丹参总酚酸促进PC12细胞分化及其分子机制研究

发布时间：2021-12-16 05:23

　　目的证明丹参（Salvia miltiorrhiza Bge.）主要成分丹参总酚酸（Total salvianolic acids,Tsa）具有诱导大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞PC12细胞（pheochromocytoma cells,PC12）分化的作用,在此基础上进一步探讨细胞外信号调节激酶（extracellular signal regulated kinase,ERK）及相关蛋白与Tsa诱导PC12细胞分化之间的关系。方法（1）运用噻唑蓝溴盐检测法（MTT assay,MTT）检测0.01μg·L^-1、0.1μg·L^-1、1μg·L^-1浓度的Tsa对PC12细胞是否具有药物毒性,以此来保证后续实验正常进行。（2）检测0.01μg·L^-1、0.1μg·L^-1、1μg·L^-1的Tsa对氧糖剥夺损伤（oxygen and glucose deprivation,OGD）损伤后的PC12细胞有无修复作用,进一步证明Tsa对PC12细胞具有增殖及保护作用。（3）体... 

【文章来源】：山西省中医药研究院山西省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
abstract
前言
第一部分 不同浓度Tsa对PC12细胞活力的影响
    1.材料和仪器
        1.1 主要试剂
        1.2 主要仪器
    2.实验方法
        2.1 细胞培养及分组
        2.2 实验细胞分组
        2.3 细胞活性检测
        2.4 数据处理
    3.实验结果
    4.讨论
    5.结论
第二部分 不同浓度Tsa对OGD损伤后PC12细胞存活率的影响
    1.材料和仪器
        1.1 主要试剂
        1.2 主要仪器
    2.实验方法
        2.1 细胞培养及分组
        2.2 OGD模型的建立及测定
        2.3 细胞活性检测
        2.4 数据处理
    3.实验结果
        3.1 OGD模型的检测
        3.2 不同浓度Tsa对OGD模型的修复作用
    4.讨论
    5.结论
第三部分 不同浓度Tsa诱导PC12细胞分化机制的初步研究
    1.材料和仪器
        1.1 主要试剂
        1.2 主要仪器
    2.实验方法
        2.1 细胞培养及分组
        2.2 Westernbloting检测MAP-2、p-ERK1/2、ERK1/2、p-MEK1/2及MEK1/2蛋白表达
        2.3 Westernbloting检测MEK抑制剂U0126对p-ERK1/2及ERK1/2蛋白表达的影响
        2.4 数据处理
    3.实验结果
        3.1 Tsa对PC12细胞分化的影响
        3.2 Westernbloting检测MAP-2蛋白表达结果
        3.3 Westernbloting检测p-ERK1/2及ERK1/2蛋白表达结果
        3.4 Westernbloting检测p-MEK1/2及MEK1/2蛋白表达结果
        3.5 MEK抑制剂U0126对Tsa诱导p-ERK1/2及ERK1/2蛋白的影响
    4.讨论
    5.结论
第四部分 Tsa1μg·L~(-1)诱导PC12细胞分化机制的研究
    1.材料和仪器
        1.1 主要试剂
        1.2 主要仪器
    2.实验方法
        2.1 Westernbloting检测p-ERK1/2、ERK1/2、p-MEK1/2及MEK1/2及Ras蛋白表达
        2.2 细胞培养及分组
        2.3 Tsa1μg·L~(-1)处理后PC12细胞免疫细胞化学染色
        2.4 Westernbloting检测MEK抑制剂U0126及PD184352对ERK1/2蛋白表达的影响
        2.5 MEK抑制剂U0126及PD184352对Tsa处理后PC12细胞分化的影响
        2.6 数据处理
    3.实验结果
        3.1 不同时间点NGF处理PC12细胞后p-ERK1/2及ERK1/2的表达
        3.2 不同时间点Tsa1μg·L~(-1)处理PC12细胞后p-ERK1/2及ERK1/2的表达
        3.3 不同时间点Tsa1μg·L~(-1)处理PC12细胞的分化情况
        3.4 不同时间点Tsa1μg·L~(-1)处理PC12细胞后p-MEK1/2及MEK1/2的表达
        3.5 不同时间点Tsa1μg·L~(-1)处理PC12细胞后Ras蛋白的表达
        3.6 MEK抑制剂U0126及PD184352对Tsa诱导p-ERK1/2及ERK1/2蛋白的影响
        3.7 MEK抑制剂U0126及PD184352对Tsa诱导PC12细胞分化的影响
    4.讨论
    5.结论
结语
参考文献
综述
    参考文献
附录1 英文缩略词
附录2 Ras/MEK1/2/ERK1/2信号通路图
附录3 攻读学位期间发表论文情况
致谢



本文编号：3537565