芒柄花黄素诱导胃癌细胞株MGC-803凋亡机制研究

发布时间：2022-02-11 16:37

　　目的:探讨芒柄花黄素对人胃癌细胞株MGC-803增殖、凋亡的影响及可能机制。方法:用含不同浓度（0、20、40、80μmol/L）芒柄花黄素的培养基分别培养人胃癌细胞株MGC-803后,MTT法观察不同浓度芒柄花黄素对MGC-803细胞增殖的影响。Hoechst 33258染色法观察不同浓度的芒柄花黄素对细胞核形态的影响。流式细胞计数法观察细胞凋亡情况。荧光定量PCR实验检测细胞BAX、BCL-2 m RNA表达情况。Western blotting检测不同药物浓度作用下细胞的p-AKT、AKT、BAX和BCL-2蛋白表达情况。结果:MTT法结果显示,0、20、40、80μmol/L芒柄花黄素分别作用MGC-803细胞24、48、72 h后,细胞的增殖抑制率越来越高,表现出剂量与时间依赖性（P<0.05）。Hoechst 33258荧光染色、流式细胞计数结果显示,随着药物浓度增加,细胞凋亡率逐渐升高。Real-time PCR结果显示,随着芒柄花黄素浓度升高,MGC-803细胞的BAX m RNA相对表达量逐渐升高,BCL-2 m RNA相对表达量逐渐降低（P<0.01）。... 

【文章来源】：中国现代普通外科进展. 2020,23(08)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

MTT法检测芒柄花黄素对MGC-803细胞增殖抑制率的影响

芒柄花黄素培养MGC-803细胞48h后，随药物浓度增加，MGC-803细胞BCL-2mRNA相对表达水平逐渐降低，BAX mRNA相对表达水平逐渐增加，差异有统计学意义（P<0.01）。见图4。2.5 不同药物浓度对MGC-803细胞中p-AKT、AKT、BAX和BCL-2蛋白表达情况的影响

细胞凋亡通路主要包括内质网通路和线粒体通路，而线粒体通路在细胞凋亡的调控中占主导地位[14]。线粒体凋亡途径主要由BCL-2家族成员所调控，BAX基因发挥促凋亡作用，而BCL-2基因作用正相反，因此BCL-2 mRNA、BCL-2蛋白表达水平下降，BAX mRNA、BAX蛋白表达水平上升可诱导细胞凋亡，这与本研究MTT和Hoechst 33258染色结果一致，提示胃癌MGC-803增殖抑制率上升与BAX表达上升、BCL-2表达下降有关。AKT信号通路在胃癌的侵袭、转移中具有重要的作用[15]。AKT是PI3K下游的关键蛋白，主要由PH结构域、催化结构域和调节结构域构成，其中当PH结构域发生突变或缺失后会使AKT活性降低甚至丧失。活化的AKT是一个关键的致瘤因素，它能促进肿瘤细胞的存活和增殖[16]。本研究结果表明，PAKT mRNA、PAKT蛋白随芒柄花黄素浓度上升而表达量呈现下降趋势，故我们推测胃癌MGC-803细胞的凋亡可能与AKT信号通路激活有关。

【参考文献】：
期刊论文
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[4]Up-regulation of PIK3CA promotes metastasis in gastric carcinoma[J]. Ji-Fang Liu,Xin-Ke Zhou,Jin-Hui Chen,Gao Yi,He-Ge Chen,Ming-Chen Ba,Sheng-Qu Lin,Yan-Chao Qi,Institute of Cancer Research,Affiliated Tumor Hospital of Guangzhou Medical College,Guangzhou 510095,Guangdong Province,China,Key Laboratory of Marine Bio-resources Sustainable Utilization,CAS,Guangzhou 510301,Guangdong Province,China,Laboratory of Applied Marine Biology,Southern China Sea Institute of Oceanology,Chinese Academy of Science,Guangzhou 510301,Guangdong Province,China,Department of Pharmacology and Experimental Therapeutics,University of Maryland,685 West Baltimore street,Baltimore,MD 21228,United States,Department of Abdominal Surgery(Section Ⅱ),Affiliated Tumor Hospital of Guangzhou Medical College,Guangzhou 510095,Guangdong Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(39)



本文编号：3620610