莪术主要成分激活自噬干预HLF细胞胶原合成的实验研究
发布时间：2021-11-02 19:02
目的:基于课题组前期实验发现益肺散结方可减轻COPD小气道重塑及延缓肺纤维化进展的基础上,本课题进一步研究益肺散结方逐瘀作用的分子机制。本课题选取方中逐瘀药莪术的主要成分姜黄素、莪术醇干预人肺成纤维细胞,观察其对胶原合成及自噬水平的影响,探讨其是否通过调控自噬干预人肺成纤维细胞胶原合成,从而阐述益肺散结方逐瘀作用的分子机制,为临床应用提供实验依据和理论基础参考。方法:体外培养人肺成纤维细胞（HLF）,以TGF-β1刺激成纤维细胞使之分化为肌成纤维细胞。不同浓度姜黄素、莪术醇为实验组。加入CQ的为抑制剂组。以雷帕霉素干预作为阳性对照组。为检测胶原合成,使用消化法羟脯氨酸（HYP）检测试剂盒检测各组细胞的HYP含量;Q-PCR法检测纤维化相关基因α-SMA表达水平;使用Western Blot检测细胞内Ⅰ型胶原蛋白（COL-Ⅰ）和Ⅲ型胶原蛋白（COL-Ⅲ）表达情况;使用Elisa法检测Ⅰ型前胶原氨基端肽（PⅠNP）、III型前胶原氨基端肽（PIIINP）、人脯氨酸羟化酶（PHD）的含量。为检测自噬水平,使用透射电镜观测自噬小体形成情况;Q-PCR法检测自噬相关基因Beclin1、ATG 7...
【文章来源】：云南中医药大学云南省
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组实验药物干预后细胞活性变化情况
雷帕霉素组 16μg/mL 1.10±0.68#：与正常组比，*P＜0.05；与模型组相比，#P＜0.05。表 1-3 各组细胞培养液中羟脯氨酸含量（ X±SD，n=3，μg/mL）组别 浓度 羟脯氨酸含量正常组 — 0.43±0.006模型组 10ng/mL 4.09±0.001*姜黄素组8μg/mL 1.32±0.002#16μg/mL 0.89±0.016#32μg/mL 0.61±0.012#雷帕霉素组 16μg/mL 0.77±0.003#：与正常组比，*p＜0.05；与模型组相比，#p＜0.05。
雷帕霉素组 16μg/mL 1.10±0.68#：与正常组比，*P＜0.05；与模型组相比，#P＜0.05。表 1-3 各组细胞培养液中羟脯氨酸含量（ X±SD，n=3，μg/mL）组别 浓度 羟脯氨酸含量正常组 — 0.43±0.006模型组 10ng/mL 4.09±0.001*姜黄素组8μg/mL 1.32±0.002#16μg/mL 0.89±0.016#32μg/mL 0.61±0.012#雷帕霉素组 16μg/mL 0.77±0.003#：与正常组比，*p＜0.05；与模型组相比，#p＜0.05。
【参考文献】：
期刊论文
[1]莪术醇对结肠癌细胞HCT116的影响及作用机制研究[J]. 梁乔芳,廖小林,吴洪文. 亚太传统医药. 2019(02)
[2]莪术醇通过调控PI3K/AKT通路促进人肝癌HepG2细胞凋亡[J]. 吴皓,李政,彭信幸. 中南药学. 2019(01)
[3]胸腺肽β4对TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞的增殖、分化及促纤维化作用的影响[J]. 程义局,杨雪,万方,罗浩,李瑞雪,宋小霞,马文,雷显萍,黄妮雯,宋盛仁,倪木子,杜娟,张婷. 贵州医科大学学报. 2018(12)
[4]补阳还五汤对肺纤维化小鼠中介导细胞自噬的mTOR蛋白的调控机制探讨[J]. 潘怡,王振兴,郭静,张川峰,王丽娟,杨晗,王飞. 中国实验方剂学杂志. 2019(06)
[5]外周血microRNA-21表达水平对百草枯中毒预后的相关性研究[J]. 龚晓亮,陈继军,张国庆,吴林,王蕾,王倩梅,赵鹏. 临床急诊杂志. 2018(11)
[6]TP53INP2/DOR在转录调控、细胞自噬和相关疾病中的作用[J]. 许银丰,李宁,陈颖卓. 中国生物化学与分子生物学报. 2018(11)
[7]特发性肺纤维化药物治疗选择与长期管理策略[J]. 陈智鸿,白春学. 中国实用内科杂志. 2018(11)
[8]姜黄素通过调控PPARγ/NF-κB信号通路减轻CSE诱导的人气道上皮细胞氧化应激反应[J]. 朱涛,施婵妹,李鹤,何婧,杨艳丽,王勤,邓欣雨,吴砚樵,王静,赵燕,邓火金. 南方医科大学学报. 2018(10)
