白鲜皮多糖的结构特征及药理活性研究

发布时间：2022-02-26 12:55

　　目的对白鲜皮多糖（Dictamnus dasycarpus polysaccharide,DDP）进行提取、分离纯化、结构分析、活性筛选及其抗银屑病活性研究,为深入开展DDP抗银屑病的药效关系及分子机制研究提供实验依据,为DDP用于银屑病等免疫性疾病治疗的研究与开发奠定基础。方法（1）通过水提取醇沉淀法提取白鲜皮多糖,利用苯酚-硫酸法测定糖含量,硫酸-咔唑法测定糖醛酸含量,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量;三氯乙酸法除去蛋白质,活性炭脱色;纯化后的多糖通过膜分离技术分为分子量大小不同的7段。（2）采用MTT比色分析法测定DDP体外免疫活性;利用体外清除DPPH自由基（DDPH·）、超氧阴离子自由基（·O₂^-）、羟自由基（·OH）的能力,测定DDP的抗氧化活性来筛选活性多糖。（3）建立咪喹莫特乳膏诱导小鼠银屑病模型,给予筛选所得DDP-D、DDP-E、DDP-F活性多糖,通过皮肤PASI评分,背部皮肤的病理形态学观察,小鼠血清中的IL-17、IL-23的表达,考察三种多糖的抗银屑病活性。（4）DEAE Cellulose-52柱色谱对DDP-D和DD... 

【文章来源】：佳木斯大学黑龙江省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第1章 文献综述
    1.1 白鲜皮的研究进展
        1.1.1 白鲜皮的化学成分
        1.1.2 白鲜皮的药理作用
        1.1.3 白鲜皮的临床应用
    1.2 中药多糖研究进展
        1.2.1 多糖的提取分离方法
        1.2.2 多糖的结构分析方法
        1.2.3 中药多糖的药理活性研究
    1.3 银屑病治疗的研究进展
        1.3.1 银屑病的发病机制
        1.3.2 银屑病的治疗药物
    1.4 小结与展望
第2章 白鲜皮多糖的提取与分离
    2.1 仪器与材料
        2.1.1 仪器
        2.1.2 试剂
        2.1.3 材料
    2.2 方法
        2.2.1 DDP的提取
        2.2.2 多糖含量测定
        2.2.3 糖醛酸含量测定
        2.2.4 多糖中蛋白质含量测定
        2.2.5 除蛋白
        2.2.6 除色素
        2.2.7 白鲜皮多糖的膜分离技术
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 DDP提取
        2.3.2 DDP中的糖含量
        2.3.3 DDP中的糖醛酸含量
        2.3.4 DDP中的蛋白质含量
        2.3.5 除蛋白
        2.3.6 除色素
        2.3.7 膜分离
        2.3.8 讨论
    2.4 小结
第3章 不同分子量DDP抗氧化及免疫调节活性筛选
    3.1 仪器与材料
        3.1.1 仪器
        3.1.2 试剂
        3.1.3 材料
    3.2 方法
        3.2.1 DDP-A～G免疫活性筛选
        3.2.2 DDP-A～G体外抗氧化活性筛选
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 DDP-A～G免疫调节活性
        3.3.2 DDP-A～G抗氧化活性
        3.3.3 讨论
    3.4 小结
第4章 DDP-D、DDP-E和DDP-F抗小鼠银屑病的研究
    4.1 仪器与材料
        4.1.1 仪器
        4.1.2 试剂
        4.1.3 材料
    4.2 方法
        4.2.1 实验分组
        4.2.2 咪喹莫特诱导小鼠银屑病样模型的建立
        4.2.3 给药剂量计算
        4.2.4 给药
        4.2.5 观察
        4.2.6 各组小鼠银屑病样皮损严重程度评分
        4.2.7 样本取材
        4.2.8 HE染色及形态观察
        4.2.9 ELISA法检测血清中细胞因子的含量
        4.2.10 统计学分析
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 小鼠的活动度和饮水饮食及体重变化情况
        4.3.2 DDP对银屑病小鼠皮损变化的影响
        4.3.3 DDP对银屑病小鼠皮肤病理形态的分析
        4.3.4 DDP对银屑病小鼠血清中IL-17和IL-23的影响
        4.3.5 讨论
    4.4 小结
第5章 DDP-D和DDP-E的分离纯化及结构解析
    5.1 仪器与材料
        5.1.1 仪器
        5.1.2 试剂
    5.2 方法
        5.2.1 DEAE Cellulose-52柱色谱分离纯化DDP-D和DDP-E
        5.2.2 纯度及分子量的测定
        5.2.3 白鲜皮均一多糖单糖组成分析
        5.2.4 高碘酸氧化
        5.2.5 Smith降解
        5.2.6 甲基化分析
        5.2.7 白鲜皮均一多糖红外光谱分析
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 白鲜皮均一多糖分离纯化结果
        5.3.2 均一多糖纯度及分子量结果
        5.3.3 单糖组成分析
        5.3.4 DDP-D1结构特征分析
        5.3.5 DDP-D2结构特征分析
        5.3.6 DDP-E1结构特征分析
        5.3.7 DDP-E2结构特征分析
        5.3.8 讨论
    5.4 小结
结论
参考文献
致谢
英文缩写
攻读学位期间发表的学术成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]白鲜皮的药理作用及抗炎活性成分研究进展[J]. 周晓鹰,陈洁,金柳,魏涛.  常州大学学报(自然科学版). 2018(01)
[2]银屑病的临床治疗进展[J]. 王凯,曾嘉琦,王笑然,车永哲.  医学综述. 2017(23)
[3]白鲜皮多糖的提取工艺及其抗氧化活性研究[J]. 初维,李兰兰,李岩,王宇亮,张宇,赵宏.  中华中医药学刊. 2017(07)
[4]银屑病治疗的研究进展[J]. 陈卓,杨洁,毕廷民,孙小强,刘阳,姜峰,金慧,薄开平,赵倩,李京涛.  中国煤炭工业医学杂志. 2017(05)
[5]白鲜皮化学成分及药理活性研究进展[J]. 刘雷,郭丽娜,于春磊,孙宇,刘吉成.  中成药. 2016(12)
[6]白鲜皮化学成分的研究[J]. 郭丽娜,王芮,裴月湖,刘雷,孙辑凯,丛欢,崔红霞,王晓丽,李文静,简白羽,刘吉成.  中成药. 2016(11)
[7]白鲜皮多糖的提取及分子特性研究[J]. 曹荣安,李良玉,林剑,瞿东杨,张邢晨,贾建.  黑龙江八一农垦大学学报. 2016(04)
[8]白鲜皮提取物外用抗炎作用实验研究[J]. 王殷东,孙璐,范佳红,谢婷婷,瞿丹倩,蔡贞贞.  辽宁中医药大学学报. 2015(06)
[9]银屑病治疗靶点及其药物研发进展[J]. 陈明,钟杰敏,刘冠萍,李柏霖,陈新.  中国医院药学杂志. 2015(09)
[10]白鲜皮水提物对植物病原真菌的抑菌活性[J]. 马炳阳,赵成爱,韩璐,侯蓓,卢泽.  农药. 2015(01)

博士论文
[1]姜黄素影响HaCaT细胞增殖的靶点及对TPA诱导的银屑病小鼠模型的作用研究[D]. 赵一.第二军医大学 2013



本文编号：3644557