清金化痰汤通过P38MAPK/NF-κB信号通路改善大鼠急性气道炎症的作用和机制

发布时间：2021-12-15 17:44

　　【目的】观察清金化痰汤治疗急性气道炎症模型大鼠气道炎症性损伤和黏液高分泌的作用。通过观察不同时点急性气道炎症和粘液高分泌状态的变化,ELISA法检测急性气道炎症相关细胞因子及黏液分泌标志物黏蛋白的表达情况,运用免疫组化、Western blot检测急性炎症通路相关蛋白及黏蛋白的表达,分析清金化痰汤抑制急性气道炎症及黏液高分泌的可能信号机制,揭示了P38MAPK/NF-κB信号通路在调控大鼠急性气道炎症及抑制其黏液高分泌状态中的重要作用。这将进一步阐明清金化痰汤在治疗急性气道炎症性疾病中的应用价值及其作用机理,为清金化痰汤的临床应用提供实验依据,进而深入论证将“清肺化痰”法作为急性气道炎症性疾病主要治疗方法的可行性和重要性,为传统中医药走向世界奠定基础。【方法】1.健康雄性SD大鼠96只,随机分为6组:空白组（A组）、模型组（B组）、清金化痰汤高剂量组（C组）、清金化痰汤中剂量组（D组）、清金化痰汤低剂量组（E组）、地塞米松组（F组）,每组16只。除空白组外,其余各组均用LPS气道滴入建立急性气道炎症大鼠模型,空白组则滴入等量生理盐水。2.由黄芩、栀子、桔梗、麦门冬、浙贝母、橘红等十一味...

