苓桂术甘汤中多糖结构组成及其抗氧化活性考察
发布时间：2022-01-14 22:36
目的:研究苓桂术甘汤中多糖的结构,包括单糖组成以及官能团检测,并对其抗氧化能力进行评估,为体外生物测定法运用于苓桂术甘汤的质量评价提供基础。方法:利用高效凝胶色谱对全方多糖分子量进行研究;进一步采用气相色谱-质谱（GC-MS）柱前衍生化法及红外光谱扫描分析全方多糖结构组成;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）及羟基自由基测定全方粗多糖及精多糖的抗氧化能力。结果:全方多糖由单一峰组成,且相对分子质量为3 689 Da,主要由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、果糖组成,摩尔比为6. 85∶1. 00∶109. 21∶1. 04∶21. 82,其中葡萄糖和果糖为主要组成成分;红外结果显示聚糖结构中存在吡喃糖及糖醛酸,并且糖苷键存在2种立体异构（α-糖苷键及β-糖苷键）;抗氧化研究发现全方多糖有一定清除DPPH自由基及羟基自由基的能力,粗多糖的活性优于精多糖。进一步采用LC-Q-TOF-MS对粗多糖中的其他成分进行定性分析,提示这与甘草中五环三萜类成分的吸附有关。结论:苓桂术甘汤中多糖及五环三萜类物质均是苓桂术甘汤抗氧化作用的物质基础,利用体外生物测定法测定抗氧化活性可作为全面控制苓...
【文章来源】：中国实验方剂学杂志. 2020,26(16)北大核心CSCD
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
450～800 nm紫外吸收波长扫描结果比较
全方多糖经过三氟乙酸水解并衍生化后进样，通过GC-MS分析并与NIST Mass Spectrometry Data Center提供的质谱数据库进行匹配，初步鉴定出5种单糖衍生物，推测分别由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、果糖演变而成。进一步利用单糖对照品经过衍生化进样，并进行保留时间的比对，确定各单糖衍生物的保留时间分别为16.03,21.93,22.22,22.78,28.92/29.18 min，与样品各峰出峰时间一致。值得注意的是，果糖衍生化后出现2个峰，可能因为果糖与盐酸羟胺反应的速度不及其在吡啶中异构化的速度，因此出现2个峰[24]。通过对照品浓度及峰面积计算得出样品中所含各单糖的摩尔数，以甘露糖为参比，得到阿拉伯糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖-果糖的摩尔比为6.85∶1.00∶109.21∶1.04∶21.82，可见葡萄糖和果糖为主要的组成成分，而阿拉伯糖、甘露糖和半乳糖仅作为杂糖基团修饰在聚糖糖链上。见图3,4。图3 全方多糖衍生化样品通过GC-MS得到的TIC
图2 全方多糖样品及葡聚糖对照品凝胶色谱全方精多糖的红外扫描见图5。1 638.88 cm-1代表由于氢键缔合影响导致偏移的酰胺Ⅰ带，表明存在羰基键的伸缩振动，同时在1329.34 cm-1处出现酰胺Ⅲ带，表明存在碳氮键的伸缩振动，提示酰胺结构的存在，其响应强度在一定程度上可显示精多糖中蛋白含量的高低。3 289.04 cm-1处的较强的宽条带显示多糖结构中O-H伸缩振动，不排除多糖样品中水分带来的影响。2 930.06 cm-1的小信号峰是指饱和烃基的C-H伸缩振动。峰1 026.84 cm-1由C-O结构的伸缩振动产生，再结合986.80cm-1证明样品中存在吡喃糖[25]。另外818.17 cm-1及874.16 cm-1又提示糖与糖之间的糖苷键存在两种立体异构（α-糖苷键及β-糖苷键）[26]。818.17 cm-1再结合条带934.41 cm-1提示可能存在甘露糖[27]。1 428.73 cm-1处的条带代表COO-的伸缩振动，提示结构中可能存在糖醛酸。1 218.68 cm-1为C-CO-C伸缩振动产生，可能受酮糖（果糖）结构的影响。
【参考文献】：
期刊论文
[1]经典名方苓桂术甘汤的物质基准量值传递分析[J]. 刘冬涵,薛宇涛,罗菊元,梁军,田湾湾,张琦,刘蕾蕾,张钰明,杜守颖,白洁,陆洋,武慧超. 中国中药杂志. 2019(24)
[2]纤维素酶和果胶酶提取对甘草渣多糖抗氧化和抗肿瘤性能的影响[J]. 李菀,胡月,李光霞,殷胜友,姚惠文. 食品工业科技. 2020(09)
[3]经典名方苓桂术甘汤HPLC指纹图谱的建立及3种成分含量测定[J]. 陈蒙,林龙飞,刘宇灵,王春民,李慧,杨宇杰. 中草药. 2019(17)
[4]苓桂术甘汤药理作用及其机制研究进展[J]. 陈君媚,周春祥. 中国实验方剂学杂志. 2019(14)
[5]苓桂术甘汤含药血清对过氧化氢诱导的乳鼠原代心肌细胞氧化应激损伤及细胞凋亡的影响[J]. 丁婉雪,葛瑞瑞,黄金玲,周鹏,王靓,甘贤兵,施慧,范晓芸. 安徽中医药大学学报. 2019(02)
[6]苓桂术甘汤加减联合常规西药治疗慢性心力衰竭随机对照临床研究Meta分析[J]. 张洪源,刘悦,王洋,刘光辉,张哲,杨关林. 中医杂志. 2019(06)
