丹参饮中四种酚性成分对棕榈酸钠刺激的人脐静脉细胞融合细胞表达ICAM-1的影响

发布时间：2022-11-01 21:28

　　目的:1.建立高效液相色谱（HPLC）法同时测定丹参饮中四种酚性成分丹参素（DSS）、原儿茶酸（PCC）、原儿茶醛（PCL）和丹酚酸B（Sal B）的含量。2.研究这四种酚性成分对棕榈酸钠（SPA）刺激的人脐静脉细胞融合细胞（EA.hy926）表达细胞间黏附分子（ICAM-1）的影响及其作用机制。方法:1.建立HPLC法测定丹参饮中四种酚性成分的含量:采用Genmini5μm C18 110A（250×4.60mm,5μm）色谱柱,以乙腈（A）-0.05%三氟乙酸（B）溶液为流动相,梯度洗脱（0~7min,2%A→10%A;7~20min,10%A→23%A;20~35min,23%A→27%A;35~38min,27%A→38%A;38~42min,38%A;42~43min,38%A→2%A;43~56min,2%A）,流速0.8ml/min,柱温为25℃,检测波长288nm,进样量15μl。然后进行方法学验证,最后测定丹参饮中四种酚性成分的含量。2.四种酚性成分对SPA诱导EA.hy926表达ICAM-1的影响。设置对照组、模型组、受试药组、阳性对照药组。对照组以牛血清蛋白（BS... 

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文词缩略表
前言
第1章 实验材料
    1.1 实验细胞
    1.2 实验药物
    1.3 试剂及配制
    1.4 实验仪器
第2章 实验方法
    2.1 丹参饮中四种酚性成分的含量测定
        2.1.1 溶液的制备
        2.1.2 色谱条件与系统适用性
        2.1.3 方法学验证
        2.1.4 含量测定
    2.2 EA.hy926的复苏、培养与传代、冻存
        2.2.1 细胞复苏
        2.2.2 细胞培养与传代
        2.2.3 细胞冻存
    2.3 MTT法检测SPA刺激EA.hy926的生存率及药物的影响
    2.4 FCM检测SPA刺激EA.hy926引起细胞凋亡及药物的影响
    2.5 油红染色法检测SPA刺激EA.hy926形成泡沫细胞及药物的影响
    2.6 ELISA法检测SPA刺激的EA.hy926 ICAM-1 蛋白表达水平及药物的影响
    2.7 WB法检测SPA刺激的EA.hy926对TLRs/MyD88/NF-κB通路和ICAM-1 的作用及药物的影响
    2.8 统计学处理
第3章 实验结果
    3.1 丹参饮中四种酚性成分的含量
        3.1.1 色谱条件与系统适用性
        3.1.2 方法学验证
        3.1.3 含量测定
    3.2 SPA刺激EA.hy926的生存率及药物的影响
    3.3 SPA刺激EA.hy926引起细胞凋亡及药物的影响
    3.4 SPA刺激EA.hy926形成泡沫细胞及药物的影响
    3.5 SPA刺激的EA.hy926ICAM-1 蛋白表达水平及药物的影响（ELISA法）
    3.6 SPA刺激的EA.hy926对TLRs/MyD88/NF-κB通路和ICAM-1的作用及药物的影响(WB法)
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
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[6]加味丹参饮对血瘀证心肌缺血再灌注损伤家兔内皮细胞保护作用研究[J]. 李鑫辉,黄政德,葛金文.  中国药师. 2011(01)
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本文编号：3700131