雷公藤红素在小鼠真菌性角膜炎中通过LOX-1-p38MAPK通路发挥抑炎作用的实验研究

发布时间：2022-11-08 22:25

　　目的:研究雷公藤红素在烟曲霉菌性角膜炎中的抑炎作用及其作用机制。方法:1、烟曲霉菌感染小鼠角膜建立小鼠真菌性角膜炎模型。使用雷公藤红素或相应浓度的二甲基亚砜（DMSO）在感染1天拆线后进行局部处理,使用裂隙灯对感染后1天、3天和5天的小鼠角膜进行拍照并记录临床评分。采用HE染色法对比感染后3天不同处理组中炎性细胞浸润情况。2、采用q RT-PCR、ELISA和Western blot法检测烟曲霉菌感染后雷公藤红素处理组和溶剂对照处理组中小鼠角膜的促炎因子、抑炎因子以及LOX-1的m RNA以及蛋白表达水平改变情况。3、收取经过不同处理后的小鼠原代腹腔巨噬细胞,分为正常组、雷公藤红素预处理组、溶剂对照预处理组、真菌刺激组、雷公藤红素预处理加菌刺激组以及溶剂对照预处理加菌刺激组,用于体外细胞实验检测相关炎症指标。采用q RT-PCR、ELISA法检测各处理组中促炎因子IL-1β、TNF-α、MIP-2的m RNA以及蛋白表达水平改变情况;采用q RT-PCR、ELISA法检测巨噬细胞各处理组中抑炎因子IL-10和TGF-β的m RNA以及蛋白表达水平改变情况。4、采用q RT-PCR法检测... 

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
材料与方法
    1 实验材料
        1.1 实验对象
        1.2 实验主要仪器与设备
        1.3 实验主要相关耗材
    2 实验方法
        2.1 烟曲霉菌培养与菌丝的制备
        2.2 C57BL/6 小鼠真菌性角膜炎动物模型构建
        2.3 雷公藤红素的制备与保存
        2.4 C57BL/6 小鼠角膜经雷公藤红素局部处理实验
        2.5 小鼠腹腔原代巨噬细胞提取方法
        2.6 CCK-8 检测雷公藤红素药物毒性实验
        2.7 小鼠腹腔原代巨噬细胞培养、药物预处理以及烟曲霉菌菌丝刺激实验
        2.8 qRT-PCR
        2.9 Western Blot
        2.10 ELISA
        2.11 HE染色
    3 统计学处理
结果
    1 雷公藤红素对于C57BL/6小鼠角膜临床表现的影响
    2 雷公藤红素对烟曲霉菌感染后的小鼠角膜中促炎因子、LOX-1和抑炎因子表达的影响
    3 雷公藤红素对烟曲霉菌感染后小鼠腹腔原代巨噬细胞中促炎因子和抑炎因子表达的影响
    4 雷公藤红素处理后感染烟曲霉菌的小鼠腹腔原代巨噬细胞中LOX-1、p38MAPK和p-p38MAPK表达变化
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
附录
致谢



本文编号：3704665