【文章来源】： 成都中医药大学四川省

【文章页数】：119 页

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词表
引言
第一部分 材料与方法
    1.实验动物
    2.实验药物
    3.主要试剂、仪器及溶液配制
        3.1 主要试剂
        3.2 主要仪器
        3.3 溶液配制
        3.4 其它耗材
    4.实验动物分组
    5.急性气道炎症模型的建立
        5.1 造模方法
        5.2 模型成功标准
    6.药物制备
    7.给药方法
    8.标本采集与处理
    9.一般情况观察方法
    10.BALF白细胞计数与分类
        10.1 实验试剂
        10.2 实验材料
        10.3 白细胞计数方法
        10.4 白细胞分类计数
            10.4.1 步骤
    11.病理学检测
        11.1 实验试剂
        11.2 实验仪器
        11.3 实验目的
        11.4 步骤
        11.5 炎症评分标准
    12.ELISA法
        12.1 实验原理
        12.2 实验试剂
        12.3 实验仪器
        12.4 实验目的
        12.5 试剂盒组成
        12.6 步骤
    13.免疫组化S-P法
        13.1 实验原理
        13.2 实验目的
        13.3 实验试剂
        13.4 实验仪器
        13.5 实验步骤
    14.Western blot
        14.1 实验原理
        14.2 实验目的
        14.3 实验试剂
        14.4 实验仪器
        14.5 实验步骤
            14.5.1 样本总蛋白的提取
            14.5.2 样品总蛋白浓度测定(BCA法)
            14.5.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
            14.5.4 转印
            14.5.5 封闭
            14.5.6 显影,定影
    15.统计方法
    16.技术路线
第二部分 结果
    1.一般情况观察
        1.1 一般情况
        1.2 体重
        1.3 死亡情况
    2.清金化痰汤对BALF中白细胞总数和细胞分类的影响
    3.清金化痰汤对急性气道炎症大鼠气管和肺组织病理改变的影响
        3.1 气管和肺组织病理改变
        3.2 清金化痰汤对炎症积分水平的影响
    4.清金化痰汤对BALF中相关细胞因子水平的影响
        4.1 清金化痰汤对IL-1β水平的影响
        4.2 清金化痰汤对IL-8水平的影响
        4.3 清金化痰汤对TNF-水平的影响
    5.清金化痰汤对BALF中黏蛋白MUC5AC水平的影响
    6.S-P法检测清金化痰汤对肺组织中P38MAPK、MUC5AC的影响
        6.1 清金化痰汤对P38MAPK的影响
        6.2 清金化痰汤对MUC5AC的影响
    7.WesternBlot检测清金化痰汤对肺组织P38MAPK、IκBα、P65的影响
        7.1 清金化痰汤对肺组织中P38MAPK的影响
        7.2 清金化痰汤对肺组织IκBα表达的影响
        7.3 清金化痰汤对肺组织NF-κBP65表达的影响
    8.相关性分析
第三部分 讨论
    1.中医对急性气道炎症性疾病的认识
        1.1 中医古籍对急性气道炎症性疾病病名的记载
        1.2 中医对急性气道炎症性疾病病因病机的认识
            1.2.1 肺气失宣
            1.2.2 肺失肃降,肺气上逆
            1.2.3 痰浊壅肺,气机郁滞
        1.3 急性气道炎症性疾病的相关中医证候分型
        1.4 急性气道炎症性疾病的中医药相关治疗
        1.5 中医对急性气道炎症性疾病的治疗思路
    2.现代医学对急性气道炎症性疾病的认识
        2.1 气道的结构和生理特点
        2.2 气道的防御功能
        2.3 病因和病理特点
        2.4 发病机制
            2.4.1 中性粒细胞
            2.4.2 巨噬细胞
            2.4.3 上皮细胞
            2.4.4 黏附分子
            2.4.5 细胞因子
        2.5 诊断与治疗
    3.气道炎症与黏液分泌
    4.气道炎症与信号通路
        4.1 P38MAPK信号通路
        4.2 NF-κB信号通路
        4.3 JAK-STAT信号通路
    5.急性气道炎症模型的建立
    6.清金化痰汤治疗后能明显抑制急性气道炎症反应
    7.清金化痰汤下调肺组织P38MAPK/NF-κB信号通路,以抑制气道炎症反应
    8.清金化痰汤下调肺组织P38MAPK/NF-κB信号通路,以抑制气道黏液高分泌
第四部分 结论
参考文献
附录
    文献综述 气道炎症性疾病发病机制的研究概况
        参考文献
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]清金化痰汤治疗AECOPD痰热壅肺证患者的临床观察 [J]. 张圣浛,邓志刚,张素华.  中国药房. 2016(35)
[2]清金化痰汤联合阿奇霉素治疗小儿支原体感染30例临床观察 [J]. 马素清.  临床医学研究与实践. 2016(03)
[3]抗生素序贯清金化痰汤联合治疗重症肺炎患者的疗效评价 [J]. 刘克琴,沈建平,倪海滨,黄小菲,秦凤霞.  中医临床研究. 2015(04)
[4]302例慢性阻塞性肺疾病急性加重期中医证候分型 [J]. 王胜,叶海勇,陈悦,季红燕,朱春冬,任薇,李春颖,周群.  北京中医药大学学报. 2015(01)
[5]加味清金化痰汤联合西药治疗肺炎30例观察 [J]. 陈范戈.  实用中医药杂志. 2014(11)
[6]清金化痰汤治疗痰热郁肺型咳嗽109例中药药敏试验研究 [J]. 张清奇,张金飞,张建勇.  浙江中医杂志. 2014(10)
[7]六味补气胶囊对COPD肺气虚证模型STAT4,STAT6蛋白表达影响 [J]. 王成阳,李泽庚,刘向国,彭青和,武松,张凯,吕磊.  中国实验方剂学杂志. 2013(21)
[8]Inhibition of pacemaker activity in interstitial cells of Cajal by LPS via NF-κB and MAP kinase [J]. Dong Chuan Zuo,Seok Choi,Pawan Kumar Shahi,Man Yoo Kim,Chan Guk Park,Young Dae Kim,Jun Lee,In Yeoup Chang,Insuk So,Jae Yeoul Jun.  World Journal of Gastroenterology. 2013(08)
[9]卫生部全国细菌耐药监测网2011年痰标本来源细菌耐药监测 [J]. 李湘燕,吕媛.  中国临床药理学杂志. 2012(12)
[10]清肺化痰汤配合西药对慢性阻塞性肺疾病氧化/抗氧化失衡的影响 [J]. 陈斯宁,韦思尊,谭玉萍,杨益宝,冯原,潘丽凤.  四川中医. 2012(07)



本文编号：3536868