重楼皂苷Ⅱ体外抗肺癌活性、分子机制及其制剂处方前研究

发布时间：2022-02-21 22:32

　　目的:肺癌是全世界最为常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率在癌症中均居第一位,随着肺癌病程的发展,癌细胞极易发生侵袭、转移,这也是肺癌难以治愈,生存率低的主要原因。目前治疗肺癌方式不足,亟需研究开发新的抗肺癌药物,以延长患者的生存期,提高患者的生存质量。中药重楼（Rhizoma Paridis）是传统中医配伍抗癌方剂的常用药物,现代药理学研究证明重楼具有抗肿瘤、镇定止痛、抑菌消炎等作用,重楼皂苷是其主要活性成分。目前研究报道较多的是常见重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅵ和重楼皂苷Ⅶ,事实上重楼中还有很多具有生物活性的皂苷类成分。此外,相关的研究多为探讨重楼皂苷诱导癌细胞凋亡和自噬性死亡,关于重楼皂苷抑制癌细胞侵袭、转移作用及相关机制尚未见广泛报道。基于以上相关资料,本研究拟选取肺腺癌A549细胞模型作为研究对象,研究九种重楼皂苷单体（重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅲ、重楼皂苷Ⅴ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷H、纤细薯蓣皂苷、17-羟基纤细薯蓣皂苷）对A549细胞生长抑制及侵袭、转移作用的影响;并通过以上实验结果筛选出抑制作用强的重楼皂苷Ⅱ进行深入研究,从PI3K/AKT/mTOR信号通路切入... 

【文章来源】：湖北中医药大学湖北省

【文章页数】：101 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
前言
第一章 九种重楼皂苷抑制A549细胞生长、迁移、侵袭的作用研究
    1.1 实验材料
        1.1.1 细胞来源
        1.1.2 实验试剂
        1.1.3 主要试剂的配制
        1.1.4 实验仪器和设备
    1.2 实验方法与步骤
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 MTT法测定九种重楼皂苷对A549 细胞的生长抑制作用
        1.2.3 Transwell法检测九种重楼皂苷对A549 细胞侵袭能力的影响
        1.2.4 划痕实验检测重楼皂苷对A549 细胞迁移能力的影响
        1.2.5 统计分析
    1.3 .实验结果
        1.3.1 九种重楼皂苷对A549 细胞的增殖均具有抑制作用
        1.3.2 九种重楼皂苷均能抑制A549 细胞的侵袭能力
        1.3.3 九种重楼皂苷均能抑制A549 细胞的迁移作用
    1.4 小结与讨论
第二章 重楼皂苷Ⅱ抑制A549 细胞侵袭和迁移的作用机制研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞来源
        2.1.2 实验试剂
        2.1.3 主要试剂的配制
        2.1.4 主要仪器和设备
    2.2 实验方法与步骤
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 采用Real-time PCR检测细胞中m RNA的表达
        2.2.3 采用Western blotting检测细胞蛋白表达
        2.2.4 统计分析
    2.3 实验结果
        2.3.1 重楼皂苷Ⅱ对A549 细胞中MMP-1、MMP-2和MMP-9 基因水平的调控
        2.3.2 重楼皂苷Ⅱ对A549 细胞中MMP-1、MMP-2和MMP-9 蛋白表达的调控
        2.3.3 重楼皂苷Ⅱ对A549 细胞中PI3K/AKT/mTOR信号通路的调控
    2.4. 小结与讨论
第三章 重楼皂苷Ⅱ平衡溶解度、稳定性及油水分配系数的测定
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验试剂
        3.1.2 实验仪器
    3.2 实验方法与步骤
        3.2.1 溶液的配制
        3.2.2 确定重楼皂苷Ⅱ的紫外吸收波长
        3.2.3 平衡溶解度的测定
        3.2.4 不同pH值下重楼皂苷Ⅱ稳定性的考察
        3.2.5 不同pH值下重楼皂苷Ⅱ表观油水分配系数测定
    3.3 实验结果
        3.3.1 重楼皂苷Ⅱ紫外波长扫描
        3.3.2 方法学考察
        3.3.3 重楼皂苷Ⅱ平衡溶解度的测定
        3.3.4 不同pH值条件下重楼皂苷Ⅱ稳定性的考察
        3.3.5 重楼皂苷Ⅱ油水分配系数的测定
    3.4 小结与讨论
结语
参考文献
附录 文献综述
    参考文献
攻读学位期间发表的科研成果目录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[10]黑籽重楼化学成分及其抗肿瘤活性研究[J]. 景松松,王颖,李雪娇,李霞,黄璐琦,肖培根,高文远.  中草药. 2017(06)

硕士论文
[1]黄芪抗肿瘤的有效成分及作用机制的研究进展[D]. 李亚男.重庆医科大学 2017
[2]重楼活性单体PP-26对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用及其机制[D]. 刘纪明.暨南大学 2016
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本文编号：3638161