尾叶香茶菜素A对肝癌细胞中HIF-1α及其靶基因的影响

发布时间：2022-12-04 00:43

　　目的与背景:缺氧诱导型转录因子-1（HIF-1）,是介导肿瘤细胞和组织适应缺氧微环境的异二聚体转录因子,对肿瘤生长施加不同的影响的重要的癌症标志物。文献已经报道HIF-1在多种病因引起的肝病发病机理中起作用。来源于唇形科植物的尾叶香茶菜因其抗炎、抗肿瘤作用备受关注,但其有效成分:二萜类化合物尾叶香茶菜素A以HIF-1α为作用靶标的抗肿瘤作用机制尚不十分明确。因此,此次研究探讨尾叶香茶菜素A对HIF-lα及其靶基因的影响。方法:首先,用荧光素酶报告基因实验以及细胞存活实验,检测药物对HIF-lα转录活性及细胞毒性的影响。其次,免疫印迹分析实验检验尾叶香茶菜素A对Hep3B/Sk-hepl细胞中HIF-lα的蛋白水平以及作用机制;接下来用免疫荧光染色实验进一步验证尾叶香茶菜素A对乏氧诱导的HIF-lα的蛋白细胞核内的累积的影响。然后,RT-PCR验证尾叶香茶菜素A可对HIF-lα调控的靶基因VEGF mRNA的表达的影响。最后,MTT细胞增殖实验、细胞集落实验、EdU实验、流式细胞周期实验以及免疫印迹分析实验检验尾叶香茶菜素A对肝癌细胞增殖的影响。结果:荧光素酶报告基因实验以及细胞存活实验... 

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词简表
第一章 前言
    1.1 肝癌的介绍
        1.1.1 肝癌的发生率
        1.1.2 肝癌的治疗手段
    1.2 缺氧和癌症
    1.3 HIF的介绍
        1.3.1 HIF的结构
        1.3.2 HIF-1α的降解
        1.3.3 HIF-1α的合成
        1.3.4 HIF-1α在癌症中的作用
    1.4 尾叶香茶菜素A的介绍
第二章 实验材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 细胞株及来源
        2.1.2 药物
        2.1.3 仪器
        2.1.4 试剂及抗体
        2.1.5 药品及试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 复苏细胞
        2.2.2 细胞培养
        2.2.3 MTT法检测细胞存活率实验
        2.2.4 荧光素酶报告基因实验
        2.2.5 免疫印迹分析实验
        2.2.6 免疫荧光染色实验
        2.2.7 RT-PCR实验
        2.2.8 细胞周期实验
        2.2.9 Colony formation实验
        2.2.10 EdU检测细胞增殖实验
第三章 结果
    3.1 尾叶香茶菜素A对肝癌细胞中HIF-1α表达的影响
        3.1.1 荧光素酶报告基因实验结果
        3.1.2 细胞存活实验结果
        3.1.3 免疫印迹分析实验结果
        3.1.4 免疫荧光染色实验结果
    3.2 尾叶香茶菜素A对肝癌细胞中HIF-1α调控的靶基因的影响
        3.2.1 尾叶香茶菜素A对肝癌细胞中VEGF表达的影响
        3.2.2 尾叶香茶菜素A对肝癌细胞增殖的影响
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Hypoxia inducible factor in hepatocellular carcinoma:A therapeutic target[J]. Daniel Lin,Jennifer Wu.  World Journal of Gastroenterology. 2015(42)
[2]肝癌综合治疗的现状[J]. 郭武华,张吉翔.  世界华人消化杂志. 2008(20)
[3]Hepatocellular carcinoma: current management and recent advances[J]. Wan-Yee Lau,Eric C. H. Lai.  Hepatobiliary ＆ Pancreatic Diseases International. 2008(03)
[4]世界香茶菜属植物地理分布及其药用前景[J]. 陈林姣,李植华,赖小平.  中药材. 1996(04)



本文编号：3707285