蛇床子素及多吡啶钌，铱配合物抗肿瘤活性研究
发布时间：2021-11-11 22:31
目前,恶性肿瘤的治疗依然是世界上一大医学难题,随着科学技术的发展,科学家们不断的寻求新的抗肿瘤药物,深入研究其抗肿瘤机制,为人类战胜恶性肿瘤而不断努力。我国中医药具有深厚的历史,以其低毒,温和的药性而备受瞩目,在新时代的今天,借助新的科学方法与技术开发出传统中药新的药理性质,成为了一项热点,蛇床子素作为传统中药具有多种疗效,并在新的研究中发现其独特的抗肿瘤功效,但是机制尚未完全清楚,因此本文对蛇床子素在胃癌细胞SGC-7901上的抗肿瘤作用机制进行研究。同时,在多样化的抗肿瘤药物的探索中,金属配合物占据着一个极其重要的位置,并有着许多突破性的进展,但是其应用上仍具有局限性,因此开发出具有靶向性,高效低毒的金属配合物抗癌药物仍然需要我们继续努力,本论文因此合成了两个新的铱（Ⅲ）配合物和一个系列的钌（Ⅱ）配合物,并对其抗肿瘤机制进行研究与讨论。在本论文研究的抗肿瘤药物中,蛇床子素为中药单体。钌（Ⅱ）、铱（Ⅲ）配合物是由实验室设计合成和纯化,并通过质谱、红外、核磁的分析手段进行表征。本论文主要从体外细胞毒性、细胞凋亡、活性氧水平、线粒体膜电位变化、DNA损伤、细胞周期分布、侵袭作用、自噬和凋...
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：104 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 蛇床子素及钌,铱金属配合物的抗肿瘤研究进展
1.2.1 蛇床子素的抗肿瘤活性研究进展
1.2.2 钌金属配合物的抗肿瘤活性研究进展
1.2.3 铱金属配合物的抗肿瘤活性研究进展
1.3 蛇床子素及钌,铱金属配合物的抗肿瘤研究方法
1.3.1 细胞凋亡的含义
1.3.2 体外细胞毒性实验
1.3.3 细胞凋亡形态学变化检测
1.3.4 细胞内吞和定位检测
1.3.5 Annexin-V/PI双染法
1.3.6 JC-1检测线粒体膜电位
1.3.7 DCFH-DA检测ROS(活性氧)
1.3.8 Flow Cytometry检测细胞周期
1.3.9 单细胞凝胶电泳(SCGE)
1.3.10 Western blot免疫印迹法
1.3.11 细胞侵袭实验
1.3.12 自噬
1.4 选题意义及研究展望
参考文献
第二章 蛇床子素的体外抗肿瘤活性研究
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 实验试剂
2.2.2 实验仪器
2.3 Osthole抗肿瘤活性研究
2.3.1 常用溶液的配置
2.3.2 细胞培养
2.3.3 细胞毒性实验
2.3.4 AO/EB双荧光染色法
2.3.5 流式细胞仪检测细胞凋亡
2.3.6 单细胞凝胶电泳实验
2.3.7 内吞实验
2.3.8 ROS的检测
2.3.9 线粒体膜电位检测
2.3.10 细胞周期的测定
2.3.11 白噬实验
2.3.12 Transwell侵袭实验
2.3.13 免疫印迹实验(Western Blot)
2.4 实验结果与讨论
2.4.1 体外细胞毒性
2.4.2 AO/EB染色
2.4.3 流式检测细胞凋亡
2.4.4 彗星电泳结果分析
2.4.5 细胞内吞实验
2.4.6 线粒体膜电位结果分析
2.4.7 活性氧含量分析
2.4.8 Western Blot结果
2.4.9 流式细胞周期结果分析
2.4.10 自噬AO染色及LC3蛋白表达
2.4.11 transwell侵袭实验结果分析
2.5 小结
参考文献
第三章 具有抗肿瘤活性铱(Ⅲ)配合物合成及其机制研究
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 实验试剂
3.2.2 实验仪器
3.3 配合物的合成
3.3.1 配体及配合物合成路线
3.3.2 1,10-邻菲罗啉-5,6-二酮的合成
3.3.3 配体BTCP的合成与表征
3.3.4 Cis-[Ir(ppy)_2Cl_2]_2的合成
3.3.5 [Ir(ppy)_2(BTCP)]PF_6(Ir-1)的合成
