丹皮酚对脂多糖刺激的RAW264.7细胞炎症与自噬的影响

发布时间：2021-11-10 22:34

　　目的:以脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）刺激的RAW264.7细胞,以自噬诱导剂雷帕霉素（rapamycin, Rap）促进自噬为主要模型,研究丹皮酚（paeonol,P）对RAW264.7自噬与免疫功能的影响。方法:使用LPS 1μg·ml^-1刺激RAW264.7细胞6 h,丹皮酚200μmol/L处理12 h,Rap 100 ng·ml^-1作用6 h,蛋白免疫印迹法（western blot,WB）检测自噬相关因子LC3B、Beclin、P62和炎症相关因子TNF-α、IL-1β的表达水平,激光共聚焦荧光共定位法（immunofluorescence,IF）检测LC3B、P62蛋白的荧光表达和定位;酶联免疫分析（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测RAW264.7细胞TNF-α的分泌。结果:在脂多糖诱导RAW264.7炎症反应的细胞模型中,添加丹皮酚药物后LC3B、Beclin表达增多,P62表达减少,LC3B-l向LC3B-ll的转换效率增强;雷帕霉素抑制IL-1β... 

【文章来源】：中国中医基础医学杂志. 2020,26(06)北大核心CSCD

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【部分图文】：

LPS刺激RAW264.7细胞中自噬相关蛋白LC3B、Beclin、P62的表达

图2示,在正常对照组中, Cy3 标记的 LC3B(红色)主要定位于细胞核与细胞质中,与 DAPI 标记的细胞核重叠,FITC标记的P62(绿色)主要定位在细胞质中。经药物刺激后,其定位并没有改变。3.3 丹皮酚对LPS刺激RAW264.7细胞炎症相关因子TNF-α和IL-1β表达的影响

与Rap组比较,R+P组表达量差异无统计学意义,提示在非炎症的环境中,雷帕霉素与丹皮酚对细胞没有影响。图4 LPS 刺激 RAW264.7 细胞中 TNF-α 的分泌(Elisa)

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3488070