[7]不同产地红枣多糖抗氧化性比较[J]. 李霄,马向荣,温俊峰,杜芳艳,李红梅. 当代化工. 2019(02)
[8]木槿花多糖的组成分析及抗氧化活性研究[J]. 金友权,张四杰,钱正,张新凤,斯金平. 中国中药杂志. 2019(09)
[9]苓桂术甘汤在脾胃病治疗中的应用价值[J]. 路伟伟. 深圳中西医结合杂志. 2019(02)
[10]加味苓桂术甘汤治疗冠心病无症状性心肌缺血的临床研究[J]. 李晓曼,艾克荣. 中西医结合心脑血管病杂志. 2018(20)
硕士论文
[1]硫磺熏蒸对白术药材质量的影响研究[D]. 孙学.南京中医药大学 2017
本文编号：3589346
【文章来源】：中国实验方剂学杂志. 2020,26(16)北大核心CSCD
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
450～800 nm紫外吸收波长扫描结果比较
全方多糖经过三氟乙酸水解并衍生化后进样，通过GC-MS分析并与NIST Mass Spectrometry Data Center提供的质谱数据库进行匹配，初步鉴定出5种单糖衍生物，推测分别由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、果糖演变而成。进一步利用单糖对照品经过衍生化进样，并进行保留时间的比对，确定各单糖衍生物的保留时间分别为16.03,21.93,22.22,22.78,28.92/29.18 min，与样品各峰出峰时间一致。值得注意的是，果糖衍生化后出现2个峰，可能因为果糖与盐酸羟胺反应的速度不及其在吡啶中异构化的速度，因此出现2个峰[24]。通过对照品浓度及峰面积计算得出样品中所含各单糖的摩尔数，以甘露糖为参比，得到阿拉伯糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖-果糖的摩尔比为6.85∶1.00∶109.21∶1.04∶21.82，可见葡萄糖和果糖为主要的组成成分，而阿拉伯糖、甘露糖和半乳糖仅作为杂糖基团修饰在聚糖糖链上。见图3,4。图3 全方多糖衍生化样品通过GC-MS得到的TIC
图2 全方多糖样品及葡聚糖对照品凝胶色谱全方精多糖的红外扫描见图5。1 638.88 cm-1代表由于氢键缔合影响导致偏移的酰胺Ⅰ带，表明存在羰基键的伸缩振动，同时在1329.34 cm-1处出现酰胺Ⅲ带，表明存在碳氮键的伸缩振动，提示酰胺结构的存在，其响应强度在一定程度上可显示精多糖中蛋白含量的高低。3 289.04 cm-1处的较强的宽条带显示多糖结构中O-H伸缩振动，不排除多糖样品中水分带来的影响。2 930.06 cm-1的小信号峰是指饱和烃基的C-H伸缩振动。峰1 026.84 cm-1由C-O结构的伸缩振动产生，再结合986.80cm-1证明样品中存在吡喃糖[25]。另外818.17 cm-1及874.16 cm-1又提示糖与糖之间的糖苷键存在两种立体异构（α-糖苷键及β-糖苷键）[26]。818.17 cm-1再结合条带934.41 cm-1提示可能存在甘露糖[27]。1 428.73 cm-1处的条带代表COO-的伸缩振动，提示结构中可能存在糖醛酸。1 218.68 cm-1为C-CO-C伸缩振动产生，可能受酮糖（果糖）结构的影响。
【参考文献】：
期刊论文
[1]经典名方苓桂术甘汤的物质基准量值传递分析[J]. 刘冬涵,薛宇涛,罗菊元,梁军,田湾湾,张琦,刘蕾蕾,张钰明,杜守颖,白洁,陆洋,武慧超. 中国中药杂志. 2019(24)
[2]纤维素酶和果胶酶提取对甘草渣多糖抗氧化和抗肿瘤性能的影响[J]. 李菀,胡月,李光霞,殷胜友,姚惠文. 食品工业科技. 2020(09)
[3]经典名方苓桂术甘汤HPLC指纹图谱的建立及3种成分含量测定[J]. 陈蒙,林龙飞,刘宇灵,王春民,李慧,杨宇杰. 中草药. 2019(17)
[4]苓桂术甘汤药理作用及其机制研究进展[J]. 陈君媚,周春祥. 中国实验方剂学杂志. 2019(14)
[5]苓桂术甘汤含药血清对过氧化氢诱导的乳鼠原代心肌细胞氧化应激损伤及细胞凋亡的影响[J]. 丁婉雪,葛瑞瑞,黄金玲,周鹏,王靓,甘贤兵,施慧,范晓芸. 安徽中医药大学学报. 2019(02)
[6]苓桂术甘汤加减联合常规西药治疗慢性心力衰竭随机对照临床研究Meta分析[J]. 张洪源,刘悦,王洋,刘光辉,张哲,杨关林. 中医杂志. 2019(06)
[7]不同产地红枣多糖抗氧化性比较[J]. 李霄,马向荣,温俊峰,杜芳艳,李红梅. 当代化工. 2019(02)
[8]木槿花多糖的组成分析及抗氧化活性研究[J]. 金友权,张四杰,钱正,张新凤,斯金平. 中国中药杂志. 2019(09)
[9]苓桂术甘汤在脾胃病治疗中的应用价值[J]. 路伟伟. 深圳中西医结合杂志. 2019(02)
[10]加味苓桂术甘汤治疗冠心病无症状性心肌缺血的临床研究[J]. 李晓曼,艾克荣. 中西医结合心脑血管病杂志. 2018(20)
硕士论文
[1]硫磺熏蒸对白术药材质量的影响研究[D]. 孙学.南京中医药大学 2017
本文编号：3589346
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