[9]大黄素抑制Akt/mTOR通路抗肾小管上皮细胞纤维化的作用研究[J]. 窦芳,丁一,楚建杰,李韦韦,张伟,宁泽琼,赵先,王婧雯,文爱东. 中国药师. 2018(10)
[10]丹酚酸B通过调控自噬改善UUO小鼠肾纤维化[J]. 黄小娟,贺雨,刘碧好,周玖瑶,周园. 中药材. 2018(09)
博士论文
[1]心复康口服液干预心力衰竭大鼠心肌线粒体质量控制的机制研究[D]. 邱志凌.中国中医科学院 2018
[2]姜黄素调控细胞衰老抗肝纤维化的机理研究[D]. 金欢欢.南京中医药大学 2018
[3]陈皮碱性提取物对肺纤维化小鼠的保护作用及对肺成纤维细胞凋亡的影响[D]. 武琦.南京中医药大学 2018
[4]羟基红花黄色素A抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞活化的靶点及机制研究[D]. 潘瑞艳.首都医科大学 2017
[5]姜黄素在血管紧张素Ⅱ致大鼠心肌纤维化中的作用及机制研究[D]. 庞雪芬.山西医科大学 2016
[6]姜黄素调控细胞自噬的分子机制研究及其在抗肿瘤治疗中的意义[D]. 张青玉.南京大学 2016
[7]CTGF-ILK通路对肺纤维化ECM的影响及纤克颗粒的干预作用研究[D]. 王爽.长春中医药大学 2014
[8]中药活性成分姜黄素和川芎嗪作用于肝星状细胞的抗肝纤维化机理研究[D]. 张峰.南京中医药大学 2013
[9]mTOR信号通路参与肺纤维化发病的机制研究[D]. 桂耀松.北京协和医学院 2013
[10]莪术油干预肺纤维化上皮细胞转分化的实验研究[D]. 杨长福.北京中医药大学 2011
硕士论文
[1]益肺散结方干预小鼠肺纤维化作用机理初步研究[D]. 戴晨.云南中医学院 2018
[2]Ac-SDKP对肺纤维化小鼠模型肺泡上皮细胞凋亡影响的研究[D]. 薛彤彤.山西医科大学 2018
[3]莪术醇调控Raf/MEK/ERK信号通路诱导肝癌细胞凋亡[D]. 郭芳.广东药科大学 2018
[4]三七、莪术主成分调控巨噬细胞NF-κB、TGF-β信号通路的实验研究[D]. 李宁.云南中医学院 2018
[5]自噬在气管狭窄动物模型中的表达及意义[D]. 覃恩愿.广西医科大学 2018
[6]基于miRNAs的姜黄素抗肾间质纤维化分子机制的实验研究[D]. 刘祎.北京中医药大学 2018
[7]CDKN2B甲基化在肺纤维化发生发展中的作用及初步机制研究[D]. 曹小俊.宁夏医科大学 2018
[8]三七总皂苷对人胚肺成纤维细胞MRC-5作用机制的研究[D]. 刘娜.山东中医药大学 2017
[9]石莲花对TGF-βi诱导的体外肺纤维化细胞模型的影响[D]. 叶秋英.福建中医药大学 2017
[10]莪术醇干预大鼠血瘀型肝纤维化及LSEC超微结构的实验研究[D]. 黎桂玉.广西中医药大学 2017
本文编号：3472230
【文章来源】：云南中医药大学云南省
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组实验药物干预后细胞活性变化情况
雷帕霉素组 16μg/mL 1.10±0.68#：与正常组比，*P＜0.05；与模型组相比，#P＜0.05。表 1-3 各组细胞培养液中羟脯氨酸含量（ X±SD，n=3，μg/mL）组别 浓度 羟脯氨酸含量正常组 — 0.43±0.006模型组 10ng/mL 4.09±0.001*姜黄素组8μg/mL 1.32±0.002#16μg/mL 0.89±0.016#32μg/mL 0.61±0.012#雷帕霉素组 16μg/mL 0.77±0.003#：与正常组比，*p＜0.05；与模型组相比，#p＜0.05。
雷帕霉素组 16μg/mL 1.10±0.68#：与正常组比，*P＜0.05；与模型组相比，#P＜0.05。表 1-3 各组细胞培养液中羟脯氨酸含量（ X±SD，n=3，μg/mL）组别 浓度 羟脯氨酸含量正常组 — 0.43±0.006模型组 10ng/mL 4.09±0.001*姜黄素组8μg/mL 1.32±0.002#16μg/mL 0.89±0.016#32μg/mL 0.61±0.012#雷帕霉素组 16μg/mL 0.77±0.003#：与正常组比，*p＜0.05；与模型组相比，#p＜0.05。
【参考文献】：
期刊论文
[1]莪术醇对结肠癌细胞HCT116的影响及作用机制研究[J]. 梁乔芳,廖小林,吴洪文. 亚太传统医药. 2019(02)
