温阳活血方治疗阳痿的临床研究及其对大鼠阴茎生物分子的影响

发布时间：2020-05-31 10:34

【摘要】：目的:通过观察温阳活血方对糖尿病大鼠阴茎的影响以及阴茎勃起功能障碍患者阴茎血流的影响,证实温阳活血方治疗本病的效果和优势,探讨温阳活血方治疗阴茎勃起功能障碍的机理,为传统中医药治疗本病提供新的思路和途径。方法:临床研究:对象共80例,来自于2017年6月至2018年1月在广州中医药大学附属第一医院男科/泌尿外科门诊部患者,年龄20～60岁,符合勃起功能障碍诊断标准,中医辨证分型属肾虚血瘀,排除其他原因导致的勃起功能障碍。采用随机对照试验,随机分成治疗组和对照组,每组各40例。治疗措施:治疗组给予温阳活血方,对照组予西地那非口服,疗程为2个月。治疗前、治疗1个月后及治疗2个月后记录2组患者国际勃起功能指数问卷表(IIEF-5)评分、彩色多普勒超声阴茎收缩期血流峰值(Peak Systolic Velocity,PSV)和阻力指数(Resistant Index,RI)。结果用Exce12007和SPSS17.0统计软件进行分析处理。全部数据以均数±标准差(x±S)表示,计量资料治疗前后比较采用配对样本的T检验;组间比较采用方差分析;计数资料采用x2检验;等级资料采用Kruskal-Wallis秩和检验及Wilcoxon秩和检验。动物实验:60只雄性SPF级SD大鼠,体重(220±15)g,对60只大鼠进行编号,查随机数字表分为空白对照组、模型组、西地那非组、温阳活血方小剂量组,温阳活血方组和温阳活血方大剂量组,每组10只。置于8:00～21:00光照、21:00～8:00黑暗的实验室中,饲养1周后,除空白组外均采用腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)建立糖尿病(diabetes mellitus,DM)模型,所有组均进行APO试验评价其勃起功能,成模后模型组予5ml纯净水/只灌胃,1次/日。温阳活血方小剂量组予常规量一半的温阳活血方药液灌胃,每日给予5ml/只。温阳活血方组予常规量的温阳活血方药液灌胃,每日给予5ml/只。温阳活血方大剂量组予常规量1.5倍的温阳活血方药液灌胃,每日给予5ml/只。西地那非组予该药水溶液灌胃。空白组常规喂养,不作干预处理。干预1个月后处死大鼠,获取阴茎标本,进行内皮性一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、神经源性一氧化氮合成酶(neuron nitrc oxide synthetase,nNOS)、5 型磷酸二酷酶(phosphodiesterase 5,PDE5)、Rho 关联含卷曲螺旋蛋白激酶 1(Rho associated coiled-coil containing protein kinase 1,Rock1)、Rho 关联含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rho associated coiled-coil containing protein kinase 2,Rock2)的检测。实验结果用Exce12007和SPSS17.0统计软件进行分析处理。分子生物学检测指标以数±标准差(x±S)表示,P0.05为差异有统计学意义。组内比较采用配对样本t检验,组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)。结果:临床实验:1.治疗前,治疗组和对照组患者年龄比较,P=0.981,差异无统计学意义(P0.05);国际勃起功能评分病情比较,P=0.965,差异无统计学意义(P0.05),两组患者有可比性。2.治疗后将治疗组结果与对照组结果进行疗效的比较,P=0.1499,差异无统计学意义(P0.05)。温阳活血方与西地那非均能改善患者性生活质量。3.阴茎收缩期血流峰值比较,组内比较:治疗组第一、二次检查相互比较,t=0.486,P=0.629,差异无统计学意义(P0.05);治疗组治疗前后比较,t=3.889,P=0.0.002,差异具有统计学意义(P0.05);对照组第一、二次检查相互比较,t=5.031,P=0.000,差异具有统计学意义(P0.05);对照组治疗前后比较,t=9.807,P=0.0.000,差异具有统计学意义(P0.05);温阳活血方与西地那非均能提高阳痿阴茎收缩期血流峰值,西地那非作用更快。组间比较:治疗组与对照组治疗前比较,t=0.195,P=0.846,差异无统计学意义(P0.05);第二次检查组间比较,t=5.017,P=0.000,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后组间比较,t=4.480,P=0.000,差异有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗前阴茎收缩期血流峰值差异无统计学意义,有可比性;之后两次检查西地那非组数值均优于温阳活血方组。4.阻力指数比较,组内比较:治疗组第一、二次检查相互比较,t=1.605,P=0.113,差异无统计学意义(P0.05);治疗组治疗前后比较,t=4.445,P=0.0.000,差异具有统计学意义(P0.05);对照组第一、二次检查相互比较,t=4.312,P=0.000,差异具有统计学意义(P0.05);对照组治疗前后比较,t=9.219,P=0.0.000,差异具有统计学意义(P0.05);温阳活血方与西地那非均能减低阳痿阴茎血管阻力,西地那非作用更快。