迷迭香提取物对HepG2细胞氧化损伤的保护作用
发布时间：2020-08-01 18:24
【摘要】：迷迭香(Rosmarinus officinalis L.)富含鼠尾草酸(carnosic acid)、鼠尾草酚(carnosol)、迷迭香酸(rosmarinic acid )、迷迭香酚(rosmanol )、迷迭香醌(rosmariquinone )、咖啡酸(caffeic acid )、迷迭香二酚( rosmaridiphenol )、熊果酸(ursolic acid)等多种活性成分,有显著的抗氧化、抗炎、抑菌和抑制肿瘤等生物学功能等,因此有很高的药用价值和食用价值。本论文以人肝癌细胞(HepG2)为模式生物,对迷迭香提取物(RE)的体外抗氧化活性进行了探究,并对其生效的分子机制进行初步分析。本课题的研究将对迷迭香资源的科学开发和营养膳食干预产生重要理论意义和实际应用价值。实验通过MTT法检测RE对HepG2细胞活力的影响,另予以不同浓度H202检测其对细胞的损伤作用。之后选取合适浓度的RE培养细胞,MTT法检测RE对H202诱导氧化损伤的细胞活力;并给予2',7'-Dichlorofluorescin(DCFHDA)探针,使用激光共聚焦显微镜检测细胞内氧自由基(ROS)含量;通过加入monochlorobimane( MCB)探针,使用激光共聚焦显微镜检测胞内谷胱甘肽(GSH)-含量。彗星实验方法检测细胞核内DNA损伤水平,并通过RT-PCR检测细胞内相关基因mRNA的表达水平。实验中发现,RE能够显著缓解细胞受H202诱导的氧化损伤程度,显著降低受损伤细胞的ROS含量,增加GSH含量、显著抑制H202诱导的核内DNA损伤情况,并调节相关抗氧化基因的表达水平。将RE置于高温条件(60℃)存储不同时间,液相(LC)检测其中组成成分的含量变化,并通过DPPH法检测其抗氧化水平,MTT法检测其不同加工时间RE对H202诱导氧化损伤的细胞活力的影响,并检测其ROS,GSH含量。研究结果表明,RE能够显著缓解H202诱导氧化损伤的所致实验细胞HepG2的损伤,调节体内内源性抗氧化基因mRNA的表达水平,增加GSH等抗氧化因子的含量,抑制过氧化产物的累积,提高模式生物清除体内ROS的能力,改善抗氧化能力;此外,加工后的RE鼠尾草酸含量大幅降低,鼠尾草酚含量上升,同时细胞实验发现加工后的RE提取物抗氧化能力下降,推测RE的抗氧化能力可能与鼠尾草酸的含量正相关。
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285
【图文】：
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本文编号：2777828
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285
【图文】：
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