[2]莪术醇通过调控PI3K/AKT通路促进人肝癌HepG2细胞凋亡[J]. 吴皓,李政,彭信幸. 中南药学. 2019(01)
[3]胸腺肽β4对TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞的增殖、分化及促纤维化作用的影响[J]. 程义局,杨雪,万方,罗浩,李瑞雪,宋小霞,马文,雷显萍,黄妮雯,宋盛仁,倪木子,杜娟,张婷. 贵州医科大学学报. 2018(12)
[4]补阳还五汤对肺纤维化小鼠中介导细胞自噬的mTOR蛋白的调控机制探讨[J]. 潘怡,王振兴,郭静,张川峰,王丽娟,杨晗,王飞. 中国实验方剂学杂志. 2019(06)
[5]外周血microRNA-21表达水平对百草枯中毒预后的相关性研究[J]. 龚晓亮,陈继军,张国庆,吴林,王蕾,王倩梅,赵鹏. 临床急诊杂志. 2018(11)
[6]TP53INP2/DOR在转录调控、细胞自噬和相关疾病中的作用[J]. 许银丰,李宁,陈颖卓. 中国生物化学与分子生物学报. 2018(11)
[7]特发性肺纤维化药物治疗选择与长期管理策略[J]. 陈智鸿,白春学. 中国实用内科杂志. 2018(11)
[8]姜黄素通过调控PPARγ/NF-κB信号通路减轻CSE诱导的人气道上皮细胞氧化应激反应[J]. 朱涛,施婵妹,李鹤,何婧,杨艳丽,王勤,邓欣雨,吴砚樵,王静,赵燕,邓火金. 南方医科大学学报. 2018(10)
[9]大黄素抑制Akt/mTOR通路抗肾小管上皮细胞纤维化的作用研究[J]. 窦芳,丁一,楚建杰,李韦韦,张伟,宁泽琼,赵先,王婧雯,文爱东. 中国药师. 2018(10)
[10]丹酚酸B通过调控自噬改善UUO小鼠肾纤维化[J]. 黄小娟,贺雨,刘碧好,周玖瑶,周园. 中药材. 2018(09)
博士论文
[1]心复康口服液干预心力衰竭大鼠心肌线粒体质量控制的机制研究[D]. 邱志凌.中国中医科学院 2018
[2]姜黄素调控细胞衰老抗肝纤维化的机理研究[D]. 金欢欢.南京中医药大学 2018
[3]陈皮碱性提取物对肺纤维化小鼠的保护作用及对肺成纤维细胞凋亡的影响[D]. 武琦.南京中医药大学 2018
[4]羟基红花黄色素A抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞活化的靶点及机制研究[D]. 潘瑞艳.首都医科大学 2017
[5]姜黄素在血管紧张素Ⅱ致大鼠心肌纤维化中的作用及机制研究[D]. 庞雪芬.山西医科大学 2016
[6]姜黄素调控细胞自噬的分子机制研究及其在抗肿瘤治疗中的意义[D]. 张青玉.南京大学 2016
[7]CTGF-ILK通路对肺纤维化ECM的影响及纤克颗粒的干预作用研究[D]. 王爽.长春中医药大学 2014
[8]中药活性成分姜黄素和川芎嗪作用于肝星状细胞的抗肝纤维化机理研究[D]. 张峰.南京中医药大学 2013
[9]mTOR信号通路参与肺纤维化发病的机制研究[D]. 桂耀松.北京协和医学院 2013
[10]莪术油干预肺纤维化上皮细胞转分化的实验研究[D]. 杨长福.北京中医药大学 2011
硕士论文
[1]益肺散结方干预小鼠肺纤维化作用机理初步研究[D]. 戴晨.云南中医学院 2018
[2]Ac-SDKP对肺纤维化小鼠模型肺泡上皮细胞凋亡影响的研究[D]. 薛彤彤.山西医科大学 2018
[3]莪术醇调控Raf/MEK/ERK信号通路诱导肝癌细胞凋亡[D]. 郭芳.广东药科大学 2018
[4]三七、莪术主成分调控巨噬细胞NF-κB、TGF-β信号通路的实验研究[D]. 李宁.云南中医学院 2018
[5]自噬在气管狭窄动物模型中的表达及意义[D]. 覃恩愿.广西医科大学 2018
[6]基于miRNAs的姜黄素抗肾间质纤维化分子机制的实验研究[D]. 刘祎.北京中医药大学 2018
[7]CDKN2B甲基化在肺纤维化发生发展中的作用及初步机制研究[D]. 曹小俊.宁夏医科大学 2018
[8]三七总皂苷对人胚肺成纤维细胞MRC-5作用机制的研究[D]. 刘娜.山东中医药大学 2017
[9]石莲花对TGF-βi诱导的体外肺纤维化细胞模型的影响[D]. 叶秋英.福建中医药大学 2017
[10]莪术醇干预大鼠血瘀型肝纤维化及LSEC超微结构的实验研究[D]. 黎桂玉.广西中医药大学 2017
本文编号：3472230
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