#42.405±1.681#▲ 75 44.312±4.022#*45.369±3.328#*61.237±1.479#*▲ 100 57.132±1.892#*★55.227±1.250#*★70.337±2.523#*★▲ 与 25mg/L 组比较，，#p<0.01;与 50mg/L 组对比，*p<0.01；与 75mg/L 浓度组对比，★p<0.01；与同浓度的比，▲p<0.01;与同浓度的 5-FU 组比， p<0.01.

图 1 药物干预 24 小时后 MEC-1 细胞的生长抑制率表 2 药物干预 48 小时后 MEC-1 细胞生长抑制率（ ±S,n=5,%）药物浓度（mg/L）细胞生长抑制率大蒜素组 5-FU 组 联合药物组25 17.267±1.107 18.156±1.612 29.074±2.002▲ 50 34.068±1.063#30.094±5.321#42.405±1.681#▲ 75 44.312±4.022#*45.369±3.328#*61.237±1.479#*▲ 100 57.132±1.892#*★55.227±1.250#*★70.337±2.523#*★▲ 25mg/L 组比较，#p<0.01;与 50mg/L 组对比，*p<0.01；与 75mg/L 浓度组对比，★p<0.01；与同浓度，▲p<0.01;与同浓度的 5-FU 组比， p<0.01.
【学位授予单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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本文编号：2680076