基于PI3K-Akt/PKB信号通路的阳和平喘颗粒干预支气管哮喘气道重塑机制研究

发布时间：2022-02-20 23:17

　　阳和平喘颗粒是安徽中医药大学第一附属医院呼吸内科以“补肾化痰”为理念,在“阳和汤”和“平喘汤”组方的基础上,结合多年的临床实践,化裁而成。方中含有麻黄、熟地、当归等九味中药,功擅止咳化痰,兼具敛肺补肾,主治肾阳虚型哮喘。阳和平喘颗粒是该方经现代制剂工艺制备而成的特色中药制剂。目的:阳和平喘颗粒临床主要用于治疗肾阳虚型支气管哮喘（bronchial asthma,BA）,疗效确切,但具体作用机制尚未明确。本研究以PI3K/PKB信号转导通路为基础,探讨阳和平喘颗粒治疗BA的潜在分子机制。方法:1阳和平喘颗粒对肾阳虚型支气管哮喘大鼠PI3K/PKB信号通路的调控作用采用卵清白蛋白（OVA）致敏及腹腔注射氢化可的松的方法复制肾阳虚型BA大鼠模型。取正常大鼠10只作为正常组,另取造模成功的大鼠分为模型组,阳和平喘颗粒给药组（14.76、7.38、3.69 g/kg）和桂龙咳喘宁组（1.0 g/kg）,每组10只。给药2周后,HE染色观察BA大鼠支气管病变情况,Real-time PCR检测胞内磷脂酰肌醇激酶（PI3K）、蛋白激酶B（PKB）、肾上腺素受体（AR）和增殖细胞核抗原（PCNA）mR... 

【文章来源】：安徽中医药大学安徽省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
英文缩略词(Abbreviation)
前言
实验一 阳和平喘颗粒对肾阳虚型支气管哮喘大鼠PI3K/PKB信号通路的调控作用
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验药物
        1.3 试剂
        1.4 仪器
    2 实验方法
        2.1 哮喘模型的建立
        2.2 肾阳虚模型的建立
        2.3 给药方案
        2.4 大鼠一般形态学观察
        2.5 气道平滑肌组织的采集
        2.6 UPLC-PDA对阳和平喘颗粒的定性研究
        2.7 病理组织学检测
        2.8 Realtime-PCR检测PI3K、PKB、PCNA、ARmRNA的表达
        2.9 Western-blot检测PI3K、PKB、PCNA、AR蛋白的表达
        2.10 ELISA检测PIP2,PIP3,IL-6,IL-8,IL-1β和EPI的表达
    3 统计学分析
    4 结果
        4.1 大鼠行为状态的观察
        4.2 阳和平喘颗粒有效成分定性研究
        4.3 大鼠肺组织病理改变
        4.4 阳和平喘颗粒对BA大鼠PI3K/PKB通路的调节作用
        4.5 阳和平喘颗粒对大鼠组织炎症因子IL-6,IL-8,IL-1β表达的影响
        4.6 阳和平喘颗粒对大鼠肾上腺素轴功能的影响
        4.7 阳和平喘颗粒对支气管哮喘大鼠细胞增殖的影响
    5 讨论
        5.1 动物模型的选择依据
        5.2 BA与PI3K/PKB信号通路
        5.3 BA与炎症因子
        5.4 BA与EPI,AR
实验二 阳和平喘颗粒含药血清对OVA诱导的BA大鼠ASMCs中PI3K/PKB信号通路的调控作用
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验药物
        1.3 试剂
        1.4 仪器
    2 实验方法
        2.1 阳和平喘颗粒含药血清的制备
        2.2 气道平滑肌细胞的培养
        2.3 MTT法筛选阳和平喘颗粒含药血清最佳作用时间和浓度
        2.4 细胞实验分组
        2.5 Realtime-PCR检测PI3K、PKB、PCNA、ARmRNA的表达
        2.6 Western-blot检测PI3K、PKB、PCNA蛋白的表达
        2.7 酶联免疫吸附法检测PIP2,PIP3,IL-6,IL-8,IL-1β的表达
    3 统计学分析
    4 结果
        4.1 阳和平喘颗粒最佳浓度含药血清和最佳作用时间筛选
        4.2 阳和平喘颗粒对BA大鼠肺组织PI3K、PKB表达的影响
        4.3 阳和平喘颗粒对BA大鼠肺组织PIP2、PIP3表达的影响
        4.4 阳和平喘颗粒含药血清对ASMCs增殖的影响
    5 讨论
        5.1 阳和平喘颗粒含药血清对ASMCs增殖的影响
        5.2 阳和平喘颗粒含药血清对PI3K/PKB信号通路的影响
结论
参考文献
综述
    参考文献
个人简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]谈谈冬季哮喘的中医药防治与调养[J]. 马淑然,Tianyi.  生命世界. 2018(01)
[2]Transplantation of bone marrow-derived endothelial progenitor cells and hepatocyte stem cells from liver fibrosis rats ameliorates liver fibrosis[J]. Ling Lan,Ran Liu,Ling-Yun Qin,Peng Cheng,Bo-Wei Liu,Bing-Yong Zhang,Song-Ze Ding,Xiu-Ling Li.  World Journal of Gastroenterology. 2018(02)
[3]射干麻黄汤治疗哮喘对患者呼吸功能的影响分析[J]. 卫慧,赵蓓.  中国处方药. 2017(12)
[4]麻杏石甘汤对哮喘模型大鼠肺组织STAT4及其mRNA表达的影响[J]. 虞琳,潘建伟,叶乐平.  浙江医学. 2017(21)
[5]阳和平喘颗粒对哮喘模型大鼠IgE、IL-4及AP-1表达的影响[J]. 桂洁,汪永忠,韩燕全,潘凌宇.  中医药临床杂志. 2017(10)
[6]哮喘动物模型的建立方法研究进展[J]. 周艳丽,阮研硕,劳文艳,赵晓红.  环境与健康杂志. 2017(10)
[7]射干麻黄汤治疗小儿咳嗽变异性哮喘的疗效及对血清IgE、IL-4、TNF-α水平的影响[J]. 陈华侨,王宝珍.  陕西中医. 2017(10)
[8]加味定喘汤治疗支气管哮喘慢性持续期临床观察[J]. 杨洋,黄燕凤.  陕西中医. 2017(10)
[9]支气管哮喘慢性持续期中医临床表型探索[J]. 张霞,李辉,李亮,李光熙,刘世刚,李萌,张九卿.  世界科学技术-中医药现代化. 2017(09)
[10]小青龙汤联合中药封包治疗外寒里饮型支气管哮喘的临床研究[J]. 曹芬芬,万丽玲,刘美年,丁兆辉,叶超,王丽华.  中医药通报. 2017(04)

博士论文
[1]芪味理肺汤调控转录因子活化蛋白-1（AP-1）治疗支气管哮喘的机制研究[D]. 李四维.北京中医药大学 2014



本文编号：3636006