注射用丹参多酚酸药物相互作用及抗氧化应激机制研究

发布时间：2020-08-23 19:06

【摘要】：目的:考察注射用丹参多酚酸(Salvianolic Acid for Injection,SAFI)与常用注射剂的配伍稳定性;研究SAFI对药物代谢酶—细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)的七种同工酶:CYP1 A2、2 B6、2 C8、2 C9、2 C19、2 D6和3A4活性的抑制作用;评价SAFI对硝苯地平体内代谢的影响;研究SAFI的抗氧化活性和抗氧化应激的作用机制。方法:将SAFI与8种溶剂、12种注射剂配伍后,利用高效液相色谱法和紫外分光光度法等,考察各配伍溶液的外观(颜色、沉淀)、pH值、不溶性微粒数、主要成分含量等指标的变化情况;将SAFI与人肝微粒体共孵育后,分别加入各亚型酶的特异性探针底物溶液,测定其相应的代谢产物含量;将大鼠分为单剂量硝苯地平组,单剂量联合给药组,多剂量硝苯地平组和多剂量联合给药组,测定给药后大鼠血浆中硝苯地平的含量,计算硝苯地平药代动力学参数,评价SAFI对硝苯地平代谢是否会产生影响;建立DPPH、ABTS、FRAP和邻二氮菲模型的抗氧化活性评价方法,评价SAFI的抗氧化活性;利用合适浓度的H_2O_2对PC12细胞损伤,建立氧化应激模型,考察SAFI对细胞生存率、细胞内还原性谷胱甘肽、超氧化物歧化酶和NADH氧化酶的影响。结果:1.SAFI与盐酸普罗、盐酸法舒地尔、盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液接触后,产生白色沉淀,与碳酸氢钠注射液接触后溶液明显加深;与甘露醇、氨茶碱、二羟丙茶碱注射液的配伍液中不溶性微粒数不符合《中国药典》要求;与甘露醇、盐酸普罗帕酮、盐酸左氧氟沙星氯化钠、盐酸法舒地尔、氨茶碱、二羟丙茶碱、碳酸氢钠注射液配伍后,最大吸光度和主要成分含量发生明显变化,与乳酸钠林格注射液配伍后,主要成分含量发生明显变化。2.SAFI在测试浓度为31.25μg/mL及以下时,对CYP1 A2,2 B6,2C8,2 C9,2 C19,2D6和3A4的活性无抑制作用,而在最高浓度(62.5μg/mL)时,CYP1 A2、2 B6、2 C9、2 C19和3 A4的酶活性分别为阴性对照的75.5%、70.2%、73.9%、68.2%、79.0%,但是该浓度远高于临床剂量下人体内所能达到的最大药物浓度。3.单次给药和连续七天给药条件下,联合给药组与硝苯地平组的血浆暴露水平(AUC、Cmax)、达峰时间(Tmax)均无统计学差异(P0.05)。4.SAFI中主要成分丹酚酸B、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸Y等在四种抗氧化活性模型中,EC50值均小于抗坏血酸和依达拉奉注射液。5.H_2O_2损伤PC12细胞后,SAFI显著性(P0.05)升高PC12细胞生存率,并提高细胞内SOD、GSH-Px的含量,降低NOX的含量。结论:1.结果表明SAFI不宜与乳酸钠林格、甘露醇、盐酸普罗帕酮、盐酸法舒地尔、盐酸左氧氟沙星氯化钠、碳酸氢钠、氨茶碱和二羟丙茶碱注射液配伍使用。2.建立了评价SAFI对CYP1 A2、2 B6、2 C8、2 C9、2 C19、2 D6和3 A47种CYP450同工酶活性的体系。结果表明SAFI按临床剂量给药时,对人肝微粒体7种亚型没有明显的抑制作用。3.建立了大鼠体内硝苯地平药代动力学影响的超高效液相串联质谱的检测法,方法准确、精密、灵敏,测定结果显示SAFI对硝苯地平的药动学特征无显著性影响,提示SAFI与硝苯地平联合使用不存在明显的药物相互作用。4.建立了SAFI抗氧化活性的评价方法,结果表明SAFI及其主要活性成分丹酚酸B、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸Y具有强抗氧化活性。5.建立了H_2O_2诱导PC12细胞氧化应激损伤的细胞模型,在此模型中,SAFI通过调节细胞内SOD、GSH-Px、NOX的含量保护氧化应激损伤的细胞。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】