越鞠甘麦大枣汤对小鼠细胞系的神经保护作用及抗炎作用

发布时间：2022-02-11 18:27

　　目的:1.研究越鞠甘麦大枣汤对皮质酮诱导的小鼠海马神经元细胞系（HT22）细胞损伤的神经保护作用。2.研究越鞠甘麦大枣汤对谷氨酸诱导的HT22细胞损伤的神经保护作用。3.研究越鞠甘麦大枣汤对脂多糖（LPS）诱导的小胶质细胞（BV2）炎症模型的保护作用。方法:HT22细胞系、BV2细胞系无菌培养,制备越鞠甘麦大枣汤水提液和含药血清,实验包括3个部分:1.以高浓度皮质酮（CORT）建立细胞损伤模型,实验分为5组:正常组（不含皮质酮的正常细胞组）、模型组（皮质酮损伤的细胞组）、越鞠甘麦大枣汤含药血清组（1%、5%、10%）,四甲基偶氮唑盐法（MTT）检测实验各组细胞存活率,酶联免疫吸附测定（ELISA）检测实验各组乳酸脱氢酶（LDH）漏出量,蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测各组细胞AKT、p-AKT蛋白的表达。2.以高浓度谷氨酸建立细胞损伤模型,实验分为7组:正常组、模型组、越鞠甘麦大枣汤含药血清组（1%、5%、10%）、越鞠甘麦大枣汤水煎剂组、尼莫地平组。MTT法检测实验各组细胞存活率;ELISA法检测乳酸脱氢酶（LDH）释放率及细胞内活性氧自由基（ROS）的水平;Wester... 

【文章来源】：南京中医药大学江苏省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．１不同浓度的ＣＯＲＴ对ＨＴ２２细胞成活率的影响

＾?＾?＾?＾??ＣＯＲＴ?Ｍｍ〇ｌ／Ｌ??图２．１不同浓度的ＣＯＲＴ对ＨＴ２２细胞成活率的影响。与正常组相比，采用单因素方差分析结果显示，不同浓度的ＣＯＲＴ??组成活率显著降低，＊＊＊＊Ｐ＜〇．〇〇〇１。??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＯＲＴ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｓｕｒｖｉｖａｌ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ＨＴ２２?ｃｅｌｌｓ．?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｎｏｒｍａｌ?ｇｒｏｕｐ，?ｔｈｅ??ｏｎｅ－ｗａｙ?ＡＮＯＶＡ?ｓｈｏｗｅｄ?ｔｈａｔ?ｔｈｅ?ｓｕｒｖｉｖａｌ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＯＲＴ?ｗａｓ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ?ｒｅｄｕｃｅｄ．?＊＊＊＊?Ｐ＜０．０００１．??２．?３．?２越鞠甘麦大枣汤含药血清对ＣＯＲＴ诱导损伤的ＨＴ２２细胞存活率的影响??按照“２．２．４”项下分组方法共培养各组细胞２４ｈ后，采用ＭＴＴ法检测实验各组ＨＴ２２细??胞的活性，并计算各组成活率，结果如图２．２所示。与正常组相比，ＣＯＲＴ诱导损伤的模??型组细胞成活率显著下降（Ｐ０．０００１）；与模型组相比，不同浓度的越鞠甘麦大枣汤含药??血清组细胞存活率显著上升（Ｐ＜〇．〇〇〇ｌ），且呈浓度依赖性。??＊＊＊＊??１?？０１?＃＃＃＃??？ｆ?審?Ｘ?＿??Ｊ?０?５?■??＊０）??°??０．０?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??，，＃，，??ＣＯＲＴ（７０〇Ｍｍｏｌ／Ｌ）??图２．２不同浓度的越鞠甘麦大枣汤对细胞成活率的影响。与正常组相比

?２．?３．?３越鞠甘麦大枣汤含药血清对ＣＯＲＴ损伤的ＨＴ２２细胞ＬＤＨ漏出量的影响??分别测定各组细胞上清中和细胞内ＬＤＨ的值，结果如图２．３所示；按照“２．２．６”项下公??式计算各组细胞ＬＤＨ漏出量，结果如图２．４所示。与正常组相比，ＣＯＲＴ模型组ＬＤＨ漏??出量显著增加（Ｐ＜〇．〇】）；与模型组相比，越鞠甘麦大枣汤含药血清组ＬＤＨ漏出量显著减??少（尸＜０．０００１）。??Ａ??６－Ｊ?＿＾??＃＃＃＃?Ｂ??．４。１??ｔ＾－?＾?Ｉ?，?？??ｃｂ?干丁丁??〇?．?三３０－?？＿?邋丄羼?下?”??〇！．，?１，．１?１?，?２５?’?＞?？??图２．３上清中和细胞内ＬＤＨ值。Ａ：实验各组细胞上清中ＬＤＨ含量，与正常组相比，模型组细胞上清中ＬＤＨ含量显著??上升，＊＊Ｐ＜０．０１；与模型组相比，不同浓度越鞠Ｉｔ麦大枣汤含药血清组细胞上清中ＬＤＨ含量显著下降，＃＃＃＃／＞＜０．０００１；??Ｂ：实验各组细胞内ＬＤＨ含量

【参考文献】：
期刊论文
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[2]越鞠甘麦大枣汤对皮质酮诱导损伤的HT22细胞的神经保护作用[J]. 葛渴敏,薛文达,王薇.  时珍国医国药. 2018(10)
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[10]越鞠甘麦大枣汤对产后抑郁小鼠海马AKT/mTOR信号通路的影响[J]. 夏宝妹,陈畅,张海楼,薛文达,吴如燕,任荔,陶伟伟,陈刚.  中国药理学通报. 2016(01)

博士论文
[1]产后抑郁子代行为的分子机制及越鞠甘麦大枣汤快速干预的实验研究[D]. 吴如燕.南京中医药大学 2016
[2]越鞠甘麦大枣汤对产后抑郁模型小鼠的快速抗抑郁作用及机制研究[D]. 夏宝妹.南京中医药大学 2016



本文编号：3620749