刺五加酸调控FXR信号通路改善非酒精性脂肪肝的研究

发布时间：2022-02-10 06:27

　　目的:刺五加酸的化学结构为海松二烯二萜类,从刺五加的根皮部提取得来,目前的研究表明刺五加酸对于肝保护具有较好的作用效果,本研究采用Lieber-DeCarli液体高脂饲料饮食诱导小鼠非酒精性脂肪肝（NAFLD）,同时采用细胞诱导分化成脂肪细胞,探讨刺五加酸（AA）对NAFLD的改善作用以及具体的调控机制。方法:通过每天给予Lieber-DeCarli（L-D）液体高脂饲料喂养,持续喂养12周,用来诱导小鼠非酒精性脂肪肝模型造模成功。与此同时,配制不同剂量的刺五加酸（20mg/kg或40mg/kg）用于小鼠灌胃,每周连续灌胃7次,周期为12周。取小鼠血清和肝脏存放于-80℃。测定血清及肝脏中的生化指标,如丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）及甘油三酯（TG）水平的变化情况。我们采用H&E、油红染色、Nilered、免疫组化等染色,观察肝脏组织病理学变化。采用蛋白印迹法以及RT-PCR来检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（Collagen-Ⅰ）、法尼酯X受体（FXR）等的表达水平。取对数期的3T3-L1前脂肪细胞,给予诱导分化液刺激2天后,再给... 

【文章来源】：延边大学吉林省211工程院校

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 刺五加酸改善高脂饲料饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验仪器
        2.1.2 主要实验试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 动物饲养管理
        2.2.2 生化指标的测定
        2.2.3 肝脏切片的制备
        2.2.4 H&E染色
        2.2.5 免疫组化实验
        2.2.6 组织免疫荧光实验
        2.2.7 组织尼罗红染色实验
        2.2.8 组织油红染色实验
        2.2.9 Western blot实验
        2.2.10 RT-PCR实验
    2.3 统计学处理
    2.4 实验结果
        2.4.1 刺五加酸对NAFLD小鼠体重、肝脏指标、AST、ALT以及TG表达的影响
        2.4.2 刺五加酸对NAFLD小鼠中肝脏组织形态学的影响
        2.4.3 刺五加酸对NAFLD小鼠中SREBP1表达水平的影响
        2.4.4 刺五加酸对肝纤维化指标相关指标表达的影响
        2.4.5 刺五加酸对NAFLD小鼠中核受体LXRs以及FXR1表达的影响
        2.4.6 刺五加酸对NAFLD小鼠中脂代谢相关核受体PPARs表达的影响
        2.4.7 刺五加酸对NAFLD小鼠中LKB1-AMPK通路的影响
        2.4.8 刺五加酸对NAFLD中胆汁受体FXR1表达的影响
第三章 刺五加酸对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及脂肪代谢的影响
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验仪器
        3.1.2 实验试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 3T3-L1前脂肪细胞的培养与分化
        3.2.2 MTT实验
        3.2.3 Western-Blot方法检测刺五加酸对3T3-L1细胞增殖分化及脂肪代谢的影响
        3.2.4 PCR检测刺五加酸对3T3-L1细胞增殖分化及脂肪代谢的相关蛋白的mRNA水平的影响
        3.2.5 细胞油红染色
    3.3 统计学处理
    3.4 实验结果
        3.4.1 刺五加酸对于3T3-L1细胞生存率的影响
        3.4.2 刺五加酸对于3T3-L1细胞油红染色的影响
        3.4.3 刺五加酸对于3T3-L1细胞内脂肪合成相关蛋白表达的影响
        3.4.4 刺五加酸对于3T3-L1细胞内核受体LXRs以及FXR1表达的影响
        3.4.5 刺五加酸对于3T3-L1细胞内LKB1-AMPK信号通路的作用
        3.4.6 刺五加酸对于3T3-L1细胞内脂代谢相关核受体PPARs表达的影响
        3.4.7 刺五加酸对于3T3-L1细胞内PI3K-AKT信号通路的影响
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
致谢
附录


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]基于LXRs信号转导途径探讨消瘀化痰方药治疗NAFLD的机制研究[D]. 周新平.河北医科大学 2015



本文编号：3618411