肾复康对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞HK-2纤维化模型的影响及其机制研究
发布时间：2022-01-07 22:25
目的:探讨肾复康含药血清对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导人肾小管上皮细胞株HK-2间质转化的影响及其分子机制。方法:以HK-2细胞作为研究对象,常规培养后将细胞进行如下分组及刺激处理:空白对照组、模型对照组（10 ng/ml TGF-β1刺激）、32 g/kg尿毒清30%含药血清组（30%尿毒清含药血清+TGF-β1刺激）、18.32 g/kg肾复康10%、30%含药血清组（10%或30%肾复康含药血清+TGF-β1刺激）。MTT法检测肾复康含药血清对HK-2细胞活力的影响;显微镜下观察各组细胞间形态学的差异;ELISA法检测各组细胞上清液中I型胶原（collagen I）和纤维连接蛋白（fibronectin）的水平;q-PCR法检测各组细胞内E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形纤维蛋白（Vimentin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和整联蛋白连接激酶（ILK）基因的表达水平;蛋白免疫印迹法检测Smad2/3总蛋白、核蛋白表达及其磷酸化水平;蛋白免疫印迹法检测下游的ILK蛋白表达水平。结果:肾复康含药血清对HK-2细胞的存活率无抑制作用;与空白对照组比较,模型对照...
【文章来源】：中药药理与临床. 2020,36(04)北大核心CSCD
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
肾复康对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞纤维化模型形态学改变的影响(倒置显微镜,×100)
与空白对照组比较,模型对照组Smad2/3的磷酸化水平及核内蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,尿毒清30%含药血清组和18.32 g/kg肾复康30%含药血清组Smad2/3的磷酸化水平及核内表达明显降低(P<0.01)。见图3和表5。表5 肾复康18.32 g/kg含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞纤维化模型Smad2/3磷酸化水平的影响 ( x ˉ ±s,n=6) 组别 含药血清浓度/(%) p-Smad2/3/t-Smad2/3 p-Smad2/3/Lamin B 空白对照 - 0.12±0.02** 0.14±0.03** TGF-β模型 - 0.38±0.08 0.41±0.12 尿毒清 32 0.18±0.04** 0.20±0.03** 肾复康 10 0.34±0.09 0.38±0.13 30 0.21±0.05** 0.24±0.08*
与空白对照组比较,模型对照组Vimentin、α-SMA和ILK的mRNA水平显著升高(P<0.01),而E-cadherin的mRNA水平显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,尿毒清30%含药血清组、18.32 g/kg肾复康10%、30%含药血清组,Vimentin、α-SMA和ILK的mRNA水平均明显下调(P<0.05或P<0.01),E-cadherin mRNA水平显著上调(P<0.01)。见图2,表3。表3 肾复康18.32 g/kg含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞纤维化模型E-cadherin、Vimentin、α-SMA和ILK的mRNA表达的影响 ( x ˉ ±s,n=6) 组别 含药血清浓度/(%) E-cadherin/ (2-ΔΔCt) Vimentin/ (2-ΔΔCt) α-SMA/ (2-ΔΔCt) ILK/(2-ΔΔCt) 空白对照 - 1.06±0.25** 0.92±0.17** 0.95±0.21** 1.11±0.30** TGF-β模型 - 0.34±0.07 2.31±0.39 1.97±0.26 2.45±0.43 尿毒清 32 0.93±0.24** 1.23±0.22** 1.19±0.16** 1.47±0.19** 肾复康 10 0.63±0.17** 1.57±0.36* 1.34±0.31* 1.86±0.38* 30 0.86±0.18** 1.31±0.32** 1.28±0.23** 1.62±0.35** 与模型对照组组比较*P<0.05(下同)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]尿毒清颗粒治疗慢性肾脏病的研究进展[J]. 陈丽梅,赵玉丹,王婷婷,黄贝贝,刘孝琴. 牡丹江医学院学报. 2019(06)
[2]肾复康对肾纤维化模型大鼠转化生长因子-β1、Smad2、Smad7表达的影响[J]. 刘劲松,林哲,郑燕姣. 世界中医药. 2018(12)
[3]肾纤维化中医病机与Wnt/β-catenin信号通路的关系[J]. 沈金峰,胡芳,黄伟,罗富里,晏子友. 中国中医基础医学杂志. 2018(11)
[4]肾复康对肾纤维化模型大鼠肾组织BMP-7表达的影响[J]. 刘劲松,钟颖,肖波飞,张晓白,黄上,林哲. 湖南中医杂志. 2018(02)
[5]肾复康方治疗慢性肾脏病2-4期脾肾亏虚、浊毒内蕴临床疗效观察[J]. 刘劲松,钟颖,肖波飞,张晓白. 中医临床研究. 2017(36)
