吉马酮调控miR-9a-5p/PTEN表达对脂多糖致心肌细胞氧化应激损伤和细胞凋亡的影响

发布时间：2021-12-17 03:49

　　目的探讨吉马酮调控miR-9a-5p/第10染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）轴对脂多糖（LPS）致心肌细胞氧化应激损伤和细胞凋亡的影响。方法实验分为空白组（正常培养的心肌细胞）,模型组(10 mg·L^-1的LPS处理心肌细胞6 h),低、中、高3个剂量实验组(50,100和200μmol·L^-1吉马酮处理模型组细胞),A组（转染miRNA模拟物阴性对照后,进行LPS处理）,B组（转染miR-9a-5p模拟物后,进行LPS处理）,C组(转染miRNA抑制物阴性对照后,进行LPS和200μmol·L^-1吉马酮处理),D组(转染miR-9a-5p抑制物后,进行LPS和200μmol·L^-1吉马酮处理)。用试剂盒检测细胞内丙二醛（MDA）含量,用流式细胞术检测细胞凋亡,用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印记法分别检测miR-9a-5p和PTEN mRNA水平和蛋白表达。用双荧光素酶报告基因实验和Western Blotting验证miR-9a-5p和PTEN的靶向调控关系。结果空白组、模型组... 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020,36(12)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 细胞培养
        2.2 细胞分组与给药方法[4]
        2.3 用流式细胞术检测细胞凋亡[5]
        2.4 用试剂盒检测细胞内MDA含量及SOD和GSH-Px活性[6]
        2.5 用Western Blotting法检测Bcl-2、Bax和PTEN蛋白表达情况[6]
        2.6 用逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测miR-9a-5p和PTEN mRNA的表达水平[5]
        2.7 双荧光素酶报告基因实验[5]
    3 统计学处理
结 果
    1 吉马酮对LPS致心肌细胞氧化损伤和凋亡的影响
    2 吉马酮对LPS致心肌细胞中miR-9a-5p、Bcl-2、Bax和PTEN表达的影响
    3 miR-9a-5p靶向调控PTEN的表达
    4 miR-9a-5p联合吉马酮对LPS致心肌细胞氧化损伤和凋亡的影响
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]PTEN对缺氧复氧心肌H9c2细胞凋亡、氧化损伤及免疫炎症因子水平的影响[J]. 燕林贞,燕钦栋,张顺祥,丁小青,李康.  中国病理生理杂志. 2018(11)
[2]MicroRNA-133b-5p通过靶向调控Fas基因影响H9c2心肌细胞凋亡[J]. 程洁,何淑芳,韩正怡,朱海娟,张野.  安徽医科大学学报. 2016(02)
[3]黄芪皂苷IV对LPS诱导大鼠心肌损伤的保护作用及机制[J]. 覃华,张琰,杜小燕,韩艳,王茹.  现代生物医学进展. 2013(08)
[4]川芎嗪对LPS致心肌细胞损伤的影响及机制研究[J]. 刘丹,尹东,曾姝,何明.  中国药理学通报. 2012(11)
[5]参附注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤PTEN和PI3K表达的影响[J]. 纪勇,陈国强,黄斌,吴松,沈凯,虞桂平,王晓臣,陈亦江.  中华临床医师杂志(电子版). 2011(10)



本文编号：3539354