氯化两面针碱对人口腔鳞癌耐药逆转及与PI3K/Akt/mTOR信号通路的相关研究
发布时间：2022-01-11 14:58
目的:本课题选用课题组前期筛选出的人口腔鳞癌耐药细胞株KB/ADM及其亲本细胞KB进行实验,研究氯化两面针碱（NC）对KB/ADM细胞的耐药逆转作用及NC对PI3K/Akt/mTOR信号通路中相关基因及关键蛋白表达的影响,探讨NC逆转作用是否与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。方法:（1）人口腔鳞癌多药耐药细胞的培养和鉴定:（1）MTT法测定KB/ADM及KB细胞对化疗药物的敏感性,配制阿霉素（ADM）、依托泊苷（VP-16）和长春新碱（VCR）各六个浓度组分别为200、100、50、25、10、5mg/L,计算细胞的IC50和耐药倍数。（2）Real-time PCR检测MDR1基因的表达;（3）流式细胞仪检测P-gp蛋白的表达。（2）NC逆转人口腔鳞癌多药耐药细胞耐药性的研究:（1）MTT法测定NC对KB/ADM的耐药逆转作用,实验分为KB空白对照组、KB+VP-16组、KB/ADM空白对照组、KB/ADM+VP-16组、KB/ADM+VP-16+VRP组、KB/ADM+VP-16+NC组,加药组每组设5个不同浓度（200、100、50、25、10mg/L）,计算细胞的IC5...
【文章来源】：广西中医药大学广西壮族自治区
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
KB/ADM及KB细胞MDR1基因的相对表达(xs,n=3)
图 2 KB/ADM 及 KB 细胞 P-gp 蛋白的相对表达Figure2 The P-gp expression of KB/ADM and KB cells4 讨论在肿瘤 MDR 的多种机制中，肿瘤细胞 P-gp 的过度表达被认为是化疗耐药最重要、也是研究最深入的耐药机制[26]。在一般敏感细胞通常会检测不到 P-gp，而 P-gp 在肿瘤 MDR 细胞株中却有高水平的，就是因为持续高表达进而使细胞内化疗药物排出，从而起到降低细内化疗药物浓度的作用，P-gp 使细胞内的药物浓度始终维持在较低平，造成肿瘤多药耐药[30]。采用 MDR 肿瘤细胞进行研究之前，应当对所选耐药细胞株的耐药性进行鉴别，这些前期准备对后续实验的可KB KB/ADM
(13.15±1.53)% 、 (15.18±1.41)% 、 (13.84±2.58)% 和 (12.59±2.28)% ， 与KB/ADM 空白组差异无统计学意义。在划痕 48h 后，KB 空白组、KB25mg/LVP-16 组及 KB100mg/LVP-16 组的迁移率分别为(30.51±0.88)%、(40.89±0.05)%和(23.17±1.49)%，与 KB 空白组比较差异有统计学意义(P<0.01)；划痕 48h 后的 KB/ADM 空白组、KB/ADM25mg/LVP-16、KB/ADM25mg/LVP-16+VRP 及 KB/ADM25mg/LVP-16+NC 迁移率分别为(29.83±1.78)% 、 (28.05±1.05)% 、 (17.45±1.82)% 和 (14.12±0.26)% ， 与KB/ADM 空白组比较具有显著差异(P<0.01)。以上结果显示，NC 对KB/ADM 细胞的迁移有抑制作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄酮类化合物抵抗P-糖蛋白介导肿瘤多药耐药特性机制研究进展[J]. 韩嘉华,朱斯琦,谢燕. 国际药学研究杂志. 2016(05)
[2]榄香烯乳联合人参皂苷对卵巢癌细胞耐药株A2780/PTX的影响作用[J]. 王焕. 世界中医药. 2016(09)
[3]PI3K/Akt/mTOR信号通路在肿瘤中的研究进展[J]. 肖亮,殷小成. 现代医药卫生. 2016(12)
[4]沉默HOXA10基因表达联合川芎嗪可逆转K562/ADR细胞的多药耐药性[J]. 贾秀红,伊英杰,任秀敏,王建勇,李有杰. 肿瘤. 2016(06)
[5]PI3K-Akt-mTOR信号传导通路与乳腺癌关系的研究进展[J]. 王洁,杨红鹰. 诊断病理学杂志. 2016(05)
[6]黄芩苷对耐多药结核鼠VEGF、MMP-9表达及对血清炎症因子的影响[J]. 吴正吉,张渝成,吴蕊鑫,方昕. 中国地方病防治杂志. 2016(03)
[7]姜黄素逆转肿瘤多药耐药机制的研究进展[J]. 孙晓冉,孙剑经,张林西. 中国肿瘤. 2016(04)
[8]苦参碱对人膀胱癌BIU-87/ADM细胞多药耐药的影响[J]. 左陵君,张耘新,段建敏. 中国中医药信息杂志. 2016(02)
[9]浙贝母碱对A549/顺铂耐药肺癌细胞株核苷酸ERCC1基因及LRP表达的影响[J]. 唐晓勇,唐迎雪,许鹏,周海燕,韩丽. 中国中西医结合杂志. 2015(12)
[10]中医药逆转肿瘤多药耐药的策略及研究进展[J]. 徐叶峰,刘云霞,沈敏鹤,阮善明. 中国中西医结合杂志. 2015(07)
硕士论文
