【摘要】：目的:观察通腑降浊方对便秘型肠易激综合征(constipation predominant irritable bowel syndrome,IBS-C)模型大鼠一般状况、粪便性状评分、粪便含水量、内脏敏感性的影响,检测大鼠肠道微生物的群落变化及结肠组织P物质(substance P,SP)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)表达,探讨该方治疗IBS-C的作用机制,为临床应用提供科学依据。方法:49只雄性SD大鼠随机分为正常组(N)、模型组(M)、西药组(X)、益生元组(Y)、通腑降浊方高剂量组(ZH)、通腑降浊方中剂量组(ZM)、通腑降浊方低剂量组(ZL)各7只,除N组外均采用冰水灌胃法建立IBS-C动物模型,造模成功后,各给药组给予相应药物灌胃,M组和N组灌服等量生理盐水,连续给药14日,观察各组大鼠一般状况、粪便性状评分、粪便含水量,测定内脏敏感性,免疫组化法测定结肠组织SP、VIP表达情况,采用Hi Seq测序平台分析肠道微生物群落变化及其与结肠组织SP、VIP表达的关联性。结果:1.大鼠一般状况与N组比较,造模后的大鼠精神萎靡,易激惹,进食量逐渐减少,粪便呈干球样,经治疗,各治疗组大鼠一般状况都有所改善,除X组粪便性状无明显改变外,其他各组大鼠粪便性状均趋于正常。2.大鼠粪便性状评分及含水量与N组比较,造模后的大鼠粪便性状评分明显降低,差异显著(P0.05)。经过治疗,与M组比较,Y组、ZH组、ZM组、ZL组粪便性状评分明显升高,差异显著(P0.05)。与N组比较,造模后的大鼠粪便含水量明显降低,差异显著(P0.05)。经过治疗,与M组比较,X组、Y组、ZH组、ZM组、ZL组粪便含水量明显升高,差异显著(P0.05);与X组比较,Y组、ZH组、ZM组、ZL组粪便含水量均明显升高,差异显著(P0.05)。3.大鼠内脏敏感性与N组比较,造模后的大鼠内脏敏感性升高,差异显著(P0.05)。经过治疗,与M组比较,X组、Y组、ZH组、ZM组、ZL组大鼠内脏敏感性均降低,差异显著(P0.05);与X组比较,Y组、ZH组、ZM组、ZL组内脏敏感性降低更明显,差异显著(P0.05);与Y组比较,ZH组、ZM组、ZL组内脏敏感性降低更明显,差异显著(P0.05)。4.大鼠肠道微生物群落变化对49份粪便样本进行测序,共得到4143321条序列,物种累积箱形图说明实验样本量是充足的,α和β多样性分析提示M组大鼠肠道菌群丰度降低,M组大鼠肠道菌群整体结构与N组存在差异,经治疗,Y组、ZH组大鼠菌群丰度接近正常,ZH组大鼠肠道群落结构最接近于N组。对各组大鼠肠道菌群进行统计学分析,厚壁菌门(firmicute)、酸杆菌门(acidobacteria)、疣微菌门(virrucomicrobia)3个门,芽孢杆菌纲(bacilli)、α变形菌(alphaproteobacterial)6个纲,乳杆菌属(lactobacillus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)等4个属细菌在IBS-C模型大鼠肠道中的丰度显著降低,差异显著(P0.05)。而拟杆菌门(bacteroidetes)1个门、拟杆菌纲(bacteroidia)1个纲、prevotellaceae_NK3B31_group、prevotella_9等16个属细菌在IBS-C模型大鼠肠道中丰度显著升高,差异显著(P0.05)。通腑降浊方对IBS-C大鼠肠道菌群具有调节作用。5.大鼠结肠组织SP、VIP表达与N组相比,M组大鼠结肠组织SP表达降低,VIP表达升高,差异显著(P0.05);与M组相比,X组、Y组、ZH组、ZM组SP表达升高,VIP表达降低,差异显著(P0.05)。6.大鼠结肠组织SP、VIP表达与肠道菌群的关联性分析疣微菌门(verrucomicrobia)、酸杆菌门(acidobacteria)2个门,芽孢杆菌纲(bacilli)、erysipelotrichia等5个纲,乳杆菌属(lactobacillus)、allobaculum、双歧杆菌属(Bifidobacterium)3个属与SP表达呈正相关、与VIP表达呈负相关,差异显著(P0.05);拟杆菌门(Bacteroidetes)1个门,拟杆菌纲(bacteroidia)1个纲,prevotellaceae_NK3B31_group、alloprevotella等4个属与SP表达呈负相关、与VIP表达呈正相关,差异显著(P0.05)。结论:1.IBS-C模型大鼠结肠组织SP表达降低,VIP表达升高,且肠道微生态处于失衡状态。2.通腑降浊方能够提高IBS-C模型大鼠粪便性状评分,增加粪便含水量,降低内脏敏感性,是治疗IBS-C的有效方法。3.通腑降浊方治疗IBS-C的机理可能是通过调控肠道微生物,进而上调结肠组织SP表达、下调VIP表达,平衡神经内分泌因子,从而起到治疗作用。
【图文】：
各组大鼠治疗前后粪便性状评分比较
各组大鼠治疗前后粪便含水量比较
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【参考文献】
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