柚皮素对神经细胞糖氧剥夺/再灌注模型氧化应激作用影响的实验研究

发布时间：2022-02-24 20:11

　　目的:为研究柚皮素（NAR）对处于脑缺血再灌注损伤中的神经细胞的保护作用及其可能机制,以SD大鼠为实验对象,采用体外原代大脑皮层神经细胞培养氧糖剥夺/再灌注（oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/Rep）模型探索柚皮素干预对处于脑缺血缺氧再灌注损伤的神经细胞在核因子E2相关因子（Nrf2）通路调控的抗氧化应激层面的作用关系,明确柚皮素在脑缺血再灌注损伤的神经保护作用方面的机制。方法:1、将培养好的在对数生长期的大鼠皮层神经元细胞进行免疫荧光染色并进行鉴定。2、将SD大鼠的大脑皮层神经细胞建立OGD/Rep模型。3、用不同浓度NAR干预48h后,检测细胞活性及凋亡情况,检测凋亡相关蛋白Capase-3、bax、bcl-2、CytC在蛋白和基因层面的表达水平。检测各组细胞中ROS、MDA和GSH水平及SOD活性。4、通过转染siRNA-Nrf2、OENrf2干扰Nrf2表达,进行OGD/Rep培养后,给予80μΜ的NAR处理48h后,检测细胞活性及凋亡情况。检测各组细胞ROS、MDA和GSH水平及SOD活性。检测Nrf2蛋白核内转移情... 

【文章来源】：广西中医药大学广西壮族自治区

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
abstract
引言
1 柚皮素对神经细胞氧糖剥夺/再灌注培养模型的线粒体结构及功能作用的实验研究
    1.1 材料与方法
        1.1.1 材料
        1.1.2 方法
    1.2 结果
        1.2.1 大鼠皮质神经细胞元代培养及鉴定
        1.2.2 柚皮素对氧糖剥夺/再灌注模型神经元活力和凋亡的影响检测
    1.3 小结
2 基于NRF2通路的抗氧化作用研究柚皮素对氧糖剥夺/再灌注模型神经细胞作用的实验研究
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果
        2.2.1 NRF2相关沉默及过度表达基因转染效率鉴定
        2.2.2 柚皮素预处理及NRF2表达水平对氧糖剥夺/再灌注大鼠大脑皮层神经细胞活性的作用
        2.2.3 柚皮素预处理及NRF2表达水平对氧糖剥夺/再灌注大鼠大脑皮层神经细胞氧化应激作用的影响
        2.2.4 柚皮素对氧糖剥夺/再灌注大鼠大脑皮层神经细胞NRF2信号通路相关蛋白的影响
    2.3 小结
3 讨论
    3.1 体外建立氧糖剥夺/再灌注模型的必要性
    3.2 缺血性脑卒中神经细胞缺血缺氧后再灌注中氧化应激损伤的机制
    3.3 NRF2介导的抗氧化通路对缺血再灌注氧化应激中神经细胞的的保护机制
    3.4 柚皮素对缺血再灌注氧化应激中神经细胞的的保护机制
    3.5 中医学对缺血性脑卒中及含有柚皮素相关方药的认识
        3.5.1 中医学对于缺血性脑卒中病因病机的认识
        3.5.2 温胆汤对于风痰阻络型中风病的治疗
        3.5.3 温胆汤中含柚皮素的相关药物对缺血性脑卒中的作用
    3.6 不足与展望
全文总结
参考文献
缩略词表
综述
    参考文献
致谢
个人简历及攻读学位期间获得的科研成果


【参考文献】：
期刊论文
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[2]中国缺血性脑卒中和短暂性脑缺血发作二级预防指南2014[J]. 王拥军,王春雪,缪中荣.  中华神经科杂志. 2015 (04)
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本文编号：3643433