山西不同产地酸枣仁的ITS序列比较研究
发布时间:2022-06-02 22:54
目的:通过分析山西不同产地酸枣仁核糖体基因内部转录间隔区序列,为酸枣仁药材鉴定提供DNA分子标记方法。方法:采用植物基因组DNA快速提取试剂盒的方法,提取22个不同产地酸枣仁药材中的总DNA,以通用引物采用PCR扩增rDNA-ITS序列并测序。采用contig分析软件进行序列拼接、CLUSTAL X软件进行序列比对,再使用MEGA 7.0软件进行遗传分析并构建系统发育树。结果:种内变异位点分析共获得22条ITS序列,11个单倍型,根据单倍型的数目,单倍型1、单倍型2、单倍型3为酸枣仁的核心单倍型,占所有条带的60.87%。种间序列分析NJ树分为两大支,正品酸枣仁与伪品枳椇子各一支,聚类分析可以对酸枣仁及其伪品ITS序列差异进行识别。结论:rDNA-ITS序列可用于对山西不同产地酸枣仁的分析,是酸枣仁药材分子鉴定的有效方法之一。
【文章页数】:6 页
【文章目录】:
材料
1. 仪器
2. 试剂
方法
1.DNA提取
2. DNA浓度检测
3. PCR扩增
3.1 引物
3.2 反应体系
3.3 PCR反应体系条件考察
3.3.1 退火温度的考察:实验随机选用样品T1和J2,设置温
3.3.2 DNA模板浓度考察:实验选用样品T1和J2考察PCR
3.4 循环参数
4. 电泳
5. PCR产物测序
5.1 种内变异位点分
5.2 种间序列分析
结果与序列分析
讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]中药白头翁及混伪品的DNA条形码分子鉴定[J]. 张丹纯,宫璐,黄志海. 中华中医药杂志. 2020(02)
[2]南方红豆杉不同组织总RNA提取方法研究[J]. 陶倩,范慧艳,张水利,陈如兵,楼柯浪,张春椿. 中华中医药杂志. 2018(08)
[3]酸枣仁汤治疗失眠的有效成分预测与靶点通路分析[J]. 邝梓君,汤顺莉,黄雁,赵金龙,陈国铭,张家萌,张琳琳,张洁,田燕华,赖家文. 中华中医药杂志. 2018(08)
[4]酸枣仁、理枣仁及枳椇子的显微鉴别[J]. 王雪,杨光,周修腾,邵爱娟,韦颖,池秀莲,李颖,程蒙,李晓琳. 现代中药研究与实践. 2018(03)
[5]酸枣仁中黄酮成分及其药理作用研究进展[J]. 张婷,张岩,王文彤,陶遵威. 天津药学. 2018(01)
[6]Molecular Identification of Salvia miltiorrhiza Bge. and Its Adulterants Based on ITS2 Sequences[J]. Ping ZHANG,Xianjun LI,Weibo DU,Jingran CHEN,Jing FU,Zhiqiang ZHANG,Jianmei SHEN. Agricultural Biotechnology. 2018(01)
[7]市售中药材冬葵子和苘麻子ITS2条形码鉴定[J]. 高婷,辛天怡,宋洁洁,宋经元. 中草药. 2017(13)
[8]基于ITS序列位点特异性PCR的酸枣仁及其混伪品的鉴别[J]. 李桂林,宋雅迪,吕振晖,刘春晖,李佳,张夏楠. 中国现代中药. 2016(12)
[9]中药酸枣仁的真伪鉴别方法研究[J]. 刘薇,李明华,余坤子,程显隆,魏锋,马双成. 药物分析杂志. 2015(09)
[10]五味子科的系统发育:核糖体DNAITS区序列证据[J]. 刘忠,汪小全,陈之端,林祁,路安民. 植物学报. 2000(07)
本文编号:3653239
【文章页数】:6 页
【文章目录】:
材料
1. 仪器
2. 试剂
方法
1.DNA提取
2. DNA浓度检测
3. PCR扩增
3.1 引物
3.2 反应体系
3.3 PCR反应体系条件考察
3.3.1 退火温度的考察:实验随机选用样品T1和J2,设置温
3.3.2 DNA模板浓度考察:实验选用样品T1和J2考察PCR
3.4 循环参数
4. 电泳
5. PCR产物测序
5.1 种内变异位点分
5.2 种间序列分析
结果与序列分析
讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]中药白头翁及混伪品的DNA条形码分子鉴定[J]. 张丹纯,宫璐,黄志海. 中华中医药杂志. 2020(02)
[2]南方红豆杉不同组织总RNA提取方法研究[J]. 陶倩,范慧艳,张水利,陈如兵,楼柯浪,张春椿. 中华中医药杂志. 2018(08)
[3]酸枣仁汤治疗失眠的有效成分预测与靶点通路分析[J]. 邝梓君,汤顺莉,黄雁,赵金龙,陈国铭,张家萌,张琳琳,张洁,田燕华,赖家文. 中华中医药杂志. 2018(08)
[4]酸枣仁、理枣仁及枳椇子的显微鉴别[J]. 王雪,杨光,周修腾,邵爱娟,韦颖,池秀莲,李颖,程蒙,李晓琳. 现代中药研究与实践. 2018(03)
[5]酸枣仁中黄酮成分及其药理作用研究进展[J]. 张婷,张岩,王文彤,陶遵威. 天津药学. 2018(01)
[6]Molecular Identification of Salvia miltiorrhiza Bge. and Its Adulterants Based on ITS2 Sequences[J]. Ping ZHANG,Xianjun LI,Weibo DU,Jingran CHEN,Jing FU,Zhiqiang ZHANG,Jianmei SHEN. Agricultural Biotechnology. 2018(01)
[7]市售中药材冬葵子和苘麻子ITS2条形码鉴定[J]. 高婷,辛天怡,宋洁洁,宋经元. 中草药. 2017(13)
[8]基于ITS序列位点特异性PCR的酸枣仁及其混伪品的鉴别[J]. 李桂林,宋雅迪,吕振晖,刘春晖,李佳,张夏楠. 中国现代中药. 2016(12)
[9]中药酸枣仁的真伪鉴别方法研究[J]. 刘薇,李明华,余坤子,程显隆,魏锋,马双成. 药物分析杂志. 2015(09)
[10]五味子科的系统发育:核糖体DNAITS区序列证据[J]. 刘忠,汪小全,陈之端,林祁,路安民. 植物学报. 2000(07)
本文编号:3653239
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3653239.html
最近更新
教材专著