[6]肾复宁颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏TGF-β1mRNA及细胞凋亡基因Fas/FasL表达的影响[J]. 苏衍进,徐军建. 中药药理与临床. 2017(02)
[7]肾复康治疗原发性膜性肾病的临床研究[J]. 刘劲松,周琳,荣光辉. 中国医药指南. 2016(04)
[8]益肾健脾降浊排毒法治疗慢性肾衰竭30例疗效观察[J]. 肖波飞,钟颖,张晓白,黄上,刘劲松. 湖南中医杂志. 2013(10)
[9]肾纤维化的中医机制及其干预靶点[J]. 钟建,史伟,吴金玉. 辽宁中医杂志. 2010(09)
[10]肾复康颗粒剂治疗原发性肾病综合征180例临床研究[J]. 肖德才,陈良春,宋杰,李顺祥,马赛,朱中骥,钟颖. 湖南中医药导报. 1998(05)
本文编号：3575380
【文章来源】：中药药理与临床. 2020,36(04)北大核心CSCD
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
肾复康对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞纤维化模型形态学改变的影响(倒置显微镜,×100)
与空白对照组比较,模型对照组Smad2/3的磷酸化水平及核内蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,尿毒清30%含药血清组和18.32 g/kg肾复康30%含药血清组Smad2/3的磷酸化水平及核内表达明显降低(P<0.01)。见图3和表5。表5 肾复康18.32 g/kg含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞纤维化模型Smad2/3磷酸化水平的影响 ( x ˉ ±s,n=6) 组别 含药血清浓度/(%) p-Smad2/3/t-Smad2/3 p-Smad2/3/Lamin B 空白对照 - 0.12±0.02** 0.14±0.03** TGF-β模型 - 0.38±0.08 0.41±0.12 尿毒清 32 0.18±0.04** 0.20±0.03** 肾复康 10 0.34±0.09 0.38±0.13 30 0.21±0.05** 0.24±0.08*
与空白对照组比较,模型对照组Vimentin、α-SMA和ILK的mRNA水平显著升高(P<0.01),而E-cadherin的mRNA水平显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,尿毒清30%含药血清组、18.32 g/kg肾复康10%、30%含药血清组,Vimentin、α-SMA和ILK的mRNA水平均明显下调(P<0.05或P<0.01),E-cadherin mRNA水平显著上调(P<0.01)。见图2,表3。表3 肾复康18.32 g/kg含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞纤维化模型E-cadherin、Vimentin、α-SMA和ILK的mRNA表达的影响 ( x ˉ ±s,n=6) 组别 含药血清浓度/(%) E-cadherin/ (2-ΔΔCt) Vimentin/ (2-ΔΔCt) α-SMA/ (2-ΔΔCt) ILK/(2-ΔΔCt) 空白对照 - 1.06±0.25** 0.92±0.17** 0.95±0.21** 1.11±0.30** TGF-β模型 - 0.34±0.07 2.31±0.39 1.97±0.26 2.45±0.43 尿毒清 32 0.93±0.24** 1.23±0.22** 1.19±0.16** 1.47±0.19** 肾复康 10 0.63±0.17** 1.57±0.36* 1.34±0.31* 1.86±0.38* 30 0.86±0.18** 1.31±0.32** 1.28±0.23** 1.62±0.35** 与模型对照组组比较*P<0.05(下同)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]尿毒清颗粒治疗慢性肾脏病的研究进展[J]. 陈丽梅,赵玉丹,王婷婷,黄贝贝,刘孝琴. 牡丹江医学院学报. 2019(06)
[2]肾复康对肾纤维化模型大鼠转化生长因子-β1、Smad2、Smad7表达的影响[J]. 刘劲松,林哲,郑燕姣. 世界中医药. 2018(12)
[3]肾纤维化中医病机与Wnt/β-catenin信号通路的关系[J]. 沈金峰,胡芳,黄伟,罗富里,晏子友. 中国中医基础医学杂志. 2018(11)
[4]肾复康对肾纤维化模型大鼠肾组织BMP-7表达的影响[J]. 刘劲松,钟颖,肖波飞,张晓白,黄上,林哲. 湖南中医杂志. 2018(02)
[5]肾复康方治疗慢性肾脏病2-4期脾肾亏虚、浊毒内蕴临床疗效观察[J]. 刘劲松,钟颖,肖波飞,张晓白. 中医临床研究. 2017(36)
[6]肾复宁颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏TGF-β1mRNA及细胞凋亡基因Fas/FasL表达的影响[J]. 苏衍进,徐军建. 中药药理与临床. 2017(02)
[7]肾复康治疗原发性膜性肾病的临床研究[J]. 刘劲松,周琳,荣光辉. 中国医药指南. 2016(04)
[8]益肾健脾降浊排毒法治疗慢性肾衰竭30例疗效观察[J]. 肖波飞,钟颖,张晓白,黄上,刘劲松. 湖南中医杂志. 2013(10)
[9]肾纤维化的中医机制及其干预靶点[J]. 钟建,史伟,吴金玉. 辽宁中医杂志. 2010(09)
[10]肾复康颗粒剂治疗原发性肾病综合征180例临床研究[J]. 肖德才,陈良春,宋杰,李顺祥,马赛,朱中骥,钟颖. 湖南中医药导报. 1998(05)
本文编号：3575380
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