基于细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ序列位点特异性聚合酶链反应鉴别鹿茸及其伪品

发布时间：2022-02-20 01:37

　　目的:基于细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）序列建立一种新的PCR鉴定方法,以快速鉴别出梅花鹿、马鹿茸片与驯鹿茸片。方法:采集不同来源的鹿茸片共60批。通过比较梅花鹿、马鹿与驯鹿等其他伪品的COⅠ基因序列差异,根据SNP鉴别位点设计梅花鹿茸、马鹿茸同驯鹿茸的鉴别引物Cne-F、Rt-F、Co-R,并对影响聚合酶链反应（PCR）结果的主要因素变性时间、退火温度、退火时间、延伸时间等进行方法学考察和优化。结果:该实验构建的双位点特异PCR鉴别体系,基于COⅠ的鉴别位点,可通过PCR扩增获得294 bp的梅花鹿、马鹿特异片段,而产生514 bp的驯鹿特异片段,伪品及阴性对照无条带。结论:该实验建立对梅花鹿、马鹿及驯鹿等其他伪品鹿茸的PCR鉴别方法简便、可靠。 

【文章来源】：世界中医药. 2020,15(10)

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与仪器
    1.1 材料
    1.2 试剂
    1.3 仪器
2 方法
    2.1 鹿茸样品基因组DNA的提取
    2.2 PCR扩增及序列测定
    2.3 系统邻接树构建
    2.4 位点特异性PCR引物设计及PCR条件考察
    2.5 鹿茸片PCR鉴别方法验证
3 结果
    3.1 系统邻接树信息分析结果
    3.2 PCR反应条件以及体系
    3.3 鹿茸片PCR鉴别方法验证
4 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]《中国药典》收载动物药材DNA条形码鉴定研究策略与方法[J]. 姚辉,张辉,陈士林.  中国现代中药. 2019(09)
[2]鹿茸、鹿角的位点特异性PCR鉴别[J]. 钱润,田娜,张雪艳,蒋超,袁媛.  中国实验方剂学杂志. 2019(17)
[3]鹿茸炮制方法、化学成分以及药理作用研究进展[J]. 王亚苹,张凯月,张辉,高颖.  吉林中医药. 2019(04)
[4]梅花鹿鹿茸片及近源品种真伪鉴别[J]. 李明月,王倩雯,石瑶,张敏.  中国林副特产. 2019(01)
[5]鹿茸的药材鉴别[J]. 祝之友.  中国中医药现代远程教育. 2018(18)
[6]基于双重PCR技术的鹿茸及其伪品DNA指纹特征和鉴定[J]. 高丽君,何程远,李盈诺,巴宏宇,李梓僮,夏薇,李明成,苑广信,张丽华,艾金霞.  吉林大学学报(医学版). 2018(04)
[7]鹿产品鉴别的研究进展[J]. 董世武,王磊,周永娜,邢秀梅.  经济动物学报. 2018(04)
[8]鹿茸的化学成分及质量控制方法研究进展[J]. 郭晓晗,程显隆,李明华,张文娟,魏锋,马双成.  药物分析杂志. 2018(04)
[9]鹿茸的性状及显微鉴别[J]. 张小冬,李垠含,刘颖.  甘肃医药. 2018(02)
[10]鹿茸药效物质基础、药理作用、临床应用及质量控制的研究进展[J]. 王楠,高晓霞,代子彦,郝晋琪,秦雪梅.  中草药. 2017(22)



本文编号：3634040