3.4 配合物抗肿瘤活性的检测方法
3.4.1 Hochest 33258荧光染色法
3.4.2 自噬实验
3.5 实验结果与讨论
3.5.1 体外细胞毒性
3.5.2 AO/EB和Hoechst 3325染色结果分析
3.5.3 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡
3.5.4 内吞实验
3.5.5 DNA损伤实验结果
3.5.6 线粒体膜电位检测及线粒体定位
3.5.7 ROS检测结果
3.5.8 Western Blot结果
3.5.9 细胞周期检测
3.5.10 自噬检测结果
3.5.11 Transwell侵袭实验
3.6 小结
参考文献
第四章 具有光活性的铱(Ⅲ)配合物的合成及其抗肿瘤活性研究
4.1 引言
4.2 实验材料
4.2.1 实验试剂
4.2.2 实验仪器
4.3 配合物的合成
4.3.1 配体及配合物合成路线
4.3.2 配体FBPIP的合成与表征
4.3.3 [Ir(ppy)_2(FBPIP)]PF_6(Ir-1)的合成
4.4 配合物抗肿瘤活性的检测方法
4.5 实验结果与讨论
4.5.1 体外细胞毒性
4.5.2 细胞凋亡检测
4.5.3 ROS结果分析
4.5.4 线粒体膜电位结果分析
4.5.5 细胞侵袭实验
4.5.6 细胞自噬检测结果
4.5.7 细胞周期检测
4.5.8 凋亡蛋白表达
4.6 小结
参考文献
第五章 多吡啶钌(Ⅱ)配合物合成及其抗肿瘤活性研究
5.1 引言
5.2 实验材料
5.2.1 实验试剂
5.2.2 实验仪器
5.3 配合物的合成
5.3.1 配体及配合物合成路线
5.3.2 配体BTCP的合成与表征
5.3.3 Cis-[Ru(dmb)_2Cl_2]·2H_2O的合成
5.3.4 Cis-[Ru(bpy)_2Cl_2]·2H_2O的合成
5.3.5 Cis-[Ru(ttbpy)_2Cl_2]·2H_2O的合成
5.3.6 Cis-[Ru(phen)_2Cl_2]·2H_2O的合成
5.3.7 Cis-[Ru(dmp)_2Cl_2]·2H_2O的合成
5.3.8 [Ru(dmb)_2(BTCP)](PF_6)_2(1)的合成
5.3.9 [Ru(bpy)_2(BTCP)](PF_6)_2(2)的合成
5.3.10 [Ru(ttbpy)_2(BTCP)](PF_6)_2(3)的合成
5.3.11 [Ru(phen)_2(BTCP)](PF_6)_2(4)的合成
5.3.12 [Ru(dmp)_2(BTCP)](PF_6)_2(5)的合成
5.4 实验结果与讨论
5.4.1 体外细胞毒性
5.4.2 AO/EB染色实验
5.4.3 流式细胞仪凋亡检测
5.4.4 ROS检测
5.4.5 线粒体膜电位检测
5.4.6 细胞周期检测
5.4.7 细胞侵袭实验
5.4.8 Western Blot实验分析
5.5 小结
参考文献
总结
硕士期间发表学术论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]蛇床子素诱导HeLa细胞凋亡的作用机制研究[J]. 赵晓娟. 中国医药导报. 2016(12)
[2]蛇床子素抑制膀胱癌细胞生长和侵袭的机制[J]. 刘军,徐冉,赵晓昆. 中南大学学报(医学版). 2016(04)
[3]蛇床子素通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导K562细胞凋亡和增殖抑制[J]. 潘莉萍,郭静明,袁伟. 临床血液学杂志. 2016(02)
[4]抗肿瘤靶向药物研究现状[J]. 权修权,朴惠顺,康琳,尹学哲,高钟镐. 中国药理学通报. 2015(05)
[5]肿瘤侵袭转移机制研究进展[J]. 伊日贵,徐晓艳,李时荣. 中华实用诊断与治疗杂志. 2014(10)
[6]铂类药物化疗处方分析[J]. 杨康,武星. 中国医药导刊. 2014(09)
[7]中国癌症流行病学与防治研究现状[J]. 曾红梅,陈万青. 化学进展. 2013(09)