组间比较:治疗组与对照组治疗前比较,t=1.309,P=0.395,差异无统计学意义(P0.05);第二次检查组间比较,t=4.329,P=0.000,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后组间比较,t=7.363,P=0.000,差异有统计学意义,两组患者治疗前阻力指数有可比性;两次疗程后,检查西地那非组数值优于温阳活血方组。动物实验:1.体重方面,实验前组间比较,总体比较F=1.425,P=0.23,差异无统计学意义(P0.05)。造模前后组内比较采用配对样本t检验,空白组t=4.18,P=0.01,差异有统计学意义(P0.05);模型组t=-6.72,P=0.00,差异有统计学意义(P0.05);温阳活血方小剂量组t=-5.60,P=0.00,差异有统计学意义(P0.05);温阳活血方组t=-5.89,P=0.00,差异有统计学意义(P0.05);温阳活血方大剂量组t=-4.80,P=0.00,差异有统计学意义(P0.05);西地那非组t=-5.17,P=0.00,差异有统计学意义(P0.05),各组体重除空白组外,均较造模前减轻。造模前各组体重差异无统计学意义,各组有可比性,造模后除空白组外体重较前减轻,差异有统计学意义,造模成功。2.各组勃起次数比较。总体比较F=2.872总体P=0.02,各组勃起次数总体差异有统计学意义(P0.05)。空白组与模型组比较,q=81.64,差异有统计学意义(P0.05);空白组与温阳活血方小剂量组比较,q=90.71,差异有统计学意义(P0.05);空白组与温阳活血方组比较,q=90.71,差异有统计学意义(P0.05);空白组与温阳活血方大剂量组比较,q=99.78,差异有统计学意义(P0.05);空白组与西地那非组比较,q=90.71,差异有统计学意义(P0.05);提示通过STZ造成DM模型后,大鼠勃起功能下降。3.实验后各组eNOS的含量比较:总体比较F=366.7,总体P=0.000,各组eNOS总体差异有统计学意义(P0.05)。空白组与模型组比较,q=9.07,差异有统计学意义(P0.05),提示在DM模型大鼠阴茎中eNOS含量减少;空白组与温阳活血方小剂量组及西地那非组比较,q值分别为8.16及7.06,(P均0.05),差异有统计学意义;空白组与温阳活血方组及温阳活血方大剂量组比较,q值分别为2.65及1.71,(P均0.05),差异无统计学意义,提示两种中药剂量均能恢复DM大鼠阴茎中eNOS的含量。4.实验后各组nNOS含量方面比较:总体比较F=134.9,总体P=0.000,各组nNOS总体差异有统计学意义(P0.05);空白组与模型组比较,q=4.53,差异有统计学意义(P0.05),提示在DM模型大鼠阴茎中nNOS含量减少;空白组与温阳活血方小剂量组及西地那非组比较,q值分别为4.53及4.51,(P均0.05),差异有统计学意义;空白组与温阳活血方组及温阳活血方大剂量组比较,q值分别为1.76及1.71,(P均0.05),差异无统计学意义,提示大、中两种中药剂量均能恢复DM大鼠阴茎中nNOS的含量。5.实验后各组PDE5含量比较:总体比较F=177.8,总体P=0.000,各组PDE5总体差异有统计学意义(P0.05);空白组与模型组比较,q=7.26,差异有统计学意义(P0.05),提示在DM模型大鼠阴茎中PDE5含量增加;模型组与温阳活血方小剂量组比较,q=0.91,差异无统计学意义(P0.05);模型组与西地那非组比较,q=5.29,差异有统计学意义(P0.05);模型组与温阳活血方组及温阳活血方大剂量组比较,q值分别为6.18及6.84,(P均0.05),差异有统计学意义,提示大、中两种中药剂量及西地那非均能减少DM大鼠阴茎中PDE5的含量。6.实验后各组Rock1含量比较:总体比较F=238.9,总体P=0.000,各组Rock1总体差异有统计学意义(P0.05);空白组与模型组比较,q=4.54,差异有统计学意义(P0.05),提示在DM模型大鼠阴茎中Rock1含量增加;模型组与温阳活血方小剂量组及西地那非组比较,q值分别为0及1.77,(P均0.05),差异无统计学意义;空白组与温阳活血方组及温阳活血方大剂量组比较,q值分别为-0.88及-0.86(P均0.05),差异无统计学意义,提示大、中两种中药剂量均能减少DM大鼠阴茎中Rock1的含量7.实验后各组Rock2含量比较:总体比较F=213,总体P=0.000,各组Rock2总体差异有统计学意义(P0.05);空白组与模型组比较,q=214.07,差异有统计学意义(P0.05),提示在DM模型大鼠阴茎中Rock2含量增加;模型组与温阳活血方组、温阳活血方大剂量组及西地那非组比较,q值分别为171.28、188.15及183.64(P均0.05),差异有统计学意义,提示大、中两种中药剂量及西地那非均能减少DM大鼠阴茎中Rock2的含量。结论:温阳活血方治疗勃起功能障碍疗效确切,在动物实验中表现为DM模型大鼠阴茎中的eNOS、nNOS的表达增加,使PDE5、Rock1、Rock2的表达减少。在临床治疗中取得不亚于西地那非的疗效。因此可以认为温阳活血方有效改善阳痿阴茎的血供及营养环境,是治疗勃起功能障碍的有效方药。通过对本研究结果的分析以及对温阳活血方作用机制的探讨,温阳活血方法治勃起功能障碍的中医机制在于:温阳活血方治疗勃起功能障碍,具有温肾壮阳,活血通络,营养宗筋之功,其药理机制可能是改善了末梢循环(阴茎血管的循环),减少了缺血缺氧等因素造成的阴茎损伤和重构,进而改善勃起功能。
【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R277.5;R285.5

【参考文献】