抵挡汤在高糖、高糖波动环境下对人脐静脉血管内皮细胞能量代谢相关因子表达的影响
发布时间：2022-01-05 10:50
[目的]通过观察抵挡汤在高糖、高糖波动环境下对人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）共激活因子1α（PGC-1α）、内皮细胞型一氧化氮合酶（eNOS）、半胱氨酸天门冬氨酸特异性蛋白酶3（caspase-3）表达的影响,探讨抵挡汤对血管内皮细胞保护作用。[方法]模拟高糖、高糖波动环境培养HUVECs并分别进行抵挡汤、辛伐他汀、二甲双胍干预,各组培养48 h后,蛋白免疫印迹（Western Blot）检测p-AMPK、PGC-1α、eNOS蛋白表达,逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测caspase-3基因含量,流式细胞仪检测细胞凋亡率。[结果]高糖组、高糖波动组p-AMPK、PGC-1α、eNOS表达均显著下降,且以高糖波动组最低。抵挡汤干预后p-AMPK、PGC-1α、eNOS表达均显著上调,与二甲双胍干预无差异。高糖组、高糖波动组caspase-3 mRNA表达均明显升高,抵挡汤干预后均明显降低,且与二甲双胍干预组无差异。[结论]抵挡汤在高糖、高糖波动环境下均可磷酸化AMPK,上调PGC-1α、e...
【文章来源】：天津中医药. 2020,37(07)
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
Western blot检测各组p-AMPK、PGC-1α、eNOS蛋白表达情况
与NG相比，HG组和FG组均可促进细胞凋亡（P<0.05），且以FG组凋亡率较高（P<0.05）。高糖各干预组中，HG-D组细胞凋亡率低于HG、HG-S组（P<0.05），且与HG-M组比较无统计学差异（P>0.05）。高糖波动各干预组中，FG-D组细胞凋亡率低于FD、FG-S组（P<0.05），且与FG-M组比较无统计学差异（P>0.05）。提示抵挡汤干预可削弱高糖、高糖波动对细胞的促凋亡作用，其抑制内皮细胞凋亡作用优于辛伐他汀，与盐酸二甲双胍比较无统计学差异。见图3。3 讨论
糖尿病大血管病变作为糖尿病慢性并发症之一，严重影响患者的生存质量，是致死、致残的主要因素。血管内皮是由血管内皮细胞通过细胞间的连接而形成的单细胞层屏障，糖尿病大血管病变中，内皮细胞是高血糖损伤的重要靶点，高血糖可导致内皮细胞损伤和凋亡，血管内皮完整性和血管功能破坏。研究显示，与无大血管并发症的糖尿病患者相比，合并大血管病变的糖尿病患者的血糖标准差、平均血糖波动幅度、最大血糖波动幅度均明显增高[10]。高糖波动较持续性高糖更易导致血管损伤，对其机制研究多涉及氧化应激、细胞凋亡、炎症、止血凝血等[11-13]。本研究显示，相比与持续性高糖环境，高糖波动环境更能损伤内皮细胞，促进其凋亡，与既往研究结果一致。线粒体的结构和功能变化是细胞凋亡的枢纽环节，过量的活性氧簇（ROS）能引发内源性细胞凋亡途径[14-15]。线粒体作为细胞能量代谢的场所，是细胞内三磷酸腺苷（ATP）的主要生产中心。AMPK作为细胞能量代谢的主要调控者，其活性受一磷酸腺苷（AMP）/ATP比值调控，线粒体抑制、营养匮乏和运动等多种生理条件都能激活AMPK。越来越多的证据表明，AMPK是合成线粒体、维持线粒体稳态的关键调节因子，通过调节下游信号通路来维持线粒体的最佳状态[16]。AMPK还可通过促进游离脂肪酸（FFA）的氧化从而拮抗FFA造成的内皮细胞毒性，进而保护血管内皮[17]。PGC-1α是AMPK下游效应物，在能量压力下，AMPK可激活PGC-1α，通过与PPARγ或雌激素相关受体（ERRs）相互作用激活线粒体生物合成的基因，这一途径被认为可能是修复和维持血管内皮细胞线粒体功能的一项主要机制[18]。eNOS广泛存在于内皮细胞中，其激活可改善内皮和血管功能，可通过调控内皮源性一氧化氮产生的关键酶，促进细胞增殖、黏附、迁移和血管新生[19]，另外在循环系统中eNOS是AMPK的一个重要靶标。Caspase家族在细胞凋亡转导通路尤其是线粒体途径中起到至关重要的调控作用，其中caspase-3在凋亡过程中占据核心地位，被称为“死亡执行蛋白酶”，其激活标志着细胞凋亡进入不可逆阶段[20-21]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2型糖尿病合并血管并发症患者纤维蛋白原水平的变化及其与血糖波动的相关性研究[J]. 李云程,应长江,李伟. 中国糖尿病杂志. 2018(10)