[8]蛇床子素药理作用及其相关机制研究进展[J]. 张晓平,陈新梅,崔清华,田景振. 中国执业药师. 2013(11)
[9]小分子铱配合物及其电致发光[J]. 廖章金,朱彤珺,密保秀,高志强,范曲立,黄维. 化学进展. 2011(08)
[10]蛇床子化学及药理研究进展[J]. 汪文来,于智敏,鞠大宏,张立石,王震,杨立新,赵红霞. 中国中医基础医学杂志. 2011(06)
硕士论文
[1]吴茱萸碱诱导人肝癌细胞HepG2细胞周期阻滞机制研究[D]. 刘溪.哈尔滨商业大学 2012
本文编号：3489654
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：104 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 蛇床子素及钌,铱金属配合物的抗肿瘤研究进展
1.2.1 蛇床子素的抗肿瘤活性研究进展
1.2.2 钌金属配合物的抗肿瘤活性研究进展
1.2.3 铱金属配合物的抗肿瘤活性研究进展
1.3 蛇床子素及钌,铱金属配合物的抗肿瘤研究方法
1.3.1 细胞凋亡的含义
1.3.2 体外细胞毒性实验
1.3.3 细胞凋亡形态学变化检测
1.3.4 细胞内吞和定位检测
1.3.5 Annexin-V/PI双染法
1.3.6 JC-1检测线粒体膜电位
1.3.7 DCFH-DA检测ROS(活性氧)
1.3.8 Flow Cytometry检测细胞周期
1.3.9 单细胞凝胶电泳(SCGE)
1.3.10 Western blot免疫印迹法
1.3.11 细胞侵袭实验
1.3.12 自噬
1.4 选题意义及研究展望
参考文献
第二章 蛇床子素的体外抗肿瘤活性研究
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 实验试剂
2.2.2 实验仪器
2.3 Osthole抗肿瘤活性研究
2.3.1 常用溶液的配置
2.3.2 细胞培养
2.3.3 细胞毒性实验
2.3.4 AO/EB双荧光染色法
2.3.5 流式细胞仪检测细胞凋亡
2.3.6 单细胞凝胶电泳实验
2.3.7 内吞实验
2.3.8 ROS的检测
2.3.9 线粒体膜电位检测
2.3.10 细胞周期的测定
2.3.11 白噬实验
2.3.12 Transwell侵袭实验
2.3.13 免疫印迹实验(Western Blot)
2.4 实验结果与讨论
2.4.1 体外细胞毒性
2.4.2 AO/EB染色
2.4.3 流式检测细胞凋亡
2.4.4 彗星电泳结果分析
2.4.5 细胞内吞实验
2.4.6 线粒体膜电位结果分析
2.4.7 活性氧含量分析
2.4.8 Western Blot结果
2.4.9 流式细胞周期结果分析
2.4.10 自噬AO染色及LC3蛋白表达
2.4.11 transwell侵袭实验结果分析
2.5 小结
参考文献
第三章 具有抗肿瘤活性铱(Ⅲ)配合物合成及其机制研究
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 实验试剂
3.2.2 实验仪器
3.3 配合物的合成
3.3.1 配体及配合物合成路线
3.3.2 1,10-邻菲罗啉-5,6-二酮的合成
3.3.3 配体BTCP的合成与表征
3.3.4 Cis-[Ir(ppy)_2Cl_2]_2的合成
3.3.5 [Ir(ppy)_2(BTCP)]PF_6(Ir-1)的合成
3.4 配合物抗肿瘤活性的检测方法
3.4.1 Hochest 33258荧光染色法
3.4.2 自噬实验
3.5 实验结果与讨论
3.5.1 体外细胞毒性
3.5.2 AO/EB和Hoechst 3325染色结果分析
3.5.3 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡
3.5.4 内吞实验
3.5.5 DNA损伤实验结果
3.5.6 线粒体膜电位检测及线粒体定位
3.5.7 ROS检测结果
3.5.8 Western Blot结果
3.5.9 细胞周期检测
3.5.10 自噬检测结果
3.5.11 Transwell侵袭实验
