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基于PI3K/Akt信号通路探讨平喘颗粒干预气道上皮细胞自噬与凋亡的机制

发布时间:2021-11-05 11:31
  目的本研究将阐明自噬和凋亡对气道上皮细胞的调控及作用机制,揭示平喘颗粒对气道上皮细胞自噬和凋亡的干预作用,为中医药治疗支气管哮喘提供科学依据。方法1.以48只健康清洁级Wistar大鼠(雌雄各半),随机分为3组,每组16只,分别是A组(空白对照组)、B组(模型组)、C组(平喘颗粒组)。采用卵蛋白雾化吸入法制备哮喘大鼠模型,HE染色观察肺组织形态学改变,免疫组化法检测肺组织中Beclin-1、LC3B和caspase-3的表达,RT-PCR、Western Blot法检测肺组织中Beclin-1、LC3B和caspase-3蛋白的含量,观察平喘颗粒对哮喘持续期大鼠上皮细胞凋亡和自噬的作用机制。2.以雷帕霉素诱导16HBE细胞为模型,MTT法检测不同浓度的雷帕霉素和平喘颗粒含药血清对16HBE细胞的增殖抑制率,并用最佳浓度的雷帕霉素和平喘颗粒含药血清处理细胞,分为正常对照组、雷帕霉素组、雷帕加氯喹组、雷帕加中药组。应用透射电镜观察各组细胞自噬及凋亡情况,流式细胞技术检测细胞凋亡,RT-PCR、Western Blot检测细胞LC3B、Beclin-1、Caspase-3蛋白的表达,观察凋亡... 

【文章来源】:黑龙江中医药大学黑龙江省

【文章页数】:117 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

基于PI3K/Akt信号通路探讨平喘颗粒干预气道上皮细胞自噬与凋亡的机制


图2细胞自噬过程??2.?4细胞自噬发生过程的信号通路??

自噬,信号通路,细胞


2.?5细胞自噬的作用及意义??从酵母、线虫、果蝇等低等动物到高等的脊椎动物、哺乳动物,其体??内细胞中均存在自噬表现形式。以人体为例,自噬积极参与到了各种iK常??或异常细胞的生理及病理过程中。生理状态下:(1)自噬作为细胞内源动??力供应者,其自噬过程可以满足细胞和机体对代谢底物的需驭,所以/I:维??持能最代谢方面起了重要作用[731。当体内处于某种应激状态卜(',?"(养晓乏、??缺氧及zkKW子缺乏等),体内可以应激性调整自噬的信号通路,分解更多??蛋白质等,用以保证机体细胞iH常存活需要【621。(2)自噬在维持机体细胞??稳态方曲扮演了“管家”角色,fc耍包括对长寿蛋白降解利用、对缺陷蛋??白和细胞器的消除、对预防异常蛋纟丨质聚集体堆积等,其以多种方式参1-J??细胞质的重建与更新,用以维持机体细胞的稳定。(3)丨'丨噬耶细胞死r:通??常被称为丨I型程序性细胞死亡,该过程是细胞1复利用「1分小W耍、多余??、、

免疫组化,肺组织,对照组


?_?B?■??^?v°?/??图1-2各组大鼠Beclin-1、LC3B和caspase-3免疫组化结果??注:★表示与空白对照组比较有显著X:异(P<〇.05?),?★★表示与空??白对照组比较有显著差异(P<〇.01)?,?▲表小U模型组比较有显著差异??(p<o.〇5),?▲▲表示与模型组比较有显著茇异(p<o.on。??:;s',??.?.V?广??:‘??、、V、:..:仏乂?W..?*、-vU,??空甶对照组?税咁m?肀喘颗粒组??图1-3各组肺组织beelin-l免疫组化??'^?;:■-::.?-v?'?Vr,M??a?r?i对照组?模型组?平喘颗粒组??48??

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
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本文编号:3477715

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