[2]血糖波动与糖尿病大血管并发症的相关性[J]. 段建芳,王艳妮,金凤钟,彭燕,徐先桔,王晓明,苏慧. 心脏杂志. 2018(02)
[3]抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠肿瘤坏死因子-α与血管细胞黏附分子-1表达的影响[J]. 常柏,李巧芬,常宝成,潘从清,孟东,陈莉明,李春深. 中国中医药信息杂志. 2012(10)
[4]抵挡汤对2型糖尿病患者血管内皮功能影响的临床研究[J]. 常柏,潘从清,孟东,陈莉明,常宝成. 天津中医药. 2011(06)
本文编号：3570218
【文章来源】：天津中医药. 2020,37(07)
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
Western blot检测各组p-AMPK、PGC-1α、eNOS蛋白表达情况
与NG相比，HG组和FG组均可促进细胞凋亡（P<0.05），且以FG组凋亡率较高（P<0.05）。高糖各干预组中，HG-D组细胞凋亡率低于HG、HG-S组（P<0.05），且与HG-M组比较无统计学差异（P>0.05）。高糖波动各干预组中，FG-D组细胞凋亡率低于FD、FG-S组（P<0.05），且与FG-M组比较无统计学差异（P>0.05）。提示抵挡汤干预可削弱高糖、高糖波动对细胞的促凋亡作用，其抑制内皮细胞凋亡作用优于辛伐他汀，与盐酸二甲双胍比较无统计学差异。见图3。3 讨论
糖尿病大血管病变作为糖尿病慢性并发症之一，严重影响患者的生存质量，是致死、致残的主要因素。血管内皮是由血管内皮细胞通过细胞间的连接而形成的单细胞层屏障，糖尿病大血管病变中，内皮细胞是高血糖损伤的重要靶点，高血糖可导致内皮细胞损伤和凋亡，血管内皮完整性和血管功能破坏。研究显示，与无大血管并发症的糖尿病患者相比，合并大血管病变的糖尿病患者的血糖标准差、平均血糖波动幅度、最大血糖波动幅度均明显增高[10]。高糖波动较持续性高糖更易导致血管损伤，对其机制研究多涉及氧化应激、细胞凋亡、炎症、止血凝血等[11-13]。本研究显示，相比与持续性高糖环境，高糖波动环境更能损伤内皮细胞，促进其凋亡，与既往研究结果一致。线粒体的结构和功能变化是细胞凋亡的枢纽环节，过量的活性氧簇（ROS）能引发内源性细胞凋亡途径[14-15]。线粒体作为细胞能量代谢的场所，是细胞内三磷酸腺苷（ATP）的主要生产中心。AMPK作为细胞能量代谢的主要调控者，其活性受一磷酸腺苷（AMP）/ATP比值调控，线粒体抑制、营养匮乏和运动等多种生理条件都能激活AMPK。越来越多的证据表明，AMPK是合成线粒体、维持线粒体稳态的关键调节因子，通过调节下游信号通路来维持线粒体的最佳状态[16]。AMPK还可通过促进游离脂肪酸（FFA）的氧化从而拮抗FFA造成的内皮细胞毒性，进而保护血管内皮[17]。PGC-1α是AMPK下游效应物，在能量压力下，AMPK可激活PGC-1α，通过与PPARγ或雌激素相关受体（ERRs）相互作用激活线粒体生物合成的基因，这一途径被认为可能是修复和维持血管内皮细胞线粒体功能的一项主要机制[18]。eNOS广泛存在于内皮细胞中，其激活可改善内皮和血管功能，可通过调控内皮源性一氧化氮产生的关键酶，促进细胞增殖、黏附、迁移和血管新生[19]，另外在循环系统中eNOS是AMPK的一个重要靶标。Caspase家族在细胞凋亡转导通路尤其是线粒体途径中起到至关重要的调控作用，其中caspase-3在凋亡过程中占据核心地位，被称为“死亡执行蛋白酶”，其激活标志着细胞凋亡进入不可逆阶段[20-21]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2型糖尿病合并血管并发症患者纤维蛋白原水平的变化及其与血糖波动的相关性研究[J]. 李云程,应长江,李伟. 中国糖尿病杂志. 2018(10)
[2]血糖波动与糖尿病大血管并发症的相关性[J]. 段建芳,王艳妮,金凤钟,彭燕,徐先桔,王晓明,苏慧. 心脏杂志. 2018(02)
[3]抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠肿瘤坏死因子-α与血管细胞黏附分子-1表达的影响[J]. 常柏,李巧芬,常宝成,潘从清,孟东,陈莉明,李春深. 中国中医药信息杂志. 2012(10)
[4]抵挡汤对2型糖尿病患者血管内皮功能影响的临床研究[J]. 常柏,潘从清,孟东,陈莉明,常宝成. 天津中医药. 2011(06)
本文编号：3570218
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