基于Notch信号通路探讨中风膏对大鼠脑缺血损伤NGF表达及再生的作用

发布时间：2020-06-29 07:41

【摘要】：目的:观察中风膏对大鼠脑缺血损伤的神经保护效应,并探究此保护作用的机制。方法:100只SPF级雄性SD大鼠,随机将大鼠分为正常组、假手术组、模型1d、3d、7d、14d组、中风膏1d、3d、7d、14d组,每组10只,于造模成功次日开始灌胃给药,在给药1d、3d、7d、14d后分批处死大鼠,收集、固定标本。观察MCAO大鼠神经功能评分,采用TTC染色法测定不同时间点大鼠脑梗死体积,采用RT-PCR技术检测缺血大脑海马组织NGF、Notch1、hes1基因表达,采用Western blot技术检测缺血大脑海马组织NGF蛋白表达。结果:1.大鼠神经功能评分比较缺血再灌注损伤后模型组和中风膏组大鼠术后均出现神经功能缺损,再灌注1d、3d、7d到14d,评分逐渐减少,随时间的延长两组的神经功能有所恢复,评分逐渐下降,但中风膏组下降明显快于模型组,7d、14d两者的评分有显著性差异(P0.05)。2.TTC染色法测定大鼠脑梗死体积与假手术组比较,除空白组外,其他各组梗死率均明显增大,差异有统计学意义(P0.01),同时间与模型3d组比较,中风膏3d组梗死体积减小,与模型7d相比较,中风膏7d组的梗死面积减小,差异有统计学意义(P0.05)。3.通过RT-PCR方法检测脑缺血大鼠海马组织指标基因表达情况(1)神经生长因子(NGF)结果:与空白组和模型组比较:脑组织中NGF基因均出现不同程度的表达。与空白组比较,模型组和中风膏组NGF表达显著升高,差异具有统计学意义(P0.01);与假手术组比较,模型组和中风膏组差异具有统计学意义(P0.05);而与模型组相比较,同等时间中风膏1d组和3d组差异无统计学意义(P0.05);同等时间中风膏7d组NGF基因明显表达,差异有统计学意义(P0.01);同等时间中风膏14d组差异有统计学意义(P0.05)。(2)Notch1结果:各时间点模型组和中风膏组与空白组和假手术组比较,Notch1基因表达明显增多,差异具有统计学意义(P0.05);而大脑组织中Notch基因在中风膏1d、3d和7d高于同时间模型组,差异有统计学意义(P0.05);而与模型14d组比较,中风膏14d组Notch基因表达明显增多,差异有统计学意义(P0.01)。(3)hes1结果:模型组和中风膏组大鼠脑组织hes1基因明显高于空白组和假手术组,差异有统计学意义(P0.01;P0.05);而在中风膏1d和3d与同时间模型组比较,差异无统计学意义(P0.05),与模型7d和14d比较,中风膏组在同时间点hes1基因表达明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.01)。4.通过Western blot技术检测脑缺血大鼠海马组织NGF蛋白表达模型组和中风膏组NGF蛋白表达明显升高,与空白组和模型组比较差异具有统计学意义(P0.01);而与同时间模型组比较中风膏1d组没有统计学意义(P0.05);而与模型7d组比较,同时间的中风膏组,差异有统计学意义(P0.01);与模型3d和14d比较,同时间中风膏组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1.中风膏可以改善MCAO大鼠神经功能缺损症状,这种作用在梗死后1d-3d不明显,在7d时最为明显,在14d后仍有保护作用。2.中风膏治疗缺血性脑卒中,促进神经功能的恢复可能是通过Notch信号通路来实现的。
【学位授予单位】：甘肃中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：

表 8 两组大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能缺损评分鼠数（n） 1d 3d 7d 14d10 0 -- -- --9 0.25±0.46 -- -- --31 2.86±0.38 2.38±0.52 2.13±0.35 1.88±0.3532 2.50±0.53 2.25±0.46 1.25±0.46*1.13±0.35*中风膏与模型组各组比较*P<0.05。后各组大鼠脑梗死体积变化缺血再灌注损伤大鼠 TTC 染色后梗死体积如图所示，空白组和假手术组未见明显梗塞及水肿。而模型组及中风膏组大鼠在阻塞右侧大脑中动脉缺灌注后不同时间点经 TTC 染色均出现右侧大脑白色梗死区。与假手术组外，其他各组梗死率均明显增大，差异有统计学意义（P＜0.01），同时间比较，中风膏 3 天组梗死体积减小，与模型 7 天相比较，中风膏 7 天组的，差异有统计学意义（P＜0.05）。

注：K：空白组；JSS：假手术组；M：模型组；Z：中风膏组。与空白组比较：*P<0.01；与假手术#P<0.05 ；与模型组相比，同等时间：△P>0.05；▲P<0.01； P<0.05。图3 注：与空白组比较：*P<0.01；与假手术组比较：#P<0.05 ；与模型组相比，同等时间：△P▲P<0.01； P<0.05。*#△*#△*#▲*# *#△*#△*#▲*# 00.511.522.51d 3d 7d 14dKJSSMZNGFmRNA相对定量

【参考文献】

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本文编号：2733609