[1]氯化两面针碱体外逆转多药耐药肿瘤细胞耐药性的实验研究[D]. 张华君.广西医科大学 2015
[2]姜黄素、维拉帕米联合应用逆转胃癌细胞株SGC7901/ADR多药耐药性的研究[D]. 丰宗锋.重庆医科大学 2012
[3]氯化两面针碱抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖作用及其机制研究[D]. 徐强.浙江大学 2011
[4]环孢菌素A联合苦参碱逆转K562/ADM细胞多药耐药的研究及微流控芯片检测药物外排的应用[D]. 陈怡.厦门大学 2009
本文编号：3582979
【文章来源】：广西中医药大学广西壮族自治区
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
KB/ADM及KB细胞MDR1基因的相对表达(xs,n=3)
图 2 KB/ADM 及 KB 细胞 P-gp 蛋白的相对表达Figure2 The P-gp expression of KB/ADM and KB cells4 讨论在肿瘤 MDR 的多种机制中，肿瘤细胞 P-gp 的过度表达被认为是化疗耐药最重要、也是研究最深入的耐药机制[26]。在一般敏感细胞通常会检测不到 P-gp，而 P-gp 在肿瘤 MDR 细胞株中却有高水平的，就是因为持续高表达进而使细胞内化疗药物排出，从而起到降低细内化疗药物浓度的作用，P-gp 使细胞内的药物浓度始终维持在较低平，造成肿瘤多药耐药[30]。采用 MDR 肿瘤细胞进行研究之前，应当对所选耐药细胞株的耐药性进行鉴别，这些前期准备对后续实验的可KB KB/ADM
(13.15±1.53)% 、 (15.18±1.41)% 、 (13.84±2.58)% 和 (12.59±2.28)% ， 与KB/ADM 空白组差异无统计学意义。在划痕 48h 后，KB 空白组、KB25mg/LVP-16 组及 KB100mg/LVP-16 组的迁移率分别为(30.51±0.88)%、(40.89±0.05)%和(23.17±1.49)%，与 KB 空白组比较差异有统计学意义(P<0.01)；划痕 48h 后的 KB/ADM 空白组、KB/ADM25mg/LVP-16、KB/ADM25mg/LVP-16+VRP 及 KB/ADM25mg/LVP-16+NC 迁移率分别为(29.83±1.78)% 、 (28.05±1.05)% 、 (17.45±1.82)% 和 (14.12±0.26)% ， 与KB/ADM 空白组比较具有显著差异(P<0.01)。以上结果显示，NC 对KB/ADM 细胞的迁移有抑制作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄酮类化合物抵抗P-糖蛋白介导肿瘤多药耐药特性机制研究进展[J]. 韩嘉华,朱斯琦,谢燕. 国际药学研究杂志. 2016(05)
[2]榄香烯乳联合人参皂苷对卵巢癌细胞耐药株A2780/PTX的影响作用[J]. 王焕. 世界中医药. 2016(09)
[3]PI3K/Akt/mTOR信号通路在肿瘤中的研究进展[J]. 肖亮,殷小成. 现代医药卫生. 2016(12)
[4]沉默HOXA10基因表达联合川芎嗪可逆转K562/ADR细胞的多药耐药性[J]. 贾秀红,伊英杰,任秀敏,王建勇,李有杰. 肿瘤. 2016(06)
[5]PI3K-Akt-mTOR信号传导通路与乳腺癌关系的研究进展[J]. 王洁,杨红鹰. 诊断病理学杂志. 2016(05)
[6]黄芩苷对耐多药结核鼠VEGF、MMP-9表达及对血清炎症因子的影响[J]. 吴正吉,张渝成,吴蕊鑫,方昕. 中国地方病防治杂志. 2016(03)
[7]姜黄素逆转肿瘤多药耐药机制的研究进展[J]. 孙晓冉,孙剑经,张林西. 中国肿瘤. 2016(04)
[8]苦参碱对人膀胱癌BIU-87/ADM细胞多药耐药的影响[J]. 左陵君,张耘新,段建敏. 中国中医药信息杂志. 2016(02)
[9]浙贝母碱对A549/顺铂耐药肺癌细胞株核苷酸ERCC1基因及LRP表达的影响[J]. 唐晓勇,唐迎雪,许鹏,周海燕,韩丽. 中国中西医结合杂志. 2015(12)
[10]中医药逆转肿瘤多药耐药的策略及研究进展[J]. 徐叶峰,刘云霞,沈敏鹤,阮善明. 中国中西医结合杂志. 2015(07)
硕士论文
[1]氯化两面针碱体外逆转多药耐药肿瘤细胞耐药性的实验研究[D]. 张华君.广西医科大学 2015
[2]姜黄素、维拉帕米联合应用逆转胃癌细胞株SGC7901/ADR多药耐药性的研究[D]. 丰宗锋.重庆医科大学 2012
[3]氯化两面针碱抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖作用及其机制研究[D]. 徐强.浙江大学 2011
[4]环孢菌素A联合苦参碱逆转K562/ADM细胞多药耐药的研究及微流控芯片检测药物外排的应用[D]. 陈怡.厦门大学 2009
本文编号：3582979
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