肺癌1号方对小鼠Lewis肺癌HSP70与PRDX1蛋白表达作用的实验研究

发布时间：2020-06-18 07:59

【摘要】：[目的]采用Lewis肺癌小鼠作为动物模型,使用免疫组化法检测Lewis肺癌小鼠肿瘤组织中HSP70和PRDX1蛋白的表达情况,研究肺癌1号方抗癌作用的原理,为肺癌1号方的临床应用和推广提供可靠的科学依据。[方法]复制小鼠Lewis肺癌模型,将成功复制Lewis肺癌小鼠模型的SPF级C57小鼠48只随机分成4组即:荷瘤对照组、肺癌1号方(LC-1)组、顺铂(DDP)组、肺癌1号方组与顺铂联合用药组(以下简称“联合用药组”)。荷瘤对照组每天用生理盐水灌胃一次,每三天腹腔注射生理盐水一次;肺癌1号方组每天用肺癌1号方药液灌胃一次,每三天腹腔注射生理盐水一次;顺铂组每天用生理盐水灌胃一次,每三天腹腔注射顺铂一次;联合用药组每天用肺癌1号方药液灌胃一次,每三天腹腔注射顺铂一次。各实验组小鼠于在第13天断颈处死,取出肿瘤标本,称取肿瘤重量以计算抑瘤率;肿瘤标本固定后,切片染色进行病理组织学检查,并用免疫组化Sp法检测HSP70和PRDX1蛋白阳性表达。用SPSS 22.0软件进行数据统计分析。[结果]1.瘤重与抑瘤率的测定:1.1瘤重:与荷瘤对照组的平均瘤重(7.28±0.78g)相比较,肺癌1号方组平均瘤重(6.21±0.83g)低于该组,差异有统计学意义(P0.05),顺铂组平均瘤(5.34±0.66g)重低于该组,差异有统计学意义(P0.01),联合用药组平均瘤重(4.24±0.48g)同样也低于该组,差异有统计学意义(P0.01);以肺癌1号方组作为比较对象,顺铂组平均瘤重低于该组,差异有统计学意义(P0.05),联合用药组的平均瘤重低于此组,差异具备统计学意义(P0.01);以顺铂组作为比较对象,联合用药组平均瘤重低于此组,差异具备统计学意义(P0.01)。1.2抑瘤率测定:联合用药组抑瘤率为41.8%,效果最好;顺铂组抑瘤率为26.6%,效果次之;肺癌1号方组抑瘤率为14.7%,效果最弱。2.HSP70表达检测:HSP70阳性表达的平均光密度值分别为:荷瘤对照组(0.0141±0.0018),肺癌1号方组(0.0108±0.0011),顺铂组(0.0101±0.0007),联合用药组(0.0071±0.0013)。肺癌1号方组的HSP70的平均光密度值低于荷瘤对照组,差异具有统计学意义(P0.01);顺铂组的HSP70的平均光密度值低于荷瘤对照组,差异具有统计学意义(P0.01);联合用药组的HSP70的平均光密度值低于荷瘤对照组,差异具有统计学意义(P0.01);肺癌1号组的HSP70的平均光密度值高于顺铂组,但差异不具有统计学意义(P0.05);肺癌1号方组的HSP70的平均光密度值高于联合用药组,差异具有统计学意义(P0.01);联合用药组的HSP70的平均光密度值低于顺铂组,差异具有统计学意义(P0.01)。3.PRDX1表达检测:PRDX1阳性表达的平均光密度值分别为:荷瘤对照组(0.0128±0.0017),肺癌1号方组(0.0100±0.0015),顺铂组(0.0090±0.0007),联合用药组(0.0060±0.0013)。肺癌1号组的PRDX1的平均光密度值低于荷瘤对照组,差异具有统计学意义(P0.01);顺铂组的PRDX1的平均光密度值低于荷瘤对照组,差异具有统计学意义(P0.01);联合用药组的PRDX1的平均光密度值低于荷瘤对照组,差异具有统计学意义(P0.01);肺癌1号方组的PRDX1的平均光密度值略高于顺铂组,但差异不具有统计学意义(P0.05);肺癌1号方组的PRDX1的平均光密度值高于联合用药组,差异具有统计学意义(P0.01);联合用药组的PRDX1的平均光密度值低于顺铂组,但差异具有统计学意义(P0.01)。4.肿瘤组织病理切片观察:三个治疗组与荷瘤对照组相比,肿瘤细胞坏死区域增多,坏死面积增大,多呈灶状或片状坏死;细胞水肿明显,细胞密度相对减低,细胞的异型性相对减少。治疗组之间相互比较,联合用药组坏死区域面积相对较大,顺铂组比肺癌1号方组坏死区域面积较大。[结论]1.肺癌1号方可以降低小鼠Lewis肺癌中与细胞凋亡抑制相关蛋白HSP70和PRDX1的表达,从而起到治疗效果。2.顺铂可以降低小鼠Lewis肺癌凋亡抑制相关蛋白HSP70和PRDX1的过量表达,提示降低肺癌细胞的凋亡抑制可能是顺铂治疗肺癌的机制之一。3.肺癌1号方或顺铂单独使用与二者联合用药相比,联合用药在降低小鼠Lewis肺癌HSP70和PRDX1表达方面,效果优于单独使用肺癌1号方或顺铂,提示肺癌1号方和顺铂联合应用时抗癌效果增强。
【学位授予单位】：云南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

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本文编号：2718946