3.6 小结
参考文献
第四章 具有光活性的铱(Ⅲ)配合物的合成及其抗肿瘤活性研究
4.1 引言
4.2 实验材料
4.2.1 实验试剂
4.2.2 实验仪器
4.3 配合物的合成
4.3.1 配体及配合物合成路线
4.3.2 配体FBPIP的合成与表征
4.3.3 [Ir(ppy)_2(FBPIP)]PF_6(Ir-1)的合成
4.4 配合物抗肿瘤活性的检测方法
4.5 实验结果与讨论
4.5.1 体外细胞毒性
4.5.2 细胞凋亡检测
4.5.3 ROS结果分析
4.5.4 线粒体膜电位结果分析
4.5.5 细胞侵袭实验
4.5.6 细胞自噬检测结果
4.5.7 细胞周期检测
4.5.8 凋亡蛋白表达
4.6 小结
参考文献
第五章 多吡啶钌(Ⅱ)配合物合成及其抗肿瘤活性研究
5.1 引言
5.2 实验材料
5.2.1 实验试剂
5.2.2 实验仪器
5.3 配合物的合成
5.3.1 配体及配合物合成路线
5.3.2 配体BTCP的合成与表征
5.3.3 Cis-[Ru(dmb)_2Cl_2]·2H_2O的合成
5.3.4 Cis-[Ru(bpy)_2Cl_2]·2H_2O的合成
5.3.5 Cis-[Ru(ttbpy)_2Cl_2]·2H_2O的合成
5.3.6 Cis-[Ru(phen)_2Cl_2]·2H_2O的合成
5.3.7 Cis-[Ru(dmp)_2Cl_2]·2H_2O的合成
5.3.8 [Ru(dmb)_2(BTCP)](PF_6)_2(1)的合成
5.3.9 [Ru(bpy)_2(BTCP)](PF_6)_2(2)的合成
5.3.10 [Ru(ttbpy)_2(BTCP)](PF_6)_2(3)的合成
5.3.11 [Ru(phen)_2(BTCP)](PF_6)_2(4)的合成
5.3.12 [Ru(dmp)_2(BTCP)](PF_6)_2(5)的合成
5.4 实验结果与讨论
5.4.1 体外细胞毒性
5.4.2 AO/EB染色实验
5.4.3 流式细胞仪凋亡检测
5.4.4 ROS检测
5.4.5 线粒体膜电位检测
5.4.6 细胞周期检测
5.4.7 细胞侵袭实验
5.4.8 Western Blot实验分析
5.5 小结
参考文献
总结
硕士期间发表学术论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]蛇床子素诱导HeLa细胞凋亡的作用机制研究[J]. 赵晓娟. 中国医药导报. 2016(12)
[2]蛇床子素抑制膀胱癌细胞生长和侵袭的机制[J]. 刘军,徐冉,赵晓昆. 中南大学学报(医学版). 2016(04)
[3]蛇床子素通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导K562细胞凋亡和增殖抑制[J]. 潘莉萍,郭静明,袁伟. 临床血液学杂志. 2016(02)
[4]抗肿瘤靶向药物研究现状[J]. 权修权,朴惠顺,康琳,尹学哲,高钟镐. 中国药理学通报. 2015(05)
[5]肿瘤侵袭转移机制研究进展[J]. 伊日贵,徐晓艳,李时荣. 中华实用诊断与治疗杂志. 2014(10)
[6]铂类药物化疗处方分析[J]. 杨康,武星. 中国医药导刊. 2014(09)
[7]中国癌症流行病学与防治研究现状[J]. 曾红梅,陈万青. 化学进展. 2013(09)
[8]蛇床子素药理作用及其相关机制研究进展[J]. 张晓平,陈新梅,崔清华,田景振. 中国执业药师. 2013(11)
[9]小分子铱配合物及其电致发光[J]. 廖章金,朱彤珺,密保秀,高志强,范曲立,黄维. 化学进展. 2011(08)
[10]蛇床子化学及药理研究进展[J]. 汪文来,于智敏,鞠大宏,张立石,王震,杨立新,赵红霞. 中国中医基础医学杂志. 2011(06)
硕士论文
[1]吴茱萸碱诱导人肝癌细胞HepG2细胞周期阻滞机制研究[D]. 刘溪.哈尔滨商业大学 2012
本文编号：3489654
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3489654.html
