黄芪多糖抑制人肝癌细胞增殖的作用机制研究

发布时间：2021-10-17 20:01

　　目的研究黄芪多糖（Astragalus polysaccharide,APS）对人肝癌细胞增殖的影响,并探讨其潜在的药理作用机制,为临床用药提供依据。方法采用人肝癌Hep G2细胞,分别给予0、25、50、100μg·m L-1APS处理,并用10μmol·L-1Akt通路抑制剂LY294002联合干预。噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度APS对Hep G2细胞增殖活性的影响;免疫印迹法（Western Blot）检测LC3A、LC3B、P62、Akt、p-Akt、Bcl-2、Bax等蛋白的表达水平;流式细胞术（Flowcy tometry）检测细胞周期分布和细胞凋亡比例。结果 APS处理Hep G2后,细胞形态变圆变亮; MTT实验显示:APS对Hep G2细胞生长具有抑制作用,且呈剂量依赖性; Western blot检测细胞的自噬水平发现:APS可减少LC3A、P62的表达,增加LC3B表达的水平; APS处理Hep G2细胞后,呈现G1期细胞阻滞和细胞凋亡水平显著增高,Akt、p-Akt、Bcl-2蛋白表达的水平降低,Bax蛋白表达的水平增加;与单独处理组比较,APS联合LY294... 

【文章来源】：华西药学杂志. 2020,35(04)CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

0(A)、25(B)、50(C)、100(D)μg·m L-1APS对Hep G2细胞形态的影响

采用免疫印迹法(Western Blot)检测蛋白表达的水平。将处于对数生长期的HepG2细胞按3×105细胞接种于6孔板中，分组处理24 h。用NP40裂解细胞并提取总蛋白和BCA法蛋白;取20μg总蛋白上样、SDS-PAGE分离、转膜，在一抗(稀释比例均为1∶1000)中于4℃下孵育过夜，在二抗(1∶5000)室温下孵育1 h。采用Amersham Imager 600 System(GE)观察蛋白印迹条带和成像;应用Image J软件半定量分析蛋白印迹条带的积分光密度。结果以GAPDH为内参，计算各目的蛋白的比值，半定量表示蛋白的相对表达水平。与对照组比较，APS各处理组HepG2细胞中LC3B的表达呈浓度依赖性增高(P<0.05);相反，APS可减少LC3A、P62的表达(P<0.05)。提示APS引起的细胞周期阻滞和线粒体依赖性凋亡与细胞自噬相关(图3)。图3 APS对Hep G2细胞LC3A、LC3B和P62蛋白表达的影响(A．电泳图;B．柱状图)

APS对Hep G2细胞LC3A、LC3B和P62蛋白表达的影响(A．电泳图;B．柱状图)

【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芪多糖对慢性疲劳小鼠骨骼肌线粒体功能的影响及作用机制[J]. 黄燕峰,朱达坚,鲁路.  广东医学. 2017(12)
[2]黄芪多糖对小鼠免疫功能影响的研究[J]. 石永芳.  山东化工. 2017(03)
[3]川陈皮素对肝癌细胞的抑制作用[J]. 赵妍妍,马秀英,周黎明.  华西药学杂志. 2007(02)
[4]苦马豆素对肝癌细胞在体内外生长的抑制作用[J]. 孙纪元,朱妙章,王四旺,谢艳华,王剑波,缪珊.  华西药学杂志. 2006(03)



本文编号：3442338