解毒益智方对阿尔茨海默病转基因线虫神经损伤影响的研究

发布时间：2021-12-10 16:30

　　目的:通过解毒益智方作用于阿尔茨海默病转基因线虫的研究,观察线虫的存活率,瘫痪率及相关基因表达量的变化,以明探讨解毒益智方对线虫神经损伤的作用机制。为药物进入临床提供实验依据。方法:实验所用的解毒益智方进行水提取制成冻干粉以备用,实验选用转基因Aβ1-42型CL4176秀丽隐杆线虫作为实验动物模型,经同期化处理随机分为模型组（0mg/L）、低剂量药物组（25 mg/L）、中剂量药物组（50 mg/L）、高剂量药物组（100mg/L）。寿命实验每组50条线虫,每24小时对线虫死亡数量进行计数,根据线虫非死亡数量绘制图表,并对四组线虫进行平均寿命、最大寿命进行分析。Aβ引起神经损伤实验测定（瘫痪率实验）每组30条线虫,每2小时进行观察线虫瘫痪及死亡数量,根据线虫非瘫痪数量绘制图表,进行数据分析。选取模型组与中剂量组线虫,每组100条,将同期化的线虫在16℃培养48h后转移至25℃进行诱导,诱导48h后,分别提取线虫体内的总mRNA,之后进行反转录合成cDNA,最后进行实时荧光定量PCR来检测TNFAIP1 homolog（F22E5.6、ZC239.12）,HSP16.2（Y46H3A.D... 

【文章来源】：长春中医药大学吉林省

【文章页数】：39 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

所示不同浓度解毒益智方对线虫寿命的影响

.2 解毒益智方对线虫瘫痪率影响选用同期化 48h 的 CL4176 线虫转移到含有高中低浓度的解毒益智方提取物的培养中，放置于 25℃下进行培养。观察线虫瘫痪情况，每两小时进行一次测定。线虫只部可以进行摆动记为瘫痪。实验结果如下图所示：如图 2 所示,行为学实验表明解毒益智方能够延缓和改善线虫瘫痪。在经过 40h-7间，药物组与模型组非瘫痪率存在明显差异，其中低剂量（25mg/L）药物组个时间瘫痪率均高于模型组，其中 76h 时二组线虫非瘫痪率差别最大，低剂量药物组为3.33%，模型组为 40%。中剂量（50mg/L）和高剂量（100mg/L）药物组非瘫痪率均低型组。由此可推断，解毒益智方的延缓瘫痪并不呈浓度依赖型，低剂量（25mg/L）组可作为其给药的理想浓度。高浓度解毒益智方会降低正向保护效应。

据图 3 所示，结果表明解毒益智方提高了线虫 TNFAIP1 homolog（F22E5.6、ZC239.12），HSP16.2（Y46H3A.D），HSP16.41（Y46H3A.E）基因的转录水平，这表明解毒益智方可以通过增加体内 TNFAIP1，HSP16.2，HSP16.41 等相关基因，进而起到神经保护作用及延缓线虫衰老的作用。

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3532988