人参皂苷CK诱导裸鼠肝癌移植瘤细胞凋亡的内质网应激作用机制

发布时间：2020-06-04 02:39

【摘要】：目的探讨人参阜苷 Compound K(20-O-β-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanax-adiol;CK)对人肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤的细胞凋亡作用及内质网应激作用机制。方法建立人肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤模型,模型建立成功后,将裸鼠分为模型对照组(Vehicle)、人参皂苷CK低、中、高药物剂量组和阳性对照组。给药组裸鼠分别按照人参皂苷CK 5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg及阳性对照组5-Fu 10 mg/kg的剂量尾静脉注射,给药15天后处死裸鼠,分别检测移植瘤重量和体积,并计算用药后移植瘤的生长抑制率;采用HE染色法观察裸鼠移植瘤细胞的形态学变化;利用TUNEL原位细胞凋亡检测法检测移植瘤细胞的凋亡情况;最后,采用Western blot进一步检测内质网应激相关蛋白GRP78、p-eIF2α、p-JNK、Caspase4 和 CHOP 的表达。结果1.建立裸鼠移植瘤模型成功后,随着人参皂苷CK给药浓度的增加,移植瘤体积逐渐减小,瘤重明显下降。经计算,5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg人参皂苷CK给药组和5-Fu阳性对照组对移植瘤生长均有抑制作用,其肿瘤生长抑制率分别为 38.64%、44.01%、51.79%和 60.89%。此外,与 Vehicle 组比,裸鼠体重在 5 mg/kg、10 mg/kg人参皂苷CK用药组中无明显变化;2.裸鼠肝癌移植瘤形态学检测发现:HE染色结果得出,Vehicle组裸鼠移植瘤细胞形态完整,有异型性,瘤组织未见明显坏死;而随着人参皂苷CK给药剂量的增加,瘤组织出规明显坏死;TUNEL染色结果得出,Vehicle组中裸鼠移植瘤细胞的细胞核呈现蓝紫色染色,细胞结构完整,极少出现棕色深染的凋亡细胞;而人参皂苷CK给药后,移植瘤出现棕色深染的凋亡细胞,并随着给药浓度的增加,凋亡细胞逐渐增多;3.Western blot检测发现:与Vehicle组相比,人参皂苷CK给药组中内质网应激相关蛋白GRP78、p-eIF2α、p-JNK、Active-caspase4和CHOP的表达量明显升高,并随着药物剂量的增加,表达逐渐增多。结论人参皂苷CK可以抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长,诱导移植瘤肝癌细胞凋亡,内质网应激可能是诱导细胞凋亡的作用机制之一。
【图文】：

人参皂苷,移植瘤,细胞坏死,异型性

４．２人参皂苷ＣＫ对肝癌细胞形态学改变的影响逡逑光学显微镜下观察，肿瘤细胞为扁平状、胖梭形、柱状或立方形，瘤细胞有一逡逑定的异型性。瘤组织未见明显坏死，见图２ａ。人参皂苷ＣＫ加药后，瘤组织出现坏逡逑死，并随着药物剂量的增加？，坏死程度逐渐增加，见图２ｂ－ｄ。此外，５－Ｆｕ组中瘤逡逑细胞有一定的异型性。瘤组织中度坏死，其间血管少，有少量炎细胞浸润，见图２逡逑ｅ0逡逑）逡逑ｍ邋＇逡逑１７逡逑

人参皂苷,细胞凋亡,移植瘤,皂苷

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【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

【参考文献】